Organisation mondiale de la santé (OMS) · Technical Documents

Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы. Доклад двенадцатого совещания

31 décembre 2010 Organisation mondiale de la santé

Le texte intégral est hébergé par l’organisation qui le publie. lawenc.com indexe les métadonnées et renvoie vers la source officielle.

Texte intégral

WHO/HSE/GAR/BDP/2010.5.

Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы

Доклад двенадцатого совещания

Женева, Швейцария 17–18 ноября 2010 г.

ГЛОБАЛЬНОЕ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ И ОТВЕТНЫЕ ДЕЙСТВИЯ

Всемирная организация здравоохранения

Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы

Доклад двенадцатого совещания

Женева, Швейцария 17–18 ноября 2010 г.

Всемирная организация здравоохранения

© Всемирная организация здравоохранения, 2011 г. Все права защищены. Обозначения, используемые в настоящем издании, и приводимые в нем материалы никоим образом не выражают мнения Всемирной организации здравоохранения относительно юридического статуса какой-либо страны, территории, города или района, их правительства или делимитации их границ или рубежей. Пунктирными линиями на картах показаны приблизительные границы, в отношении которых пока еще может быть не достигнуто полного согласия. Упоминание конкретных компаний или продукции некоторых изготовителей не означает, что Всемирная организация здравоохранения отдает им предпочтение по сравнению с другими, которые являются аналогичными, но не упомянуты в тексте, или рекомендует их к использованию. Исключая ошибки и пропуски, наименования патентованной продукции выделяются начальными прописными буквами. Всемирная организация здравоохранения приняла все разумные меры предосторожности для проверки информации, содержащейся в настоящей публикации. Однако публикуемый материал распространяется без каких-либо гарантий, явно выраженных или подразумеваемых. Ответственность за интерпретацию и использование данного материала возлагается на читателя. Ни при каких обстоятельствах Всемирная организация здравоохранения не несет ответственности за ущерб, возникший в результате его использования. Данная публикация содержит коллективные мнения международной группы экспертов и не обязательно отражает решения или политику Всемирной организации здравоохранения. Отпечатано Службой подготовки документов ВОЗ, Женева, Швейцария

Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы Доклад двенадцатого совещания, Женева, Швейцария, 17–18 ноября 2010 года

Содержание 1. 2. 3. Доклад Секретариата ........................................................................................................2 Новая информация о предложениях по утвержденным ВОЗ исследованиям ................................................................................3 Обновленные данные о ДНК-клонах вируса натуральной оспы, хранящихся в Национальном институте инфекционных заболеваний в Южной Африке.........................................................................................3 Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы ..................................................................................................................4 Консультативная группа независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы (AGIES)..........................................................9 Сеть лабораторий диагностики натуральной оспы ........................................................10 Обновленные данные по запасам вируса натуральной оспы, находящимся в репозиториях в Соединенных Штатах и Российской Федерации ..................................................................................................11 Обновленные данные по терапевтическим средствам борьбы с ортопоксвирусом ............................................................................................................12 Обновленные данные по животным моделям.................................................................13 Обновленные данные по противооспенным вакцинам ..................................................13 Запасы вакцин против натуральной оспы в ВОЗ ............................................................15 Архивы программы ВОЗ по ликвидации оспы ...............................................................16 Будущее Консультативного комитета .............................................................................16

4. 5. 6. 7.

8. 9. 10. 11. 12. 13.

Приложение 1. Резюме сообщений ........................................................................................................17 Приложение 2. Повестка дня...................................................................................................................49 Приложение 3. Список участников ........................................................................................................52

