Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: un protocolo de verificación genérica para seleccionar los análisis serológicos del VIH adecuados y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida: kit de herramientas de verificación, noviembre 2021

KIT DE HERRAMIENTAS DE VERIFICACIÓN OPTIMIZACIÓN DE LOS ALGORITMOS DE PRUEBA DEL VIH - UN PROTOCOLO DE VERIFICACIÓN GENÉRICA PARA SELECCIONAR LOS ANÁLISIS SEROLOGICOS DE VIH ADECUADOS Y EVALUAR EL NIVEL DE REACTIVIDAD FALSA COMPARTIDA NOVIEMBRE 2021 SERVICIOS DE PRUEBAS DEL VIH KIT DE HERRAMIENTAS DE VERIFICACION OPTIMIZACIÓN DE LOS ALGORITMOS DE PRUEBA DEL VIH - UN PROTOCOLO DE VERIFICACIÓN GENÉRICA PARA SELECCIONAR LOS ANÁLISIS SEROLOGICOS DE VIH ADECUADOS Y EVALUAR EL NIVEL DE REACTIVIDAD FALSA COMPARTIDA NOVIEMBRE 2021 ii Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida Optimización de los algoritmos de prueba del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida © SE-COMISCA 2022 This translation was not created by the World Health Organization (WHO). WHO is not responsible for the content or accuracy of this translation. The original English edition VERIFICATION TOOLKIT OPTIMIZING HIV TESTING ALGORITHMS: A GENERIC VERIFICATION PROTOCOL FOR SELECTING APPROPRIATE HIV SEROLOGY ASSAYS AND ASSESSING THE LEVEL OF SHARED FALSE REACTIVITY NOVEMBER 2021. Geneva: World Health Organization; [2021]. Licence: CC BY- NC-SA 3.0 IGO; https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/igo Algunos derechos reservados. Este trabajo está disponible bajo la licencia Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike CC BY-NC-SA 3.0). https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/deed.es Foto de portada © UNITAID/Eric Gauss. CONTENIDO iii INVESTIGADORES E INSTITUCIONES COLABORADORAS V ACRÓNIMOS VI 1. ANTECEDENTES 1 2. JUSTIFICACIÓN DEL ESTUDIO 2 3. REVISIÓN DE LA LITERATURA 2 4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN 2 5. DISEÑO Y MÉTODOS DEL ESTUDIO 3 5.1 Diseño del estudio 3 5.2 Población del estudio 3 Criterios de inclusión 3 Criterios de exclusión 3 5.3 Centros de estudio 3 5.4 Tamaño de la muestra 3 5.5 Reclutamiento de participantes 4 5.6 Recolecta de la muestra 4 5.7 Etiquetado y transporte de las muestras 4 5.8 Selección de pruebas candidatas para el VIH 4 Preseleccionar productos candidatos para el VIH 5 Características de rendimiento y funcionamiento 5 5.9 Pruebas de laboratorio 6 Capacitación del personal del estudio 6 Procesamiento de muestras 6 Caracterización de las muestras 6 Análisis de pruebas/productos con el panel de verificación 7 Secuencia de las pruebas 8 Registro de los resultados de las pruebas 8 Variabilidad entre lectores 8 Resultados de PRD no válidos 9 Resultados de EIA indeterminados 9 Control de calidad 9 Evaluación de los usuarios sobre la facilidad de uso de los productos 9 Almacenamiento a largo plazo de la muestra 10 iv Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 6. RECOPILACIÓN Y GESTIÓN DE DATOS 11 7. ANÁLISIS DE DATOS 11 Reactividad falsa 11 8. Diseño de algoritmos de prueba 12 8.1 Probar nuevos algoritmos de prueba 12 9. Consideraciones éticas 13 9.1 Aprobación institucional y revisión ética 13 9.2 Beneficios y riesgos para los participantes 13 9.3 Consentimiento informado 13 9.4 Confidencialidad de la información 13 10. PLAN DE DISTRIBUCIÓN Y UTILIZACIÓN DE LOS RESULTADOS 14 11. BENEFICIO ESPERADO DE ESTE ESTUDIO 14 12. LIMITACIONES DEL ESTUDIO 14 13. FINANCIACIÓN Y PRESUPUESTO 14 14. PLAN DE TRABAJO DEL PROYECTO 14 REFERENCIAS 15 ANEXO. Formulario de Consentimiento Informado Escrito 17 El kit completo de la herramienta de verificación de la OMS está disponible en el siguiente enlace: https://www.who.int/tools/optimizing-hiv-testing-algorithms-toolkit v INVESTIGADORES E INSTITUCIONES COLABORADORAS Este estudio es un esfuerzo de colaboración entre los siguientes socios: 1. Agregar socio 1 2. Agregar socio 2 3. Agregar socio 3 Investigador principal (IP) Tareas Supervisión del estudio Diseño del estudio Interpretación de los datos Redacción de Manuscrito Revisión de manuscritos Aplicación ERB Co-investigadores Gestión del estudio Diseño del estudio Procedimientos de laboratorio Interpretación de los datos Revisión del manuscrito Diseño del estudio Interpretación de los datos Revisión del manuscrito Apoyo aplicación ERB Diseño del estudio Análisis estadístico Interpretación de los datos Revisión del manuscrito vi Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida ACRÓNIMOS ANC Atención prenatal ARV Antirretroviral CDC Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) CMIA Micropartículas inmunoprueba EDT Etilendiamina ácido tetraacético EIA Inmunoprueba enzimática ELFA Prueba fluorescente ligado a enzimas ERB Evaluación externa de la calidad EQA Junta de revisión ética FDA Food and Drug Administration FN falso negativo FP falso positivo HTS Servicios de pruebas del VIH IDU Instrucciones de uso ITS Infecciones de transmisión sexual IVD Diagnóstico in vitro (dispositivo médico) LFA Pruebas de flujo lateral LIA Inmunoprueba de la línea LNR Laboratorio nacional de referencia MDS Ministerio de Salud OD/CO Densidad/corte óptico OMS Organización Mundial de la Salud P1 Prueba 1 P2 Prueba 2 P3 Prueba 3 PCR Reacción en cadena de la polimerasa POC punto de cuidado POE Procedimiento operativo estándar PRD Pruebas rápidas de diagnóstico PT Pruebas Positivas PV Positivo Verdadero QC Control de calidad SIDA Síndrome de inmunodeficiencia adquirida TAR Terapia Antirretroviral TAT Tiempo de Respuesta TN Negativo Verdadero VIH Virus de inmunodeficiencia humana VPN Valor predictivo negativo VPP Valor predictivo positivo 1 1. ANTECEDENTES Proporcionar un diagnóstico preciso, oportuno y asequible del VIH en el punto de atención (POC) es un primer paso fundamental para ofrecer servicios de tratamiento y prevención del VIH. Para establecer el diagnóstico del VIH, la Organización Mundial de la Salud (OMS) recomienda estrategias de pruebas del VIH utilizando múltiples pruebas serológicas del VIH, incluyendo pruebas rápidas de diagnóstico (PRD) y enzimoinmunopruebas (EIA) (1,2). Cada prueba debe tener una sensibilidad ≥99% (la prueba es reactiva para al menos 99 de cada 100 muestras realmente VIH positivas) y una especificidad ≥98% (la prueba no es reactiva para al menos 98 de cada 100 muestras realmente VIH negativas); Estos son los umbrales mínimos para la aprobación mediante el procedimiento de precalificación de la OMS (3,4). Para garantizar un diagnóstico preciso en todos los entornos, la OMS ha recomendado previamente estrategias diferenciadas de pruebas del VIH de acuerdo con la prevalencia del VIH en la población que se está probando (2,4). En los países de prevalencia “alta” del VIH con una prevalencia superior al 5%, se recomendaron dos resultados consecutivos de la prueba reactiva al VIH para diagnosticar el VIH; cuando la prevalencia del VIH era inferior al 5%, se recomendaron tres resultados consecutivos de la prueba reactiva al VIH. Se estableció este umbral del 5% para garantizar que la combinación de pruebas utilizadas en una estrategia de análisis tenga al menos un 99% de valor predictivo positivo (VPP), es decir, al menos 99 