EXPANDED PROGRAMME ON IMMUNIZATION Heat stability of poliovirus and measles vaccines P o l a n d . - A study has been carried out on the heat stability of oral poliovirus and measles vaccmes routinely used in Poland (Vaccines A). The vaccines were compared with relevant vaccines from another source (Vaccines B). The heat stability of both vaccmes has been tested using the accelerated degradation test. Poliovirus vaccines A and B were both products stabilized on magnesium chloride. Samples of vac cines were kept at 4 different thermostatically controlled temperatures at 26 °C, 31 °C, 37 °C and 41 °C. The control sam ples of the same vaccines were kept at 4 °C and at —20 °C. Sam ples were titrated at various intervals; the intervals between tests were shorter at the beginning of the exposure and longer at the end. They were also longer for lower temperature exposure and shorter for higher temperature exposure (Fig. 1, Table 1). The titres were tested at 35-36 °C and expressed in the TCID50/ml. The vaccines were diluted in 0.5 log steps and 5 tubes of primary monkey kidney cell cultures were used for each dilution.
PROGRAMME ÉLARGI DE VACCINATION Thermostabilité des vacdns antipoliomyélitiques et antirougeoleux P o l o g n e . - On a étudié la thermostabilité des vaccins antipoliomyé litiques buccaux et antirougeoleux utilisés systématiquement en Polo gne (vaccins A). Ces derniers ont été comparés à des vaccins correspon dants provenant d’une autre source (vaccins B). La thermostabilité de ces 2 vaccins a été testée à l’aide de l’épreuve de dégradation accélérée. Les vaccins antipoliomyélitiques A et B étaient tous deux stabilisés sur chlorure de magnésium. Des échantillons des vaccins ont été conservés à 4 températures différentes, contrôlées thermostatiquement, soit 26 °C, 31 °C, 37 °C et 41 °C. Des échantillons témoins des mêmes vaccins ont été conservés à 4 °C et a —20 °C. Le titre des échantillons a été établi à différents intervalles, les intervalles entre les épreuves étant plus courts au début de l’exposition et plus longs à la fin. De même, les intervalles étaient plus longs pour les vaccins exposés à des températures plus basses et plus courts pour les expositions à des températures plus élevées (Fig. I, Tableau 1). L es titres, testés à 3536 °C, ont été exprimés en DICT50/ml. Les vaccins ont subi des dilu tions de raison 0,5 log et 5 tubes de cultures primaires de cellules rénales de singe ont été utilisées pour chaque dilution. En outre, des échantillons des 2 vaccins ont été soumis à des cycles répétés de décongélation à 18 °C et de congélation à —20 °C, puis l’on a établi le titre des échantillons à la fin du processus de décongélation/congélation. Les échantillons de vaccin antirougeoleux (A et B) ont été testés sous forme lyophilisée et reconstituée. Les échantillons de vaccin lyophilisé ont été conservés à 26 °C, 37 °C et 41 °C pendant un nombre variable de jours (Fig. 2), cependant que les vaccins reconstitués étaient conservés de 7 à 24 heures à 4 °C, 26 °C, 37 °C et 41 °C (Fig. 3). Les vaccins A et B ont été titrés sur une lignée cellulaire L-41 et en cellules Vero, respec tivement. Us ont subi des dilutions de raison 0,5 log et 5 tubes d’une culture tissulaire ont été utilisés pour chaque dilution.
Additionally, samples of both vaccines were subjected to repeated cycles of thawing at the temperature of 18 °C and freezing at the temperature of —20 °C; samples were titrated at the end of the thawing/freezing process. Samples of measles vaccines (A and B) were tested in the freeze-dried and reconstituted forms. Samples of freeze-dried vaccines were stored at temperatures of 26 °C, 37 °C and 41 °C for varying numbers of days (Fig. 2), while samples of reconstituted vaccines were kept from 7 to 24 hours at 4°C, 26 °C, 37 °C and 41 °C (Fig. 3). Vaccines A and B were titrated on L-41 cell line and Vero cells, respectively. T h e vaccines were diluted in 0.5 log steps and 5 tubes of a tissue culture were used for each diluuon. Degradation rates were calculated as the regression coefficients from the steep part of regression lines; those rates reflect loss of titres per time unit (days for poliovirus and freeze-dried measles vaccmes and hours for reconstituted measles vaccines). Poliovirus vaccines. Titres of both vaccines subjected to re peated cycles of thawing/freezing (6.8 log for both vaccines tested) did not differ significantly from titres of control vaccines kept at —20 °C (log titres for vaccine A 6.9 and for vaccine B 6.85). Those observauons confirm the results of a study reported 10 years ago.1 1 See No 13, 1977, p. 119.