1. Доклад Секретариата 1.1. Консультативный комитет ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы провел 17–18 ноября 2010 года совещание под председательством профессора G.L. Smith, основными докладчиками выступили д-р R. Drillien и д-р F. McLellan. Слушания открыл д-р K. Fukuda, который отметил, что дискуссии по этим вопросам ведутся с 1986 года и продолжают вызывать огромный интерес в странах мира. Помимо обсуждения различных тем, данная группа также собралась для проведения оценки масштабного обзора исследований, связанных с вирусом натуральной оспы, в преддверии обсуждения, которое должно состояться на шестьдесят четвертой Всемирной ассамблее здравоохранения, по вопросу об определении сроков уничтожения запасов вируса натуральной оспы. В рамках оценки будут рассмотрены два основных вопроса: во-первых, обзор литературы и неопубликованных данных, представленный группой ученых, которые были рекомендованы данным комитетом; и, во-вторых, внешняя рецензия самого обзора, подготовленная экспертами, не занимающимися непосредственно вирусом натуральной оспы. На данном совещании будет составлен итоговый доклад в дополнение к двум другим документам; все они будут доступны в ближайшее время, а Исполнительному комитету будут переданы в январе 2011 года. Д-р P. Formenti сообщил группе последние данные о деятельности за этот год по проекту ВОЗ, касающемуся натуральной оспы. Доклад прошлогоднего совещания Консультативного комитета был принят к сведению Всемирной ассамблеей здравоохранения в мае 2010 года. Доклад об этом 12-м совещании будет представлен на шестьдесят четвертой Всемирной ассамблее здравоохранения в мае 2011 года. В мае 2007 года в резолюции 60.1 содержалось требование о составлении масштабного научного обзора; позже, в 2008 году, было решено, что данный обзор будет состоять из двух частей: собственно научного обзора и независимой рецензии на него, составленной внешними экспертами, не занимающимися непосредственно натуральной оспой (доклад Консультативной группы независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы, или AGIES). Отчет о проверке Сотрудничающего центра ВОЗ в Центрах контроля заболеваний и профилактики, Соединенные Штаты Америки, был завершен в прошлом году, а составление отчета о проверке Сотрудничающего центра ВОЗ в "Векторе" (Новосибирск, Российская Федерация) завершается в настоящее время. Началась работа подкомитета по Сети лабораторий, занимающихся вирусом натуральной оспы, под руководством д-ра J.-C. Piffaretti в качестве координатора. В отношении запасов противооспенной вакцины были выработаны стандартные операционные процедуры. Позже на совещании был представлен проект "Архив", который состоит частично из сканирования всей относящейся к натуральной оспе документации, то есть примерно 700 тыс. страниц доступных для поиска документов. В соответствии со стратегией ВОЗ все члены, консультанты и наблюдатели Консультативного комитета заполнили и подписали Заявление о наличии конфликта интересов. Шесть экспертов заявили о потенциальном конфликте интересов по основному вопросу данного совещания. Другие эксперты не заявили о каком-либо значимом конфликте интересов. Заявленный интерес, о котором сообщили Peter Biggins и Jean-Claude Piffaretti, был признан минимальным и неспособным отрицательно сказаться на их решении или с достаточным основанием считаться

1.2

1.3

1.4

таковым. Четыре эксперта заявили об интересах, которые Секретариат посчитал необходимым обнародовать.  Д-р Jacob Thorup Cohn заявил, что он является сотрудником Bavarian-Nordic, ведущей частной датской биотехнической компании в области противооспенных средств (антивирусные препараты, вакцины).  Д-р Randall Lanier заявил, что он работает и имеет акции в компании Chimerix, занимающейся разработкой продукта, который может служить мерой биозащиты в случае вспышки натуральной оспы. Д-р Lanier далее указал, что Chimerix предоставила средства для его поездки и участия в настоящем заседании Консультативного комитета.  Д-р Grant McFadden заявил, что он выступал в качестве консультанта корпорации SIGA при составлении ею заявки в Управление США по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов (FDA) на утверждение ST-246 в качестве антивирусного противооспенного средства.  Д-р Robert Drillien указал, что он является консультантом компании Bavarian-Nordic, которая производит противооспенную вакцину, и был консультантом вооруженных сил Франции по вакцине против оспы.

2. Новая информация о предложениях по утвержденным ВОЗ исследованиям 2.1 Д-р R. Drillien сообщил новую информацию о предложениях по исследованиям, представленных в ВОЗ и одобренных научным подкомитетом в период с ноября 2009 года по август 2010 года. Он отметил, что все одобренные предложения не новые, а представляют собой продолжение осуществляемых в настоящее время проектов. Подробные данные по проектам резюмированы в приложении 1. Он представил каждое предложение в кратком виде. Комитет обратился к Секретариату с просьбой подготовить список всех исследовательских проектов, которые уже завершены.

3. Обновленные данные о ДНК-клонах вируса натуральной оспы, хранящихся в Национальном институте инфекционных заболеваний в Южной Африке 3.1 Профессор R. Swanepoel представил новую информацию о ДНК-клонах вируса натуральной оспы, хранящихся в Национальном институте инфекционных заболеваний (NICD), который является преемником Национального института вирусологии Южной Африки. После сделанного ВОЗ в 1980 году заявления о ликвидации оспы все национальные коллекции вируса натуральной оспы должны были быть размещены в четырех хранилищах, расположенных в США, СССР/ Российской Федерации, Южной Африке и Соединенном Королевстве. В 1982 году хранившиеся в Соединенном Королевстве запасы вируса натуральной оспы были переведены в Соединенные Штаты. Было достигнуто соглашение о том, что Южной Африке будут предоставлены в обмен на уничтожение их запасов клоны рекомбинантных плазмид, содержащих фрагменты ДНК вируса натуральной оспы, которые были подготовлены в Соединенном Королевстве д-ром К. R. Dumbell.