de cada 100 personas clasificadas como VIH-positivas son realmente VIH-positivas, ó menos de 1 resultado falso positivo de la prueba por cada 100 personas VIH-positivas examinadas – cuando las pruebas alcanzan el requisito mínimo de especificidad del 98% (4). Al elegir una estrategia de pruebas, los programas de VIH han utilizado típicamente la prevalencia nacional de la población VIH (mayor o menor del 5%) como un sustituto para guiar la implementación de una estrategia de “dos pruebas” o “tres pruebas”. Sin embargo, como la conciencia del estado del VIH ha alcanzado altos niveles, la positividad entre las personas que se presentan a los servicios de pruebas del VIH (HTS) ha disminuido considerablemente en los últimos años. Incluso en los entornos de prevalencia del VIH más altos en el sur y el este de África, la positividad está por debajo del umbral del 5% y se espera que siga disminuyendo en el futuro, dada la alta cobertura de la terapia antirretroviral (TAR) y la baja incidencia estimada del VIH (5). Una revisión de políticas de 2018 encontró que sólo el 25% de las directrices nacionales de pruebas del VIH eran plenamente adherentes a las recomendaciones de la OMS sobre las estrategias de pruebas del VIH (6). A pesar de la disminución de la positividad para el VIH, pocos programas han pasado de utilizar dos resultados de pruebas VIH-reactivas a utilizar tres resultados de pruebas VIH-reactivas para mantener un VPP alto. En respuesta a la disminución de la positividad y a los desafíos que plantea la aplicación de recomendaciones diferenciadas en materia de directrices, la revisión de 2019 de las Directrices consolidadas de la OMS sobre servicios de pruebas del VIH recomendó una estrategia única «estándar» de pruebas del VIH para todos los entornos en los que se realizan pruebas del VIH. La estrategia de pruebas de la OMS para 2019 recomendaba resultados reactivos al VIH de tres pruebas serológicas consecutivos y simplificaba los pasos para resolver casos con resultados discrepantes en pruebas realizadas en serie. En la revisión del año 2019, la OMS también recomendó que la PRD doble VIH/sífilis se puede utilizar como la primera prueba para las mujeres embarazadas como parte de la atención prenatal (ANC) (7). Estas pruebas se pueden utilizar en la POC y son rentables en comparación con las pruebas estándar en ANC. Permiten a más mujeres ser diagnosticadas con VIH y sífilis para que puedan acceder al tratamiento y prevenir la transmisión a sus hijos. Los programas nacionales de VIH deberían considerar ahora cuándo y cómo aplicar nuevas recomendaciones para la transición de una estrategia de pruebas de “dos pruebas” a una estrategia de pruebas de “tres pruebas”, incluida la adopción de pruebas dobles de detección de VIH/sífilis en contextos de ANC. La OMS recomienda que se verifiquen los algoritmos de las pruebas del VIH antes de tomar decisiones sobre la adquisición de productos específicos y antes de su implantación generalizada. Cuando se eligen correctamente, las combinaciones de PRD o combinaciones de EIA y PRD pueden proporcionar resultados fiables y de bajo costo (8). 2 Optimización de las pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 2. JUSTIFICACIÓN DEL ESTUDIO Una estrategia de pruebas estandarizada y productos de calidad garantizada son fundamentales para un diagnóstico preciso, mientras que unos algoritmos de prueba mal elegidos pueden dar lugar a diagnósticos erróneos. La verificación de los algoritmos de prueba proporciona pruebas objetivas, antes de la implementación generalizada, de que una combinación específica de productos diagnosticará con precisión la infección por el VIH. Para ello, la verificación asegura que los productos seleccionados no tienen los mismos resultados de reacción falsa, lo que daría lugar a un diagnóstico erróneo. Cuando los productos son menos del 100% específicos, falsos resultados VIH- reactivos se esperan, pero cuando dos o más productos son falsos-reactivos en el mismo individuo (falsa reactividad común compartida) entonces el diagnóstico erróneo o el diagnóstico retardado puede ocurrir (9). Este estudio de verificación facilitará la actualización y la alineación de los algoritmos actuales de pruebas del VIH con las recomendaciones más recientes de la OMS, asegurando que los algoritmos de pruebas que minimizan el riesgo de diagnósticos erróneos se seleccionen antes de un uso más amplio. Además, este estudio apoya la selección de productos específicos que se adapten a las necesidades operacionales de un país determinado. 3. REVISIÓN DE LA LITERATURA Diagnóstico erróneo de la infección por VIH, incluyendo resultados compartidos de reactividad falsa entre diferentes PRD, no es raro (10–14). Tiene graves consecuencias, incluidos los costos de TAR de por vida para las personas VIH negativas (15,16), daños físicos, psicosociales y emocionales no cuantificados de recibir un diagnóstico erróneo positivo del VIH (17,18), y socavando la confianza en el sistema de salud. Por lo general, la reactividad falsa en las pruebas serológicas (independientemente del formato de la prueba) puede ocurrir debido a la presencia de sustancias en una muestra con el potencial de causar interferencia o reactividad cruzada, incluidos fármacos, conservantes de la muestra, sustancias endógenas, así como agentes infecciosos (19). La falsa reactividad común se produce cuando la misma muestra del paciente es falsa-reactiva en una o más pruebas. Cuando estas pruebas se utilizan en el mismo algoritmo de análisis, existe la posibilidad de un diagnóstico erróneo. Además de los factores anteriores, se puede utilizar la misma preparación de antígeno o una preparación similar, los mismos u otros componentes críticos similares, para producir productos con diferentes nombres de marca. Esto está ocurriendo con una frecuencia cada vez mayor debido a los acuerdos de cambio de marca o reetiquetado entre los fabricantes de productos y al hecho de que hay más proveedores de PRD acabados que de los preparados del antígeno del VIH. La información sobre la fuente y la composición del antígeno y otros componentes críticos es difícil de adquirir y, por lo general, el fabricante y sus proveedores mantienen la confidencialidad. Incluso niveles bajos de reactividad cruzada, o un rendimiento marginalmente inferior a la media de una prueba, podrían tener un impacto significativo en la precisión de un algoritmo de prueba (20–22). 