Les taux de dégradation ont été calculés comme les coefficients de régression des droites de régression de plus forte pente ; ces taux reflètent la baisse des titres par unité de temps Goûts pour les vaccins antipoliomyéütiques et antirougeoleux lyophilisés et heures pour les vaccins antirougeoleux reconstitués). Vaccins antipoliomyâitiques. Les titres des 2 vaccins soumis à des cycles répétés de décongélation/congélation (6,8 log pour les 2 vaccins testés) n’ont pas accusé de différence significative par rapport aux titres des vaccins témoins conservés à — 20 °C (titres logarithmiques de 6,9 pour le vaccin A et de 6,85 pour le vaccin B). Ces observations confir ment les résultats d’une étude communiquée il y a 10 ans.1 1 Voir N° 13, 1977, p. 119.
Epidemiological notes contained in dus issue
Informations épidémiologiques contenues dans ce numéro.
Expanded Programme on Im m unization, health pro blems of young males in th e Caribbean, influenza, sexually transm itted diseases, vaccination require m ents for international travel. List o f newly infected areas, p. 3 5 6 .
Grippe, maladies sexuellement transmissibles, problèmes de santé des jeunes hommes aux Caraïbes, programme élargi de vaccination, vaccinations exigées pour les voyages internationaux. Liste des zones nouvellem ent infectées, p. 3 5 6 .
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Fig. 1 Titres of oral poliomyelitis vaccines A and B in TCID50/ml stored for various periods at temperatures of 26 "C, 31 "C, 37 *C and 41 "C, Poland, 1988 T itres des vaccins antipoliomyélitiques buccaux A et B, en DICTSO/ml, stockés pendant différentes périodes à 26 'C, 31 *C, 37 *C et 4 1 'C, Pologne, 1988
Table 1. Degradation rates (loss of titres per time unit) for oral poliovirus and measles vaccines stored for various periods of time at different temperatures, Poland, 1988 Tableau 1. Taux de dégradation (diminution du titre par unité de temps) pour des vaccins antipoliomyélitique buccaux et antirougeoleux conservés pendant différentes périodes à différentes températures, Pologne, 1988 Storage temperature m *C Température de stockage en °C Storage tune analysed D urée de stockage analysée Days Jours Degradation raie for vaccine Taux de dégradation pour les vaccins A B
Vaccine
— Vaccin
Loss of TCID 50 per mUday Baisse de la DICT50 par cnl/jour
Poliomyelitis — Paliomyélue . ..................... .. .
26 31 37 41 ,
7-42 4-28 0-28 0-14 Days Jours
0.04 0.07 0.12 0.30
0.03 0.06 0.10 0.30
Loss of TCID 50 per dose/day Baisse de la DICT50 par dose/jour
Measles freeze-dried — Vaccin - antirougeoleux lyophilisé . . . . . . . . y -
26 37 41
7-49 0-28 0-10 Hours Heures
r 0.014 0.090 0.160
0.008 0.019 0.100
Loss o f TC1D50 per dose/bour Baisse de la DICT50 par dose/beure
Measles reconstituted — Vacan antirougeoleux reconstitué
4 26 37 41
0-24 0-24 0-12 0-7
0.016 0.029 0.119 0.206
0.014 0.027 0.105 0.208
T he degradation rates were proportional to the exposure temperature (Fig. 1, Table 1). There were no significant differ ences in degradation rates between the 2 vaccines tested. At room
Tes taux de dégradation étaient proporuonnels aux températures d ’exposition (Fig. 1, Tableau 1). On n’a pas relevé de différence signi ficative des taux de dégradation entre les 2 vaccins testés. A la
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temperature vaccines were retaining their initial titres for 7 to 14 days; on longer storage, the degradation rates ranged between log 0.03 to 0.04 per day (Table 1). At 31 “C both vaccines retained their titres for 2 days and lost about 0.06-0.07 log each day on further storage at <the same temperature. The degradation rates increased with the storage temperature. At 37 °C, vaccines lost about log 0.11 per day, while at 41 °C vaccines lost about half of their potency each day (log 0.3). The numbers of days needed for the titre to decline by log O.S were about 20, 10, 3 and 1.5 for temperatures of 26 °C, 31 °C, 37 °C and 41 °C. Measles vaccines. Although both freeze-dried vaccines fulfilled WHO requirements for heat stability (at least 1000 TCID50 per dose and the loss of not more than 1 log after 1 week’s exposure at 37 °C), vaccine B showed higher resistance to heat exposure than vaccine A. Vaccine A retained th e titre of log 3 for about 10 days at 37 °C; while vaccine B showed that titre still after 30 days of exposure at 37 °C (Fig. 2). Degradation rates were higher for vaccine A at all temperatures used (Table I). At room temperatures both vaccines retained satisfactory potency for at least 70 days. Differences in heat stability between the 2 vaccines diminished considerably after their reconstitution (Fig. 3, Table 1). Both vaccmes rapidly lost their potency after exposure to elevated temperatures; th e titres declined below log 3 after 3-5 hours of exposure to 37 °C and after 1-2 hours’ exposure to41 °C. Recon stituted vaccines kept at 4 °C retained their potency (above log 3) for at least 24 hours ; at 26 °C, the titres declined below log 3 after 12-18 hours of exposure.
