ACQUIRED IMMUNODEFICIENCY SYNDROME (AIDS) Recommendations for the interpretation of HTV-2 Western blot results Following the recommendations agreed upon at a meeting of the WHO Collaborating Group on HIV-2 (human immuno deficiency virus type 2) held in Montreal in June 1989, a study was organized to review the criteria for HIV-2 Western blot reactivity for epidemiological investigation. The study consisted of re-testing serum specimens collected from 14 countries and considered Western blot positive for HIV-2 by national criteria. Blind testing was conducted in 2 different WHO reference labor atories. Diagnostic kits used by the 2 laboratories were: Wellcozyme recombinant HFV-1, Pasteur Elavia-2, DuPont Western blot HIV-1 and Pasteur Newlavblot 2. Specimens considered indeterminate on Western blot were to be retested by radioimmuno precipitation assay (RIPA). Specimens that were reac tive to envelope glycoproteins (gp) of both HIV-1 and HIV-2 were tested by transmembrane-related synthetic peptide assay (Pasteur Peptilav 1-2).
SYNDROME D’IMMUNODÉFICIENCE ACQUISE (SIDA) Recommandations pour l’interprétation des résultats des tests de dépistage du VEH-2 par immunotransfert Conformément aux recommandations d’une réunion du groupe de collaborateurs de l’OMS sur le VIH-2 (virus de l’immunodéficience humaine type 2), qui s’est tenue à Montréal en juin 1989, une étude a été réalisée avec pour objectif de réviser les critères de positivité pour le VIH-2 par la technique de l’immunotransfert (Western blot) pour les enquêtes épidémiologiques. L’étude a consisté à réexaminer des échan tillons de sérum recueillis dans 14 pays et considérés comme positifs pour le VIH-2 lorsque les résultats de l’immunotransfert étaient inter prétés selon des critères nationaux. Ces essais ont été menés en aveugle dans 2 laboratoires de référence OMS. Les tests utilisés par les 2 labo ratoires étaient les suivants: Wellcozyme recombinant HTV-1, Pasteur Elavia-2, DuPont Western blot HIV-1 et Pasteur Newlavblot 2. Les échantillons ayant donné un résultat indéterminé par immunotransfert devaient être réexaminés en RIPA (radio-immuno-précipitauon). Ceux qui réagissaient sur les glycoprotéines (gp) d’enveloppe des 2 virus VIH1 et VIH-2 ont été examinés par un test utilisant des peptides en bandes représentant des glycoprotéines transmembranaires (Pasteur Peptilav 1-
2). Results of all tests performed on 135 serum specimens in both laboratories were m agreement, and were as follows: 81 (60%) were positive for HIV-2 only, 34 (25%) were negative for both HIV-1 and H IV -2,18 (14%) were positive for HIV-1 only, 2 (2%) were double reactive for HIV-1 and HIV-2 ; none of the sera were indeterminate. All 81 specimens identified as HIV-2 reacuve contained antibodies to at least 2 envelope glycoproteins on HTV2 Western blot. Thirty per cent of specimens reactive to HIV-1 also reacted to the manufacturer-identified gpl05 of HIV-2, without other envelope cross-reactivity. Les résultats de tous les essais effectués sur 135 échantillons de sérum dans les 2 laboratoires étaient concordants. Ces résultats sont les sui vants: 81 sérums (60%) se sont révélés positifs pour le seul VIH-2, 34 (25%) négatifs pour le VIH-1 et le V IH -2,18 (14%) positifs pour le seul VIH-1, ~2 (2%) positifs pour le VIH-1 et le VIH-2; aucun sérum n’a donné de résultat indéterminé. Les 81 échantillons reconnus comme positifs pour le VIH-2 contenaient des anticorps réagissant sur au moins 2 glycoprotéines d’enveloppe pour le VIH-2 par immunotransfert. Trente pour cent des échantillons positifs pour le VIH-1 ont également réagi sur la glycoprotéine dénommée gpl05 du VIH-2 identifiée par le fabricant, sans présenter de réaction croisée avec d’autres glycoprotéines de l’enveloppe. En tenant compte uniquement des résultats des immunotransferts effectués sur les 81 échantillons identifiés comme étant positifs pour le VIH-2, les immunotransferts ont ensuite été interprétés selon des critè res établis par l’OMS (VIH-1 et VIH-2), par les Centers for Disease Control (CDC) (VIH-1 et, pour le VIH-2, les bandes