4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN El objetivo general de este estudio de verificación local es: • Identificar combinaciones adecuadas de pruebas serológicas para el VIH (incluyendo pruebas que detectan el VIH y otras afecciones como la sífilis) para completar la estrategia de pruebas de la OMS para el diagnóstico de la infección por el VIH Los objetivos específicos de esta evaluación son: • enumerar las pruebas/productos candidatos adecuados en función de su rendimiento diagnóstico y sus características operativas • evaluar el nivel de falsa reactividad compartida entre pruebas/productos individuales; • construya algoritmos de pruebas/productos que compartan la menor o nula reactividad cruzada común 3 5. DISEÑO Y MÉTODOS DEL ESTUDIO 5.1 Diseño del estudio Se trata de un estudio de laboratorio transversal en el que se evalúa el nivel de falsa reactividad compartida de pruebas candidatos individuales para el VIH y pruebas rápidas dobles para el VIH/sífilis utilizando muestras clínicas obtenidas prospectivamente de individuos que asisten a HTS de rutina, incluido el ANC (la configuración de uso previsto); las muestras clínicas se caracterizarán por la ausencia de VIH mediante un algoritmo de pruebas serológicas. Las pruebas/productos que compartan el menor número de resultados de reacción falsa se seleccionarán para su uso dentro de una estrategia de análisis de tres pruebas; las pruebas más sensibles se utilizarán como prueba 1 (P1) y las pruebas más específicas como prueba 2 (P2) y prueba 3 (P3). En el sitio web de kit de herramientas de la OMS se puede encontrar una presentación en PowerPoint en la que se resume el estudio de verificación https://www.who.int/tools/optimizing-hiv-testing-algorithms-toolkit. 5.2 Población del estudio Se invitará a participar en el estudio a las personas que busquen HTS de rutina en centros de salud, incluidas las que se someten a pruebas del VIH como parte del ANC y que sean representativas de la población que se va a someter a las pruebas. Las muestras se recolectarán de personas que cumplan los siguientes criterios: Criterios de inclusión • edad ≥18 años; • Buscando HTS; • capaz de comprender el alcance del estudio y de proporcionar un consentimiento informado por escrito. Criterios de exclusión • Individuos con estatus VIH positivo conocido (auto-reportado); • Individuos en TAR (auto-declarado). 5.3 Centros de estudio A fin de recolectar muestras representativas de la población que realiza las pruebas, se reclutará prospectivamente a los participantes en al menos 3 a 5 centros clínicos; los centros pueden incluir centros de atención primaria, clínicas de salud, hospitales de distrito o clínicas prenatales. 5.4 Tamaño de la muestra No se realizó un cálculo formal del tamaño de la muestra para evaluar la falsa reactividad compartida. Este estudio no es un estudio de validación típico diseñado para detectar un tamaño de efecto específico, por ejemplo, la precisión diagnóstica; se trata de un estudio de verificación a pequeña escala que busca identificar pruebas/productos individuales de calidad garantizada que muestren el menor número de resultados de reacción falsa y que se puedan utilizar juntos en un algoritmo de prueba. Sin embargo, se consideró que un tamaño de muestra de 230 participantes/muestras era suficiente para detectar al menos el 2–8% de resultados falsos reactivos generados por productos individuales del VIH y determinar el nivel de falsa reactividad compartida entre ellos. En la Tabla 1 se resume el número total de participantes a ser reclutados, representando el 8% de los participantes con resultados reactivos o no concluyentes de las pruebas que deberán ser excluidos. Tabla 1. Número de participantes que se contratarán 4 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 5.5 Reclutamiento de participantes Los individuos que cumplan los criterios de elegibilidad recibirán una breve explicación del estudio por parte de un trabajador sanitario en su lengua materna. La información incluirá detalles de objetivos del estudio y resultados esperados. Si la persona acepta participar en el estudio, se le pedirá que firme el formulario de consentimiento informado por escrito (ver anexo). 5.6 Recolecta de muestras Los tipos de muestras que han sido validados por el fabricante se enumeran en las instrucciones de uso del producto. Aunque en el estudio de verificación podrían utilizarse diferentes tipos de muestras, para fines prácticos, en este estudio sólo se utilizarán muestras de suero o plasma, ya que se pueden recolectar y almacenar en volúmenes mayores y se pueden manipular con mayor facilidad. La enfermera o el trabajador sanitario calificado que recoge las muestras de sangre recibirá formación sobre el protocolo del estudio y el etiquetado y almacenamiento de las muestras. El trabajador sanitario realizará flebotomía con los participantes que hayan dado su consentimiento para recolectar muestras de sangre venosa en un tubo EDTA (púrpura) o en un tubo de suero (rojo). Cada tubo tendrá la capacidad de recolectar de 4ml a 6ml de sangre. 5.7 Etiquetado y transporte de muestras A todas las muestras se les asignará un código de estudio para la protección e integridad de los datos. Para proteger la confidencialidad del paciente, la información que vincula el número de identificación del paciente con su identidad se eliminará o descartará en el lugar de recolecta de muestras. A discreción del equipo del estudio, las muestras de sangre venosa pueden transportarse en un plazo de seis horas desde la recolecta, ya sea al laboratorio más cercano o directamente al laboratorio designado donde se realizarán las pruebas de verificación. A su llegada al laboratorio, las muestras de sangre venosa se centrifugan inmediatamente a 3.000g durante 10 minutos. El plasma o el suero se transferirán y se alicuotarán en tubos de polipropileno estériles y se almacenarán a -20°C hasta que se transporten en cadena de frío al laboratorio designado. 5.8 Selección de candidatos para pruebas del VIH Sólo se seleccionarán productos de calidad garantizada para el estudio de verificación, es decir, productos que han sido sometidos a una estricta evaluación reglamentaria por un miembro fundador del Grupo de Trabajo de Armonización Mundial, por ejemplo, Australia, Canadá, Europa, Japón y los Estados Unidos, o enumerados por la OMS a través de su proceso de precalificación (23). Este último ha sido diseñado para adaptarse a las necesidades. De los ajustes limitados en recursos y las características de rendimiento y funcionamiento de los productos Sitio Participantes Clínica 1 50 Clínica 2 50 Clínica 3 50 Clínica 4 50 Clínica 5 50 Total 250 precalificados de la OMS están bien documentadas (24). Las pruebas/productos de calidad garantizada que han sido evaluados o aprobados por la agencia reguladora nacional como parte del proceso de registro y que están disponibles fácilmente en el país pueden ser priorizados para acelerar el proceso de adquisición. Tabla 2. Número mínimo de productos del VIH a ser preseleccionados Tabla 3. Características de rendimiento y funcionamiento para la selección de productos 5. Diseño y métodos del estudio 5 Preseleccionar productos candidatos para el VIH Aunque la OMS recomienda el uso de combinaciones de PRD y EIA como parte de la estrategia de pruebas, desaconseja el uso de algoritmos basados únicamente en EIA, ya que es menos probable que logren un VPP >99% y, por consiguiente, aumenta el riesgo de obtener resultados falsos positivos (25). Se sugiere que se pre-seleccione un total de ocho a doce productos en función de las características de rendimiento y funcionamiento. La Tabla 2 muestra el número mínimo de pruebas/productos que se deben seleccionar para los algoritmos candidatos para prueba; es importante seleccionar productos de diferentes marcas y fabricantes para reducir la posibilidad de reactividad falsa compartida. También es importante que