température ambiante, les vaccins ont conservé leurs titres initiaux pendant 7 à 14 jours; au-delà, les taux de dégradation se situaient entre log 0,03 et log 0,04 par jour (Tableau 1). A 31 °C, les 2 vaccins ont conservé leurs tines pendant 2 jours, puis perdu environ 0,06-0,07 log par jour à la même température. Les taux de dégradation augmentaient avec la température. A 37 °C, les vaccins perdaient environ log 0,11 par jour alors qu’à 41 °C, ils perdaient environ la moitié de leur activité par jour (log 0,3). Les nombres de jours écoulés avant que le titre diminue de log 0,5 ont été respectivement d’environ 2 0 ,1 0 ,3 et 1,5 pour des températures de 26°C, 31 °C, 37°C et 41 °C. Vaccins antirougeoleux. Bien que les 2 vaccins lyophilisés répondaient aux normes de l’OMS en matière de thermostabilité (au moins 1000 DICTS0 par dose et une perte d’activité de. 1 log au plus au bout d’une semaine d’exposition à 37 °C), le vaccin B a manifesté une plus forte résistance à la chaleur que le vaccin A. Le vaccin A a conservé son titre de log 3pendant environ 10 jours à 37 °C alors que le vaccin B présentait encore ce titre après 30 jours d’exposition à 37 "C (Fig. 2). Il est apparu que les taux de dégradation étaient plus élevés pour le vaccin A à toutes les températures utilisées ( Tableau 1). A la température ambiante, les 2 vaccins ont conservé une activité satisfaisante pendant au moins 70 jours. Les différences de thermostabilité relevées entre les 2 vaccins ont considérablement diminué après leur reconstitution (Fig. 3, Tableau 1). Les 2 vaccins ont rapidement perdu leur activité après une exposition à des températures élevées; les titres sont tombés en deçà delog 3 au bout de 3 à 5 heures d’exposition à 37 °C et après 1-2 heures d’exposition à 41 °C. Les vaccins reconstitués conservés à 4°C ont conservé leur acti vité (titre logarithmique supérieur à 3) pendant au moins 24 heures; à 26 “C, les titres sont tombés au-dessous de log 3 après 12 à 18 heures d’exposition.
Fig. 2 T itres of freeze-dried m easles vaccines A and B in T C ID 50 per single human dose, stored for various periods at temperatures of 26 T , 3 7 'C and 4 1 'C , Poland, 1988 T itres des vaccins antirougeoleux lyoph ilisés A et B , en DIC T50 par dose unique, stockés pendant différentes périodes à 26 "C, 37 ‘C et 41 ‘C , Pologne, 1988
26 "C
37'C
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F ig-3 T itres o f reconstituted m easles vaccines A and B in TCIDSO per single human dose, stored at temperatures o f 4 'C , 26 *C, 37 “ C and 41 *C, Poland, 1988 T itres des vacdns antirougeoleux reconstitués A e t B, en DICTSO par dose unique, stockés à des températures de 4 "C, 26 C , 3 7 C et 41 ’C, Pologne, 1988
Log TC ID 50/dose — Log D IC T 50/dose
------- ------4 X
--------------- 26X
.................... 37X
-------------- 41X
(Based on/D’après: A report from the National Institute of Hygiene, Warsaw/Un rapport de l’Institut d’Hygiène, Varsovie.)