équivalentes), et selon les critères recommandés par les fabricants (DuPont et Pas teur). L’application des critères OMS et CDC a donné des résultats très voisins : environ la moitié des 81 sérums ont été déclarés positifs pour le VIH-2, tandis que les autres étaient considérés comme doublement réactifs (VIH-1 et VIH-2). Selon les critères DuPont (VIH-1) et Pasteur (VIH-2), environ un tiers des 81 sérums ont été considérés comme positifs pour le VIH-2, ce qui démontre une moindre sensibilité. A la lumière des observations ci-dessus, le groupe a recommandé une révision des critères OMS définis en février 1989 pour l’interprétation des tests de dépistage du VIH-2 par la technique de l’immunotransfert: Les critères révisés sont les suivants:
Considering only the Western blots of the 81 specimens iden tified as HIV-2 reactive, these were then interpreted using criteria established by WHO (HIV-1 and HIV-2), by the Centers for Disease Control (CDC) (HIV-1, and hypothetical criteria for HIV-2 using the same criteria as for HIV-1), and by the criteria recommended by the manufacturers (DuPont and Pasteur). The use of WHO and CDC criteria gave similar results: approximately half of the 81 sera were classified as HIV-2 while the other half were classified as double reacuve (HIV-1 and HIV2). Interpretation using HIV-1 DuPont and HIV-2 Pasteur cri teria classified approximately one-third of the 81 sera as HIV-2, demonstrating a lower sensitivity. Based on the above observauons, the Group recommended a revision of the WHO criteria for interpretation of HIV-2 Western blots that were defined in February 1989. These revised criteria are as follows:
Wkly Eptdem Rec No 1 0 - 9 March 1990
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Relevé êpidém hebd N° 10 - 9 mars 1990
2 d e s -3 bandes ènv (précurseur'env,- glycoprotéines 2 of.3 env bands (env precursor, external-and - Positif: externe et îransmembranaire^ avec ou sans bande gag nansmembraneglycoproteins)with or Without et/ou pol. ■ - ' gag and/or pol bands. Négatif: absence de bandes spécifiques du VIH. Negative: no HIV-specific bands. Indeterminate: other profiles not considered positive or nega Indéterminé : profils ne pouvant être qualifiés de positifs ou de néga tifs. tive. Toutefois, ces recommandations sont fondées sur les caractéristiques These recommendations reflect the performance characteris tics of a single Western blot, however, and may require revision as de performance d’une seule trousse commerciale d’immunotransfert et similar evaluations are completed with other commercial West pourront éventuellement être révisées lorsque d’autres trousses auront été évaluées de la même façon. ern blots. The Group further recommended that : En outre, le groupe a formulé les recommandations suivantes: 1. Les trousses d'immunotransfen actuelles et futures devront contenir 1. Current and future commercially available Western blots should use well-standardized representative viral antigen pre des;préparations antigèniques virales représentatives et bien standar parations. disées. 2. WHO should assure provision of recommendations to manu 2. L’OMS devrait faire des recommandations aux fabricants en ce qui facturers of Western blots concerning the number and physical concerne le nombre et les caractéristiques physiques des antigènes du VIH-2. characteristics of HIV-2 viral antigens. 3. WHO should identify a reference standard serum for HIV-2 3. L’OMS devrait ^identifier un sérum étalon de référence pour le Western blots. dépistage du VIH-2 par immunotransfert. 4. WHO should support a similar study to reconsider criteria for 4. Etant donné l’importance des réactions croisées entre les glycopro téines d’enveloppe des 2 virus,TOMS devrait apporter son aide à une HIV-1 seropositivity and to define double (HIV-1 and HIV-2) étude similaire à celle-ci pour la révision des critères de séropositivité reactivity because of the extensive cross-reactivity to the envel ope glycoproteins of the 2 viruses. du VIH-Tel pour la définition des sérums doublement positifs (VIH1 et VIH-2). Positive; ;,î ' '}.