se seleccionen productos adicionales para que sirvan como algoritmos alternativos en el evento de escasez o interrupción del producto. En el sitio web de herramientas de la OMS hay disponible una lista de comprobación para facilitar el proceso de pedido de suministros y reactivos de laboratorio https://www.who.int/tools/optimizing-hiv-testing-algorithms-toolkit. Características de rendimiento y funcionamiento Las características de rendimiento y funcionamiento para la selección de los productos candidatos se resumen en el cuadro 3. Una herramienta basada en MS Excel que contiene las especificaciones técnicas de los productos precalificados de la OMS se puede utilizar para facilitar el proceso de selección, que se puede encontrar en el sitio web del conjunto de herramientas de la OMS. Rendimiento del diagnóstico Especificaciones de funcionamiento Sensibilidad clínica (%) Tipos de muestras Especificidad clínica (%) Volumen de muestra para sangre capilar Detección de subtipos Número de pasos para realizar la prueba Variabilidad entre lectores (%) Tiempo de lectura en minutos Tasa no válida (%) Temperatura de almacenamiento Vida útil en el momento de la fabricación Control de calidad interno para la adición y el volumen de muestras humanas CC externo proporcionado (positivo/negativo) Suministros proporcionados para la extracción de sangre capilar Precio por prueba Número de pruebas/productos Orden de la prueba en el algoritmo Características de rendimiento 4 P1 Debe tener una sensibilidad superior, al menos 99%. Los productos P1 podrían intercambiarse entre sí, pero no con P2 o P3. 4 P2 Debe tener una especificidad superior, al menos el 98%. Los productos podrían intercambiarse entre sí, pero no con P1. P3 6 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 5.9 Pruebas de laboratorio La verificación de los algoritmos de prueba requiere coordinación para minimizar los problemas de integridad de las muestras y garantizar la experiencia en la recopilación y el análisis de datos. Dado el número de productos a analizar (8–12 productos), el uso de suero o plasma en lugar de sangre completa capilar (punción digital), y el número de repeticiones requerido (dos lotes por producto), las pruebas de verificación deben realizarse en un laboratorio de pruebas designado a fin de minimizar la variabilidad de los resultados de las pruebas debido a la variación entre laboratorios. Capacitación del personal del estudio Todos los operadores de pruebas recibirán formación sobre los POEs del estudio, incluidos cómo manipular las muestras, cómo realizar cada prueba y cómo leer y registrar los resultados de las pruebas. La capacitación se documentará en registros de capacitación. Antes de participar en el estudio, todos los operadores de pruebas deben ser capaces de demostrar su competencia en las pruebas. Procesamiento de muestras A su llegada al laboratorio de análisis designado, las muestras de sangre venosa se centrifugan inmediatamente a 3.000g durante 10 minutos. El plasma o el suero se transferirán y se alicuotarán en tubos de polipropileno estériles y se almacenarán a -20°C hasta las pruebas de verificación. No deben permitirse más de 3 ciclos de congelación- descongelación por cada alícuota. Caracterización de muestras Se propone que el algoritmo de pruebas serológicas utilizado para caracterizar las muestras conste de una PRD (PRD 1) y una EIA (EIA 1) (Fig 1). A fin de minimizar el sesgo de verificación, la PRD utilizada para la caracterización no debe formar parte de los productos candidatos para el VIH que se van a evaluar. Si se va a evaluar con el panel de verificación un producto candidato para VIH de cuarta generación, se debe incluir al menos un EIA de cuarta generación como parte del algoritmo de caracterización. Se analizará un total de 250 muestras de suero/plasma en paralelo utilizando el algoritmo de caracterización. Dependiendo de la tasa de positividad al VIH en la población que realiza la prueba y de la tasa discordante, se excluirá un cierto número de muestras del panel de verificación. Por ejemplo, suponiendo una tasa de positividad al VIH del 5% de resultados reactivos dobles (PRD+/EIA +) en la población que realiza la prueba y una tasa discordante del 3%, se excluirán 20 muestras (8%) y el panel de verificación constará de 230 muestras VIH negativas (Fig 1). Tabla 4. Número total de pruebas de VIH necesarias para verificar 10 productos 5. Diseño y métodos del estudio 7 Figura 1. Algoritmo de pruebas de caracterización para descartar el VIH Análisis de pruebas/productos con el panel de verificación Las pruebas/productos preseleccionados con dos lotes de producción independientes se someterán a análisis con el panel de muestras clínicas VIH negativas (n=~230). Se tendrá en cuenta la repetición del 1% de las pruebas en caso de que los resultados no sean válidos y reactivos. Por lo tanto, se requerirá un tamaño de muestra total de 465 pruebas por producto de verificación. En el cuadro 4 se resume el número total de pruebas necesarias para la verificación. Las pruebas se realizarán de acuerdo con las IFU de los fabricantes. Todos los resultados de la prueba serán leídos independientemente por dos lectores para evaluar la variabilidad entre lectores. Si un lector observa una banda de prueba débil, no debe resaltarla al segundo lector. Pruebas de VIH No de lotes No de muestras Pruebas totales repetir el análisis al 1% Total de pruebas necesarias Producto 1 2 230 460 5 465 Producto 2 2 230 460 5 465 Producto 3 2 230 460 5 465 Producto 4 2 230 460 5 465 Producto 5 2 230 460 5 465 Producto 6 2 230 460 5 465 Producto 7 2 230 460 5 465 Producto 8 2 230 460 5 465 Producto 9 2 230 460 5 465 Producto 10 2 230 460 5 465 Ejecute PRD 1 y EIA 1 en paralelo (n = 250) PRD reactiva; EIA reactiva (5% de positividad) PRD reactiva; EIA no reactiva PRD no reactiva; EIA reactiva (tasa discordante del 3%) PRD no reactiva; EIA no reactiva Las muestras con resultados reactivos y discordantes se excluyen del panel Panel de verificación (n=230) VIH negativo Total 20 230 4.600 50 4.650 Tabla 5. Sistema de clasificación de intensidad 8 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida Secuencia de pruebas Ambos lotes de cada producto deben probarse en el mismo panel de verificación (n=~230). A los efectos de evaluar los PRD, se entenderá por «prueba» una serie consecutiva de PRD del mismo lote de producción realizada durante la misma «sesión». Una “sesión de prueba” podría considerarse una mañana o una tarde. Registro de los resultados de las pruebas Todos los resultados de las pruebas se registrarán en hojas de trabajo estandarizadas y luego se introducirán en una hoja de cálculo de MS Excel para el análisis de los datos adicionales. Para pruebas de lectura subjetiva, como las PRD, la intensidad de banda/línea/punto (Tabla 5) se introduce adicionalmente en la hoja de recopilación de datos. El estado general de la prueba en evaluación de cada muestra tendrá en cuenta tanto los resultados del lote A como los del lote B. El resultado, que es la mayoría, se considerará el resultado final; por ejemplo, si no es reactivo tanto en el lote A como en el lote B, el resultado es VIH negativo. Si