9 декабря 1983 года запасы вируса натуральной оспы были уничтожены в присутствии д-ра Dumbell, который был назначен ВОЗ в качестве свидетеля уничтожения. После этого NICD получил неинфекционные ДНК-клоны рекомбинантных плазмид. Эти клоны, которые никогда не использовались, в настоящее время, по состоянию на октябрь 2010 года, хранятся в лаборатории BSL-4 в NICD. Министерство здравоохранения Южной Африки в настоящее время решило, что следует сохранить клоны рекомбинантных плазмид, потенциально полезных для производства диагностических реагентов и составляющих не более 20% генома этого вируса. Остальные клоны должны быть либо переведены в хранилище Центров контроля заболеваний и профилактики (ЦКЗП), либо уничтожены под наблюдением ВОЗ. Если в хранилище ЦКЗП уже имеются дубликаты этих клонов, целесообразнее было бы уничтожить их в Южной Африке, а не транспортировать. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет высказал мнение, что если в ЦКЗП имеются дубликаты клонов рекомбинантных плазмид, содержащих фрагменты ДНК вируса натуральной оспы, то нет необходимости ни перевозить их запасы, ни хранить их.

4. "Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" 4.1 Председатель поблагодарил авторов Научного обзора исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы, за их работу и особенно за их терпение в отношении редакторских правок. Общая оценка Комитета была следующей: что касается выводов, сделанных в обзоре в целом, то Комитет выразил единодушное мнение, что во всех областях был достигнут заслуживающий похвал прогресс, признав в то же время, что возможно проведение дополнительных научных исследований. За последнее десятилетие был проделан значительный объем работы. Прогресс в достижении целей, ради которых было разрешено данное исследование, был значительным, но все же неполным. Задачи, для которых необходим живой вирус, значительно сузились. Д-р А. Alcami представил главу 1, посвященную противооспенным вакцинам, резюме которой содержится в приложении 1. В главе делается вывод о том, что "лицензирование противооспенных вакцин, выращенных в тканевой культуре, было важным шагом вперед; однако применение этих вакцин по медицинским критериям противопоказано для лиц с иммунодефицитом и определенными кожными заболеваниями. Поскольку натуральная оспа ликвидирована, эффективность вакцин нового поколения должна тестироваться с применением вирусов оспы, родственных вирусу натуральной оспы, в исследованиях по оценке защиты животных и в клинических исследованиях, проводимых с целью оценки безопасности и иммуногенности вакцин. Однако доверие к способности этих вакцин обеспечивать защиту от натуральной оспы возрастет, если будет применяться живой вирус натуральной оспы в in vitro тестах нейтрализации и в исследованиях на приматах (кроме человека)". ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет напомнил, что вакцина против натуральной оспы сыграла существенную роль в ликвидации этого заболевания. В то же время остается настоятельная потребность в вакцинах с более высокими показателями безопасности. В этом направлении был достигнут определенный прогресс: например, были изготовлены и лицензированы вакцина, выращенная в тканевой культуре в 4