es reactivo tanto en el lote A como en el lote B, el resultado es reactivo al VIH. Si los resultados entre el lote A y el lote B son discrepantes, el resultado se considera reactivo al VIH. Variabilidad entre lectores Después de que el primer lector haya leído y registrado el resultado de cualquier prueba de lectura visual, un segundo lector debe realizar una nueva lectura con enmascaramiento. Además, deberá registrarse la intensidad de la línea/banda de prueba para poder cuantificar la variabilidad debida a líneas de prueba débiles. Si los dos lectores interpretan los resultados de la prueba de la misma manera, el estado de la muestra se registra tal cual. Si los dos lectores no están de acuerdo, un tercer lector debe adjudicar. El resultado que tiene la mayoría – es decir, dos de los tres lectores – debe ser seleccionado. Si no se puede alcanzar un resultado concluyente, se registrará que no es concluyente y la muestra se volverá a analizar con un nuevo dispositivo de prueba del mismo lote. Índice de puntuación Escala de lectura de intensidad – Negativo +w Muy poco reactivo (límite) + Reactividad con intensidad débil ++ Reactivo con intensidad moderada +++ Reactivo con intensidad fuerte 5. Diseño y métodos del estudio 9 Resultados de PRD no válidos El número de resultados no válidos de la prueba se registrará como porcentaje del número total de pruebas utilizadas para la prueba de evaluación con muestras clínicas. Los resultados no válidos pueden ser los definidos en las Instrucciones de uso, como los que no aparecen la línea/banda/punto de control o no son válidos debido a un dispositivo de prueba obviamente defectuoso o a un dispositivo de transferencia de muestras defectuoso. Resultados de EIA indeterminados En el caso de los resultados de EIA que muestren una relación densidad óptica/corte (DO/CO) que se encuentre dentro de la zona gris de acuerdo con las Instrucciones de uso del fabricante (normalmente 0,90–1,10), las muestras se repetirán por duplicado en el mismo lote. El resultado es que la mayoría será considerada el resultado final. Se registrará la proporción de resultados indeterminados iniciales. Control de calidad Si están disponibles, para las PRD, los controles positivos y negativos del kit de prueba suministrados por el fabricante se ejecutarán como se indica en las Instrucciones de uso al comienzo de cada sesión de prueba. Si el fabricante no suministra controles positivos y negativos del kit de prueba, como será el caso de muchas pruebas de diagnóstico de anomalías, la muestra de control de calidad externa actuará como muestra de control. Evaluación de los usuarios sobre la facilidad de uso de los productos Una vez finalizadas las pruebas de verificación, se indicará a los operadores de la prueba que rellenen un formulario estandarizado (Tabla 6) para evaluar la facilidad de uso de cada prueba evaluada (PRD). Tabla 6. Facilidad de uso (de los PRD) 10 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida Almacenamiento de muestras a largo plazo Esto puede ser considerado a discreción del equipo del estudio. Se propone que, una vez finalizadas las pruebas de verificación, las muestras restantes se almacenen a -20°C durante un período de hasta cinco años. Las muestras almacenadas pueden utilizarse para futuros estudios de verificación del VIH. Cualquier estudio futuro de verificación del VIH que utilice muestras almacenadas se realizará únicamente después de obtener el consentimiento de los participantes y obtener la aprobación ética. Pruebas de VIH No aplicable Totalmente en desacuerdo En desacuerdo De acuerdo Totalmente de acuerdo 1 Instrucciones de uso 1.1 Las instrucciones de uso son claras 1.2 Las imágenes y los diagramas son claros 1.3 Las Instrucciones de uso contienen toda la información importante 1.4 Las instrucciones de seguridad son claras 2 Embalaje y etiquetado del kit 2.1 El etiquetado del kit es claro 2.2 El material de embalaje del kit es de buena calidad 2.3 Todos los tampones se suministraron en cantidades suficientes 2.4 Los controles del kit se proporcionaron en cantidades suficientes 3 Uso de dispositivos y procedimiento de prueba 3.1 La lanceta es segura y fácil de usar 3.2 El dispositivo de recolecta es fácil de usar 3.3 El procedimiento de prueba es fácil de realizar 4 Lectura e interpretación 4.1 La(s) línea(s) de prueba es(son) siempre clara(s) y fácil(es) de leer 4.2 La línea de control es siempre visible y fácil de leer 4.3 La interpretación de la prueba es clara y sencilla 5 Evaluación general 5.1 En general, la prueba es fácil de usar 5.2 La prueba se puede utilizar en un laboratorio con instalaciones limitadas 5.3 La prueba se puede utilizar en entornos que no sean de laboratorio Comentarios generales sobre la facilidad de uso: Tabla 7. Matriz indicativa para identificar pruebas de VIH que comparten reactividad falsa 11 6. RECOPILACIÓN Y GESTIÓN DE DATOS Los resultados de las pruebas individuales del VIH se registrarán in situ utilizando hojas de recopilación de datos en papel. Cualquier observación relacionada con el procedimiento de prueba u otras características operativas que no parezcan cumplir las afirmaciones del fabricante en las Instrucciones de uso debe documentarse y notificarse de acuerdo con la orientación de la OMS sobre la vigilancia post-comercialización de los IVDs (26). Los datos se introducirán en una hoja de cálculo de MS Excel. La exactitud de los datos se asegurará mediante una doble verificación de todas las entradas de datos por parte de un empleado de datos o uno de los co-investigadores. Toda la información y los datos se almacenarán en una base de datos protegida por contraseña con acceso restringido al personal autorizado. Se puede encontrar una base de datos de plantillas en el sitio web del conjunto de herramientas de la OMS. 7. ANÁLISIS DE DATOS Se utilizarán estadísticas descriptivas para resumir los resultados del estudio de verificación mediante una hoja de cálculo de MS Excel. Se calcularán intervalos de confianza del 95% para cualquier proporción dada. Se calculará la velocidad de los resultados no válidos de la prueba, la variabilidad entre lectores y los resultados indeterminados de cada prueba. Reactividad falsa Cualquier resultado reactivo de los productos del VIH que se hayan examinado con el panel de verificación se considera falso-reactivo independientemente de la intensidad de la banda/línea/punto. Se proporciona una matriz indicativa para tabular los resultados de reacción falsa por prueba (tabla 7). También se calculará la proporción de resultados de reacción falsa según la intensidad de la banda/línea/punto para identificar si los resultados de reacción falsa son más comunes con resultados de banda de intensidad débil, moderada o fuerte utilizando el sistema de clasificación de intensidad descrito en la Tabla 5. El estado general de la prueba en evaluación de cada muestra tendrá en cuenta tanto los resultados del lote A como los del lote B. El resultado, que es la mayoría, se considerará el resultado final; por ejemplo, si no es reactivo tanto en el lote A como en el lote B, el resultado es VIH negativo. Si es reactivo tanto en el lote A como en el lote B, el resultado es reactivo al VIH. Si los resultados entre el lote A y el lote B son discrepantes, el resultado final se considera reactivo al VIH. Prueba en evaluación Falso reactivo total P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 Total Tabla 8. Algoritmos de pruebas del VIH seleccionados finales *Algoritmos alternativos de prueba en caso de ruptura de existencias para una prueba específica **La PRD de sífilis simple alternativa puede considerarse en ausencia de una segunda PRD doble de VIH/sífilis 12 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 8. DISEÑO DE ALGORITMOS DE PRUEBA Utilizando los resultados del panel de verificación, se seleccionarán los productos candidatos que no muestren reactividad falsa común. Puede que no sea posible elegir una combinación de productos que no tenga resultados falsos reactivos compartidos; en ese caso, se seleccionará la combinación de productos que tenga el menor número de resultados falsos reactivos comunes. Es importante seleccionar productos de diferentes marcas y fabricantes con el fin de reducir la posibilidad de una falsa reactividad compartida. También es importante que se seleccionen productos adicionales para que sirvan como pruebas alternativas en caso de escasez o interrupción del producto. Los resultados de la falsa reactividad compartida junto con las características operativas y la facilidad de uso se utilizarán para seleccionar las pruebas adecuadas para rellenar los diferentes algoritmos de prueba del VIH. La Tabla 8 resume el número de algoritmos de prueba del VIH a considerar. 8.1 Probar nuevos algoritmos de prueba Para evaluar la viabilidad y aceptabilidad de los algoritmos de pruebas del VIH recientemente verificados e identificar cualquier problema operacional antes de la aplicación y ampliación a escala nacional, se sugiere que los nuevos algoritmos de prueba se prueben durante un corto período de tiempo en sitios seleccionados. La metodología propuesta para llevar a cabo este proyecto piloto puede descargarse del sitio web del conjunto de herramientas de la OMS. El proyecto piloto ofrecerá la oportunidad de actualizar bitácoras y registros clínicos, así como de optimizar las herramientas de capacitación y los procedimientos de garantía de calidad. Es fundamental que se actualicen las directrices y las políticas nacionales de pruebas del VIH, que los productos seleccionados para incluir en la estrategia de pruebas del VIH sean registrados por el organismo regulador nacional y que el proceso de licitación y adquisición de nuevos productos esté bien coordinado para garantizar una transición rápida y fluida. Algoritmo Prueb 1 Prueba 2 Prueba 3 Población de pruebas prevista 1 Población general 2 Población general (alternativa para P1)* 3 Población general (alternativa para P2 o P3)* 4 Ajustes de ANC (doble VIH/sífilis para P1) 5 Ajustes de ANC (alternancia dual de VIH/sífilis para P1)** 9. CONSIDERACIONES ÉTICAS 9.1 Aprobación institucional y revisión ética El protocolo del estudio se someterá a la aprobación institucional, que puede incluir autorización ética, al comité ético nacional de investigación en salud y/o a la junta de revisión institucional local. También se solicitarán cartas de autorización de los centros de salud para participar en el estudio, cuando proceda. 13 9.2 Beneficios y riesgos para los participantes • El estudio propuesto recolectará muestras de sangre completa venosa de pacientes que buscan HTS de rutina. Dependiendo del entorno de la prueba, el tipo de muestra de rutina utilizado para la detección del VIH puede ser sangre completa venosa o capilar. Para este estudio se extraerán muestras adicionales, en concreto 1 tubo de EDTA o 1 tubo de sangre completa venosa sérica, con fines de investigación. Esto causará algunas molestias adicionales a los participantes, pero no existen otros riesgos previstos para los pacientes que participan en el estudio. • Las molestias serán relativamente menores y los pacientes que no estén dispuestos a proporcionar muestras adicionales para el estudio no se incluirán en el estudio. • El tratamiento clínico no se verá perjudicado de ninguna manera si un paciente decide no participar en el estudio. Los pacientes que elijan participar no se verán favorecidos de ninguna manera por su decisión de participar. Los pacientes a los que se les esté analizando la muestra del VIH tendrán un diagnóstico (negativo o positivo), incluso si no están de acuerdo en proporcionar muestras adicionales de sangre completa venosa para la investigación. • No habrá beneficios directos para los pacientes que participen en el estudio. Los pacientes tendrán acceso a los servicios de pruebas del VIH de acuerdo con los criterios actualmente en vigor, ya sea que participen en el estudio o no. Los resultados de las pruebas adicionales de VIH no se utilizarán para el tratamiento clínico. • Queda a discreción del país y del equipo del estudio decidir si los resultados de las pruebas de sífilis derivadas del uso de las pruebas rápidas dobles de VIH/sífilis serán reportadas a los pacientes. En este caso, la clave para vincular el número de la muestra con la identidad del paciente y la información de contacto debe conservarse hasta que los resultados de las pruebas rápidas de VIH/sífilis estén disponibles, y debe obtenerse el consentimiento de los participantes para que se les contacte para obtener los resultados de sus pruebas de sífilis. 9.3 Consentimiento informado Se obtendrá el consentimiento informado por escrito para la obtención de muestras de sangre completa venosa extra de los pacientes para el estudio de verificación utilizando un documento de consentimiento estándar para describir el estudio. Los pacientes que se nieguen a dar su consentimiento por escrito no serán incluidos en el estudio. 9.4 Confidencialidad de la información A los pacientes que acepten participar en la evaluación se les asignará un número de estudio único; este número de estudio exclusivo se utilizará en lugar de su nombre para garantizar aún más la confidencialidad. Los resultados del estudio de verificación se utilizarán únicamente para responder a las preguntas del estudio. Sólo el personal del estudio sabrá quién participó en la evaluación, y los nombres de los participantes, así como los resultados de sus pruebas, se mantendrán anónimos. A discreción del equipo del estudio, y si se obtiene el consentimiento para el almacenamiento, las muestras restantes anónimas podrán analizarse en futuros estudios de laboratorio para verificar que los productos son altamente específicos en los 5 años posteriores a la recolecta de muestras y sólo tras obtener la aprobación ética. 10. PLANIFICAR LA DISTRIBUCIÓN Y EL USO DE LOS RESULTADOS Los resultados de las pruebas individuales de VIH utilizados durante la evaluación no se comunicarán a los pacientes ni a los médicos. Los resultados de este estudio se presentarán en un informe que se compartirá con el grupo de trabajo técnico nacional sobre el VIH/SIDA y otros interesados directos para la formulación de nuevas directrices sobre pruebas del VIH. Como este estudio generará nuevos conocimientos de valor generalizable, no limitado al país donde se realiza el estudio, a discreción del equipo del estudio, los resultados pueden ser presentados para su publicación en una revista científica revisada por pares para una mayor difusión. 