4.2

4.3

соответствии с современными стандартами надлежащей практики производства, и ослабленная вакцина, и в настоящее время разрабатываются ослабленные штаммы vaccinia вируса. Велась серьезная дискуссия относительно сравнительных достоинств животных моделей при использовании вируса натуральной оспы для дальнейшего тестирования эффективности этих вакцин в отсутствие заболеваний у людей. Комитет согласился, что для большей уверенности в эффективности вакцин-кандидатов желательно было бы проводить in vitro тесты нейтрализации и исследования на приматах (кроме человека) с применением живого вируса натуральной оспы. Некоторые члены считают, что ряд ослабленных вакцин, пересеваемых в клеточной культуре, возможно, достигли такого уровня развития, что не требуют дальнейшего использования живого вируса натуральной оспы. РЕШЕНИЕ: Комитет согласился с выводами авторов. 4.4 Д-р I. Damon представил главу 2, посвященную лабораторной диагностике оспы; резюме данной главы содержится в приложении 1. В главе делается вывод, что "были достигнуты значительные успехи, проявившиеся в расширении возможностей клинической и лабораторной диагностики натуральной оспы" на основе нуклеиновых кислот, но при этом наблюдался лишь ограниченный рост иммунологических диагностических методов и методов, основанных на анализе белков. "Все методы, разработанные к настоящему времени, основаны на данных исследований; ни по одному из них не завершена регламентирующая проверка и ни по одному не завершена процедура утверждения (регистрации)". ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет обсудил клинический алгоритм в диагностике оспы, отметил важные соображения прогностического значения, верные при интерпретации результатов анализов для заболевания с низким уровнем распространенности, и рекомендовал добавить это обсуждение к главе 2. Комитет отметил, что некоторые организации, в том числе ВОЗ, ЦКЗП, ВС США, другие государства-члены и т. д., подготовили видео и DVD- материалы по диагностике. РЕШЕНИЕ: Среди членов Комитета нет единодушного мнения относительно того, нужен ли живой вирус натуральной оспы для дальнейшего развития, совершенствования и лицензирования диагностических методов в клиническом применении. 4.5 Д-р G. McFadden представил главу 3, посвященную геномике вируса натуральной оспы; резюме данной главы содержится в приложении 1. В главе делается вывод, что "имеющаяся в открытом доступе информация о геномах использовалась многими учеными разных стран для разработки высокочувствительных методов диагностики вируса. Новая информация о взаимосвязи между вирусом натуральной оспы и другими ортопоксвирусами также важна для понимания значимости и ограничений в использовании животных моделей для изучения оспы человека. Благодаря чрезвычайному подъему в развитии технологий синтеза, секвенирования и клонирования ДНК в настоящее время стало технически возможным осуществить синтез целого генома вируса натуральной оспы из материала царапины, используя только открытую информацию о последовательности, и воссоздать инфекционный вирус, используя доступные в настоящее время методы молекулярной биологии. В будущие стратегии биозащиты необходимо включать новые концепции, позволяющие решить вопрос о том, как наилучшим образом контролировать применение этих технологий биологического синтеза".

ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет отметил огромные достижения в секвенировании генома вируса натуральной оспы и тот факт, что 48 геномов были секвенированы, проанализированы и данные по ним опубликованы. Комитет также признал изменения, которые произошли с появлением синтетической биологии, и осознание того, что живой вирус натуральной оспы может быть создан без доступа к имеющимся запасам вируса натуральной оспы Сотрудничающего центра ВОЗ. Кроме того, было отмечено, что потенциально возможен синтез вируса натуральной оспы, который нельзя будет выявить с помощью имеющихся в настоящее время средств диагностики, хотя неизвестно, приведет ли это к созданию патогенного вируса. Комитет подчеркнул необходимость создания дополнительных регулирующих мер, пересмотра руководящих принципов и принятия на международном уровне правил в целях снижения вероятности воссоздания живого вируса натуральной оспы. Комитет обсудил вопрос о том, может ли рекомбинация между ортопоксвирусами, которые существуют в природе, привести к появлению вируса с вирулентностью, подобной вирулентности вируса натуральной оспы, и признал наличие неопределенности в этом вопросе. Ставились вопросы об инсерции чужеродных генов, которые изменили бы показатель вирулентности, о чем вкратце упоминалось в данной главе. Отмечалось, что все виды генной инженерии вируса натуральной оспы, включая инсерцию чужеродных генов в вирус натуральной оспы, запрещены. Обсуждалась специфичность вируса натуральной оспы в отношении хозяина. Отмечалось, что причина, по которой натуральная оспа проявляет тропизм конкретно в отношении человеческого организма, по-прежнему неизвестна и что это важный вопрос, касающийся многих патогенов. РЕШЕНИЕ: Комитет согласился с тем, что необходимости в живом вирусе натуральной оспы для изучения ее геномики больше не существует. 4.6 Глава 4, посвященная статусу репозиториев Сотрудничающего центра ВОЗ, была представлена д-ром I. Damon, ее резюме содержится в приложении 1. В этой главе представлены данные о современном статусе (по состоянию на январь 2010 года) репозиториев живого вируса натуральной оспы, о запасах ДНК VARV и, в соответствующих случаях, информация о том, как используются и распределяются фрагменты генов VARV согласно рекомендациям ВОЗ. Репозитории вируса натуральной оспы в настоящее время ограничиваются двумя лабораториями: Сотрудничающим центром ВОЗ по изучению вируса натуральной оспы и других поксвирусных инфекций в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, штат Джорджия, США; и Сотрудничающим центром ВОЗ по диагностике ортопоксвирусных заболеваний и репозиторием штаммов вируса натуральной оспы и ДНК в Государственном научном центре вирусологии и биотехнологии "Вектор" в Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация. Ежегодные доклады из этих двух лабораторий об использовании живого вируса натуральной оспы и статусе репозиториев направляются в Секретариат ВОЗ. Начиная с 2000 года эти доклады также представляются лично, на ежегодных заседаниях Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы, которые проводятся в целях рассмотрения работы, которая проводится с живым вирусом натуральной оспы. Резюме этих сообщений доступны в режиме онлайн на вебсайте ВОЗ1. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет отметил, что на протяжении более 20 лет вирус натуральной оспы успешно сохраняется в двух надежных в плане 1