14 Optimización de los algoritmos de pruebas del VIH: Un protocolo de verificación genérico para seleccionar las pruebas serológicas del VIH apropiadas y evaluar el nivel de reactividad falsa compartida 11. BENEFICIO ESPERADO DE ESTE ESTUDIO El objetivo de este estudio es seleccionar pruebas/productos individuales del VIH que funcionen mejor juntos como parte de un algoritmo de pruebas del VIH para el diagnóstico del VIH de acuerdo con las directrices consolidadas de la OMS para las pruebas del VIH de 2019. El uso de las estrategias de pruebas del VIH recomendadas por la OMS evitará diagnósticos erróneos y la iniciación innecesaria de un tratamiento de por vida, lo que beneficiará a la población en su conjunto. Los resultados de este estudio servirán de base a la revisión de las directrices nacionales sobre pruebas del VIH para la adopción y ampliación de las nuevas estrategias y algoritmos recomendados por la OMS para las pruebas del VIH. 12. LIMITACIONES DEL ESTUDIO Este estudio tiene algunas limitaciones. En primer lugar, debido al gran número de productos a verificar, el volumen de cada espécimen requerido será grande (hasta 250 µl). Por lo tanto, no se evaluarán las muestras de sangre completa capilar, ya que esto puede requerir un elevado número de pinchazos en los dedos por paciente, lo que puede afectar negativamente a la aceptabilidad del estudio por parte de los pacientes. En segundo lugar, el objetivo del estudio es identificar pruebas con altas especificidades y que no comparten reactividad falsa con otras pruebas. Por lo tanto, este estudio no está diseñado para comprender los factores que conducen a resultados falsos reactivos y las posibles causas entre los diferentes grupos de población. Por lo tanto, se recopilarán datos sociodemográficos limitados de los participantes. 13. FINANCIACIÓN Y PRESUPUESTO Este estudio será financiado por el Ministerio de Salud con la ayuda financiera de los siguientes interesados: (donante 1, donante 2, donante 3). Siempre que sea posible, los recursos humanos y el personal existentes deben ser aprovechados para la implementación de este estudio de verificación; por lo tanto, el genérico El presupuesto propuesto (ver el sitio web de herramientas de la OMS) no incluye los costos asociados con el personal y esto debe ajustarse según el contexto. El presupuesto también variará según el número y el tipo de productos del VIH seleccionados, el número de clínicas que participan en el estudio y el costo asociado con la adquisición, y debería adaptarse en consecuencia. 14. PLAN DE TRABAJO DEL PROYECTO Será necesario modificar un diagrama de Gantt para ajustar las diferentes actividades y plazos a las circunstancias locales, que se puede descargar del sitio web del conjunto de herramientas de la OMS. Es necesario prestar especial atención a la adquisición de materiales y reactivos, ya que esto puede variar según el país y, por lo general, es la actividad de proyecto más larga y, por lo tanto, debe darse prioridad. 15 REFERENCIAS 1. Programa mundial sobre el SIDA. Recomendaciones para la selección y uso de pruebas de anticuerpos contra el VIH. Wkly Epidemiol Rec Relev Epidemiol Hebd World Heal Organ. 1992;67: 145–149. Disponible en: https://apps.who.int/iris/handle/10665/228362 2. ONUSIDA-OMS. Recomendaciones revisadas para la selección y el uso de pruebas de anticuerpos del VIH. Wkly Epidemiol Rec. 1997;72: 81–7. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/9238418 3. Selección y compra de diagnósticos in vitro para VIH, HBsAg y VHC. Ginebra: Organización Mundial de la Salud; 2021. Disponible en: https://www.who.int/diagnostics_laboratory/ procurement/purchase/es/, consultado el 8 de noviembre de 2021. 4. Directrices consolidadas sobre servicios de pruebas del VIH. Ginebra: Organización Mundial de la Salud; 2015. Disponible en: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/179870/1/ 9789241508926_eng.pdf 5. Giguère K, Eaton JW, Marsh K, Johnson LF, Johnson CC, Ehui E, et al Tendencias en el conocimiento del estado del VIH y la eficiencia de los servicios de pruebas del VIH en el África subsahariana, 2000–20: Estudio de modelos utilizando datos de encuestas y programas de pruebas del VIH. LANCET HIV.2021;8(5):E284-E293. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1016/S2352-3018(20)30315-5 6. Fonner VA, Sands A, Figueroa C, Baggaley R, Quinn C, Jamil MS, et al Adhesión de los países a las recomendaciones de la OMS para mejorar la calidad del diagnóstico del VIH: Revisión de la política mundial. BMJ sane glob. 2020;5:e001939. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1136/bmjgh-2019-001939. 7. Las pruebas de diagnóstico rápido dual de VIH/sífilis pueden ser utilizadas como la primera prueba en la atención prenatal. Ginebra: Organización Mundial de la Salud; 2019. Disponible en: https://www.who.int/publications/i/item/ oms-cds-vih-19,38 8. Recomendaciones revisadas para la selección y el uso de pruebas de anticuerpos del VIH. Ginebra: Organización Mundial de la Salud; 1997. Disponible en: https://www.who.int/diagnostics_laboratory/ publications/es/Selection_HIV_tests.pdf 9. Klarkowski D, O’Brien DP, Shanks L, Singh KP. Causas de resultados falsos positivos de las pruebas rápidas de diagnóstico del VIH. Expert Rev Anti Infect ther. 2014; 12:49–62. Disponible en: https://doi.org/10.15 86/14787210.2014.866516. 10. Johnson CC, Fonner V, Sands A, Ford N, Obermeyer CM, Tsui S, Wong V, Baggaley R. Err es humano, corregir es salud pública: Una revisión sistemática que examina la mala calidad de las pruebas y el diagnóstico erróneo del estado del VIH. J Int AIDS Soc. 2017 ;20(S6):21755. Disponible en: https:// onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.7448/IAS.20.7.21755 11. Al-Kindi H, Al-Jardani A. Serología del VIH POSITIVIDAD FALSA ENTRE EXPANDIENTES DE ÁFRICA: Un DILLIMA DE LA SELECCIÓN. J Microbiol medio. 2020;69(6):812-816. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1099/jmm.0.001186 12. Kim S, Lee JH, Choi JY, Kim JM, Kim HS. Tasa de falsos positivos de una prueba combinado de antígeno/anticuerpo del VIH de “cuarta generación” en un área de baja prevalencia del VIH. Vacuna contra CLIN Inmunol. 2010;17(10):1642-1644. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1128/CVI.00258-10 13. Reid J, Van Zyl G, Linström M, Korsman S, Marais G, Preiser W. Los resultados de serología de VIH positivos altos todavía pueden ser falsos positivos. IDCase. 2020;21:e00849. Disponible en: https://doi.org/ doi:10,1016/j.idcr.2020.e00849 14. Smotrys M, Magge T, Alkhuja S, Gandotra SD. Babesiosis como causa de serología falsa positiva del VIH. Rep. Caso BMJ 2018; 2018:bcr2017223738. Disponible en: https://doi.org/ doi:10,1136/bcr-2017-223738 16 Referencias7 15. Eaton JW, Johnson CC, Gregson S. El costo de no repetir la prueba: Diagnóstico erróneo del virus de la inmunodeficiencia humana en la era de la “prueba y oferta” de la terapia antirretroviral. Clin Infect Dis. 2017;65. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1093/cid/cix341 16. Lasry A, Kalou MB, relaciones públicas jóvenes, Rurangirwa J, Parekh B, Behel S. Implicaciones en los costos de las pruebas de detección del VIH para la verificación en África. PLoS Uno. 2019;14(7):e0218936. Disponible en: https://doi. org/doi:10,1371/journal.pone.0218936 17. Bhattacharya R, Barton S, Catalan J. Cuando las buenas noticias son malas noticias: Impacto psicológico de un diagnóstico falso positivo del VIH. Cuidado del SIDA. 2008;20:560-564. Disponible en: https://doi.org/ doi:10.1080/09540120701867206 18. Johnson CC, Dalal S, Baggaley R, Taegtmeyer M. Un enfoque de salud pública para abordar y prevenir diagnósticos erróneos en la ampliación de los programas de pruebas rápidas del VIH. J Int AIDS Soc. 2017;20(S6):22190. Disponible en: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10. 7448/IAS.20.7.22290 19. Instrucciones para la compilación de un dossier de producto – PRECALIFICACIÓN OMS de diagnósticos in vitro. Organización Mundial de la Salud: Ginebra. Disponible en: https://extranet.who.int/ pqweb/sites/default/files/documents/200324_Draft_Instruction_for_compilation_of_a_ product_dossier_pqdx_018_v4_toc_0.pdf, consultado el 8 de noviembre de 2021. 20. Sands A, Urassa W, Prat I, Fransen K. Falsa reactividad serológica - implicaciones para los algoritmos de pruebas del VIH. Conferencia de la Sociedad Africana de Medicina de Laboratorio. Abuja, Nigeria; 10-14 de diciembre de 2018. Disponible en: https://www.who.int/hiv/pub/posters/Serological-false- reactivity.pdf, consultado el 8 de noviembre de 2021. 21. Kosack SC, Shanks L, Beelaert G, Benson T, Savane A, Ng’ang’a A, Bita A, Zahinda JBN, Fransen K, Page AL. Diseñar algoritmos de pruebas del VIH basados en las directrices de la OMS de 2015 utilizando datos de seis sitios del África subsahariana. J Microbiol de Clin. 2017 Oct;55(10):3006-3015. Disponible en: https://doi.org/doi:10.1128/JCM.00962-17 22. Kosack CS, Página A-L, Beelaert G, Benson T, Savane A, Ng’ang’a A, Andre B, Zahinda J-PB, Shanks L, Fransen K. 2017. Hacia una prueba más precisa del VIH en África subsahariana: Una evaluación multisitio de las pruebas de VIH y los factores de riesgo de falsos positivos. J Int AIDS SOC 19:1–12. Disponible en: https://doi.org/10.7448/IAS.20.1.21345. 23. Precalificación de la OMS de diagnósticos in vitro. Organización Mundial de la Salud: Ginebra. Disponible en: https://extranet.who.int/pqweb/vitro-diagnostics/what-we-do, consultado el 8 de noviembre de 2021. 24. Informes públicos de precalificación de la OMS para IVDs. Organización Mundial de la Salud: Ginebra. Disponible en: https://extranet.who.int/pqweb/vitro-diagnostics/prequalification-reports/whopr, consultado el 8 de noviembre de 2021. 25. Augusto ÂDR, Iriemenam NC, Kohatsu L, de Sousa L, Maueia C, Hara C, et al Alto nivel de falsos positivos de VIH utilizando un algoritmo basado en EIA en la encuesta: Importancia de las pruebas confirmatorias. PLoS Uno. 2020;15(10):e0239782. Disponible en: https://doi.org/10.1371/journal. 0239782 26. Orientación para la vigilancia posterior al mercado y la vigilancia del mercado de productos sanitarios, incluido el diagnóstico in vitro. Organización Mundial de la Salud: Ginebra; 2020. Disponible en: https://apps. who.int/iris/handle/10665/337551 17 ANEXO Anexo. Formulario de consentimiento informado por escrito El Ministerio de Salud y sus asociados están realizando un estudio sobre nuevas pruebas del VIH para diagnosticar la infección por el VIH. Las pruebas del VIH detectan anticuerpos contra el VIH en la sangre de una persona. Para el diagnóstico final del VIH, es necesario utilizar varias pruebas (de dos (2) a tres (3)) continúas dependiendo del resultado. Una sola prueba del VIH no es suficiente para hacer un diagnóstico. Actualmente en este país, si una persona está infectada con el VIH, dos pruebas son suficientes para hacer el diagnóstico. Estamos tratando de averiguar si los resultados de las nuevas pruebas de VIH utilizadas en combinación, hasta tres pruebas, realizadas en sangre de una vena del brazo, funcionan bien juntos y no producen resultados falsos positivos. Un resultado positivo falso es cuando la prueba indica que la muestra tiene anticuerpos contra el VIH cuando la persona no está infectada con el VIH. Si el estudio muestra que los resultados de las nuevas pruebas del VIH utilizadas en diferentes combinaciones funcionan bien juntos y no producen resultados falsos positivos, podremos empezar a utilizar una nueva combinación de pruebas para la prueba del VIH. Una de las pruebas también puede detectar anticuerpos contra la sífilis en mujeres embarazadas, además de detectar anticuerpos contra el VIH. La sífilis es una infección de transmisión sexual que, si no se trata, puede transmitirse al niño en el útero y causar un daño grave. Si la prueba funciona bien, se puede combinar con otras pruebas del VIH para hacer un diagnóstico final del VIH y al mismo tiempo detectar anticuerpos contra la sífilis. A medida que se le está extrayendo sangre para hacerse la prueba del VIH, los investigadores desean que le proporcione una muestra adicional de sangre de su vena para el estudio. La nueva muestra se utilizará para verificar que las nuevas pruebas del VIH funcionan según lo previsto. Puede elegir si desea participar o no en el estudio. Si usted participa o no, no alterará la atención médica que se le da de ninguna manera. Si decide no participar, aún se hará la prueba del VIH según la práctica habitual. Si acepta participar, la muestra de sangre adicional se utilizará únicamente con fines de investigación. El resultado de la prueba de sangre venosa no se utilizará para determinar su estado de VIH. Nadie más que la persona que recoge la sangre y los investigadores sabrán que usted participó en ella. El estudio y los resultados de las pruebas del estudio se mantendrán confidenciales. Los resultados del estudio serán anónimos (sin revelar el nombre de los pacientes) y su nombre no se utilizará en los formularios de recolecta de datos ni en los tubos de muestra. No hay beneficios directos de participar en este estudio. La recolecta de una muestra adicional puede causarle molestias adicionales, pero no existen otros riesgos previstos asociados a la recolecta de la muestra. Los resultados de este estudio se utilizarán para informar al programa nacional sobre las combinaciones de pruebas para la prueba del VIH. Si tiene alguna preocupación sobre el estudio, puede ponerse en contacto con el Comité Nacional de Investigaciones Sanitarias (NHRC). El número NHRC es: ###### Si está dispuesto a participar en el estudio, firme su nombre a continuación. Se le dará una copia de este formulario para conservarlo. 18 Anexo PARTICIPANTE Me han explicado el estudio y estoy de acuerdo en participar. Nombre del participante Firma Fecha NHRC: ###### Protocolo ### PERSONA QUE ADMINISTRA EL CONSENTIMIENTO He explicado el estudio al paciente y el paciente ha aceptado participar. Nombre del trabajador de salud Firma Fecha TESTIGO INDEPENDIENTE DEL CONSENTIMIENTO (sólo se requiere si el participante no puede leer). El estudio se ha explicado al paciente y éste ha aceptado participar. Nombre del testigo Firma Fecha