http://www.who.int/csr/disease/smallpox/research/en/index.html, по состоянию на 1 декабря 2010 года.

безопасности местах, и в течение этого периода он использовался международными партнерами в санкционированных ВОЗ исследованиях. Кроме того, неинфекционные фрагменты ДНК вируса натуральной оспы распределялись в соответствии с руководящими указаниями ВОЗ и под наблюдением Секретариата ВОЗ. РЕШЕНИЕ: Комитет согласился с мнениями авторов. 4.7 Д-р P. Jahrling представил главу 5, посвященную животным моделям и патогенезу, резюме которой приводится в приложении 1. Д-р Jahrling пришел к выводу, что, вероятно, ни одна отдельно взятая комбинация условий не позволит выявить модель, которая одновременно удовлетворяла бы всем критериям, установленным в "Правилах проведения работ с использованием экспериментальных животных" (US 21CRF310.610) Управления по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов США (USFDA); для различных показаний могут потребоваться разные модели. Дальнейшее совершенствование препаратов в качестве моделей может включать патофизиологические данные, полученные в исследованиях с использованием телеметрии и методов медицинской визуализации. Хотя многие из этих разработок могут быть осуществлены с использованием суррогатных ортопоксвирусов в экспериментах на грызунах и приматах, более достоверные данные о средствах борьбы с вирусом натуральной оспы могут быть получены только путем оценки их эффективности на приматах в качестве моделей с использованием вируса натуральной оспы. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет отметил значительный прогресс в разработке и применении моделей инфицирования вирусом натуральной оспы, которые отражают некоторые аспекты натуральной оспы у человека. Эти модели использовались для объяснения патогенных механизмов для оценки новых противовирусных лекарственных средств и разработки диагностических инструментов. Кроме того, модель обезьяньей оспы у приматов использовалась для оценки вакцин-кандидатов и противовирусных агентов. Обсуждались меняющиеся требования регламентирующих органов и базовые нормативные научные исследования, необходимые для лицензирования, и было уделено внимание широкому диалогу между исследователями и регламентирующими органами. Этот диалог помог сформировать экспериментальные программы и продолжается в настоящее время. Ожидается, что для лицензирования новых противовирусных средств борьбы с оспой потребуются данные о защите эффективности против вируса натуральной оспы у животных моделей. РЕШЕНИЕ: Комитет полагает, что изучение живых вирусов натуральной оспы с использованием животных моделей укрепило научное обоснование лицензирования противовирусных агентов, и некоторые члены Комитета считают, что необходимы дополнительные исследования с применением живого вируса натуральной оспы. 4.8 Д-р J. Huggins представил главу 6, посвященную разработке противовирусного агента для лечения оспы, резюме которой содержится в приложении 1. Рассматриваемый в этой главе проект был предпринят в целях получения двух одобренных пероральных противовирусных препаратов с различными механизмами действия, с помощью которых можно лечить клинические случаи оспы. Примечательно, что трем препаратам (цидофовир, ST-246 и СМХ001), которые подавляют репликацию вируса натуральной оспы в клеточной культуре и во

множестве животных моделей с использованием суррогатных ортопоксвирусных моделей, USFDA присвоило статус нового исследуемого препарата, разрешенного к применению в клинических исследованиях для лечения ортопоксвирусных инфекций. В настоящее время проводятся начальные исследования на человеческом организме. Поскольку вирус натуральной оспы был ликвидирован в популяции людей, проведение традиционных клинических испытаний эффективности невозможно. Кроме того, невозможно проводить клинические испытания на людях с этической точки зрения, поэтому для демонстрации эффективности нужно применять "Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных", разработанные USFDA. Учитывая наличие ряда неопределенностей в этих правилах, а также тот факт, что в настоящее время не существует какого-либо противовирусного агента для любого типа показаний оспы (лечения или химиопрофилактики), трудно обеспечить твердые оценки в отношении временных рамок или данных, необходимых для утверждения и одобрения. Согласно д-ру Huggins, можно утверждать, что возможность выполнять работу с живым вирусом натуральной оспы должна сохраняться до тех пор, пока достаточное количество противовирусных препаратов с различными механизмами действия не получат одобрение регламентирующего органа и не смогут быть использованы повсюду в мире для борьбы со вспышкой этого заболевания. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет приветствовал разработку двух чрезвычайно перспективных противовирусных препаратов (ST-246 и СМХ001), которые обеспечивали защиту от ортопоксвирусной инфекции на нескольких животных моделях, включая вирус натуральной оспы, вирус обезьяньей оспы и вирус оспы кроликов. Фазы I и II клинических исследований продемонстрировали также превосходный профиль безопасности этих двух лидирующих соединений-кандидатов. Комитет отметил, что некоторые данные по животным, особенно при исследованиях ST-246, показали, что вакцинацию и одновременное применение лекарств можно осуществлять без ослабления иммунного ответа. Кроме того, было продемонстрировано, что одновременное применение обоих противовирусных препаратов обеспечивало большую степень защиты у некоторых моделей, чем при раздельном применении этих препаратов. Другие противовирусные препараты, помимо ST-246 и СМХ001, находятся на ранних стадиях оценки. Комитет подчеркнул, что вопрос для регламентирующих органов состоит в том, какие дополнительные данные требуются для лицензирования. Было отмечено, что требования к клиническим испытаниям очень жесткие и не всегда учитывают возможности существующих биологических систем. В Комитете обсуждался вопрос о том, что первоначальные данные можно будет собрать и затем передать регламентирующим органам для получения отзыва. Был сделан вывод, что между рядом регламентирующих органов существуют разногласия и что эти органы, скорее всего, дадут научные рекомендации, не имеющие обязательной силы. РЕШЕНИЕ: Комитет согласился, что данные, полученные с использованием живого вируса натуральной оспы, способствовали продвижению в сторону лицензирования противовирусных агентов, однако среди членов Комитета наблюдается расхождение во мнениях относительно того, потребуются ли дополнительные данные о животных моделях, инфицированных живым вирусом натуральной оспы, для завершения процесса лицензирования во всех странах.

5. Консультативная группа независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы: замечания к Научному обзору исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы 5.1 Д-р T. Sorrell представила доклад Консультативной группы независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы (AGIES), резюме которого содержится в приложении 1. Она отметила, что в докладе был обнаружен ряд мелких неточностей и что они будут исправлены. Консультативная группа считает, что "Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" написан четким и понятным языком и дает точный и современный обзор исследований вируса натуральной оспы, включая данные о вилянии регулирующих ограничений на текущие и будущие исследования. Доклад состоит из трех разделов в соответствии со сферой полномочий, предоставленных Группе. В 1-м разделе представлены резюме всех глав научного обзора с конкретными комментариями. Во 2-м разделе содержатся рекомендации Группы для будущих исследований и замечания по хранилищам вируса натуральной оспы. В 3-м разделе обобщаются рекомендации Группы по обеспечению высоких стандартов безопасности, цель которых – предотвращение повторной интродукции натуральной оспы в популяцию людей. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет рассмотрел и обсудил доклад Консультативной группы, который, как он посчитал, сделан на высочайшем уровне. Комитет также приветствовал процесс, благодаря которому мнения, представленные в докладе Консультативной группы, были доведены до сведения авторов научного обзора, и поблагодарил авторов за их работу. Было отмечено, что в докладе имелся ряд мелких неточностей; присутствовавшие члены AGIES признали это и согласились исправить их. Окончательный вариант доклада будет представлен на обсуждение. 5.2 Комитет обсудил временные рамки для хранения фрагментов ДНК вируса натуральной оспы в других лабораториях, помимо ЦКЗП и "Вектора", требование о необходимости уничтожения этих фрагментов ДНК и других реагентов по завершении экспериментов, а также вопрос о наличии подтверждения об их уничтожении от лабораторий, получивших образцы ДНК. Было предложено, чтобы Секретариат ВОЗ установил контакт со всеми получателями и выяснил эти вопросы. Комитет обсудил тот факт, что несколько тысяч лекарственных препаратов были проверены на активность против ортопоксвирусов и вируса натуральной оспы с использованием анализа клеточной культуры in vitro. Структура этих лекарственных препаратов будет обнародована на более поздних этапах разработки. О результатах скрининговых исследований сообщалось на 2-м, 3-м и 5-м заседаниях Консультативного комитета в 2001 и 2003 годах. Многие препараты, первоначально оценивавшиеся как средства борьбы с вирусом натуральной оспы, определялись по идентификационному номеру поставщика, а не по описанию химического класса. Структура некоторых препаратов была раскрыта, когда они прошли оценку на животных моделях, инфицированных натуральной оспой. Секретариат отметил, что согласно соответствующим резолюциям Всемирной ассамблеи здравоохранения, предложения, результаты и благоприятные эффекты, установленные в данном исследовании, должны быть доступны для всех государств-членов. Также было отмечено, что Сотрудничающим центрам, возможно, будет трудно получить доступ

5.3

к препаратам, а компаниям – вкладывать средства в разработку перспективных препаратов без соглашений о соблюдении конфиденциальности или других подобных форм защиты. Кроме того, отмечалось, что разглашение информации о том, что многие препараты не являются действенными в борьбе с вирусом натуральной оспы, может помешать проведению дополнительных исследований таких препаратов другими учеными. 5.4 Комитет обсудил вопрос о разработке новых лекарственных препаратов, а также вопрос о целесообразности дальнейшего масштабного скрининга дополнительных препаратов, учитывая существование двух препаратов с различными мишенями, которые являются эффективными в подавлении заболевания, вызываемого несколькими ортопоксвирусами, включая вирус натуральной оспы в некоторых животных моделях. Были высказаны опасения относительно возможности создания штаммов вируса натуральной оспы, которые будут резистентны к этим лекарствам, а также по поводу того факта, что ни одно из этих лекарств не было одобрено регулирующим органом, что создает сложный сценарий политики по их применению. Обсуждался вопрос целесообразности разработки третьего лекарственного препарата. Авторы из Консультативной группы отметили, что они не рекомендуют немедленно продолжать работу над дополнительными противовирусными препаратами, но в то же время поставили вопрос о важности резистентности и отметили необходимость экспертной консультации относительно потребности в дополнительных антивирусных препаратах.

5.5

6. Сеть лабораторий диагностики натуральной оспы 6.1 Д-р J.-C. Piffaretti представил обновленную информацию о работе подкомитета Сети лабораторий диагностики натуральной оспы (SLN) (см. резюме в приложении 1). Подкомитет был сформирован для обсуждения вопроса о создании сети диагностических лабораторий ВОЗ высокого уровня по всему миру в целях быстрого и надежного выявления любого случая появления вирусов натуральной оспы. Особенности функционирования Сети лабораторий диагностики находятся в процессе окончательного уточнения. Сеть будет состоять из двух справочных лабораторий, работающих совместно с рядом региональных лабораторий, по одной или две в каждом регионе ВОЗ. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Была выражена обеспокоенность по поводу длинного перечня критериев, которым должны будут отвечать региональные лаборатории, но было отмечено, что существующие лаборатории медицинской диагностики высокого уровня уже отвечают большинству критериев. Активно обсуждались вопросы финансирования, использования существующих лабораторий и квалифицированного персонала, интеграция в национальные системы надзора, а также вопрос о том, следует ли формировать структуру сети в увязке с укреплением национального потенциала согласно Международным медико-санитарным правилам (2005 года). Секретариат ВОЗ разъяснил, что сеть предназначена только на случай появления натуральной оспы в целях получения результатов, дающих основания для принятия действий, с четким планом мобилизации, если результаты будут положительными.

7. Обновленные данные по запасам вируса натуральной оспы, находящимся в репозиториях в Соединенных Штатах и Российской Федерации 7.1 Д-р Karem представил обновленную информацию о репозитории Сотрудничающего центра ВОЗ в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, штат Джорджия, США (см. резюме в приложении 1). Д-р Karem охарактеризовал недавно проведенную работу по оценке метода "антигенной ловушки" в исследованиях натуральной оспы и последнюю работу по постсеквенированию дополнительных геномов вируса коровьей оспы, в результате которой было обнаружено, что некоторые "специфичные в отношении натуральной оспы" методы PCR теперь утратили свою специфичность благодаря дополнительным данным секвенирования. Д-р Karem представил исследование, которое показало, что специфичные в отношении натуральной оспы моноклональные антитела отдают предпочтение гамма-облученному антигену. Выявление антигена живого вируса натуральной оспы является по крайней мере в четыре раза менее чувствительным, чем гамма-облученного материала. Это различие нельзя объяснить ни различиями в штаммах вируса, ни искусственной реактивностью после гамма-облучения. Было проведено тестирование других методов инактивации (УФ-облучение, тепло, формалин), при этом было обнаружено, что они уступают гамма-облучению, действующему подобно живому антигену. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Необходимость получения данных о последовательностях в других ортопоксвирусах обсуждалась в связи со специфичностью диагностики вируса натуральной оспы, основанной на использовании последовательностей нуклеиновых кислот. Также состоялось обсуждение наилучшего метода для подтверждения в случае обнаружения натуральной оспы. Была отмечена потребность в более простом методе в тех случаях, когда PCR в реальном времени не применима. 7.2 Д-р S. Shchelkunov сделал сообщение о коллекции вируса натуральной оспы в репозитории Сотрудничающего центра ВОЗ в "Векторе", Российская Федерация (см. резюме в приложении 1). В 2010 году стеклянные пробирки, в которых вирусы натуральной оспы хранились в замороженном состоянии, были заменены, по соображениям безопасности, полипропиленовыми криопробирками с напечатанными на них этикетками, устойчивыми к дезинфицирующим растворам. Текущая научно-исследовательская работа включала проверку противовирусных свойств соединений с ранее выявленной эффективностью в отношении других ортопоксвирусов и тестирование нейтрализующих свойств одноцепочечных антител с ранее установленной нейтрализующей активностью в отношении других ортопоксвирусов. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Были поставлены вопросы в отношении природы используемых противовирусных препаратов. Эта информация будет изложена в докладе, ежегодно представляемом в ВОЗ.

8. Обновленные данные по терапевтическим средствам борьбы с ортопоксвирусом 8.1 Д-р V. Olson представил обновленные данные об использовании живого вируса натуральной оспы для оценки противовирусных препаратов, применяемых против вируса натуральной оспы (см.резюме в приложении 1). Д-р Olson представил данные, свидетельствующие о том, что экстракт растения Sarracenia purpurea является эффективным средством снижения репликации вируса натуральной оспы и vaccinia вируса и, по-видимому, имеет одинаковый механизм действия против обоих вирусов. Такое действие против ортопоксвирусов указывает на возможность его применения в качестве терапевтического средства. В будущем работа будет направлена на дальнейшее исследование активного компонента первичного экстракта (для этого может понадобиться дополнительная оценка его анти-VARV активности) и его потенциальной эффективности в отношении системного заболевания, вызываемого ортопоксвирусом у животных моделей. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Состоялось обсуждение по вопросу снижения титра вируса и воздействия соединения на другие вирусы. Было отмечено, что присутствие экстракта препятствовало транскрипции вируса, при этом степень эффекта зависела от дозы, однако активный компонент экстракта все еще неизвестен и его поиски ведутся с помощью биохимического фракционирования. Будет ли это соединение полезным в практическом плане, выяснится в ходе будущих исследований (на животных). 8.2 Д-р D. Hruby представил обновленные данные о разработке противовирусного препарата ST-246 (см. резюме в приложении 1). Препарат продемонстрировал активность против всех ортопоксвирусов, тестированных в клеточной культуре и на животных моделях, и эти исследования включали эксперименты с вирусом натуральной оспы и вирусом оспы обезьян на приматах в качестве моделей. Кроме того, препарат показал хорошую стабильность и отличные показатели безопасности во всех проведенных испытаниях. Была завершена фаза II клинических испытаний на животных, а также подана Заявка на регистрацию нового лекарства, которое делает возможными проведение токсикологических исследований. Фармацевтическая компания SIGA осуществляет промышленное производство и подготовку к опорным исследованиям по оценке безопасности и эффективности. Хотя подходящая для человека доза еще не определена и изучается, д-р Hruby делает вывод, что ST-246 находится на заключительном этапе разработки и готовности к поставке. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Состоялось обсуждение вопроса о том, потребуют ли регламентирующие органы для подтверждения обоснованности решения о выдаче лицензии проведения дальнейших экспериментов с живым вирусом натуральной оспы, особенно исследований на приматах, чтобы убедиться, что используемая модель в наибольшей степени приближена к ситуации с человеком. Ставились вопросы о возможности проведения клинических испытаний для применения препарата в исключительных обстоятельствах до его регистрации. Подходящая доза для человека все еще исследуется. 8.3 Д-р R. Lanier представил обновленные данные по разработке компанией Chimerix противовирусного препарата для борьбы с натуральной оспой СМХ001 (см. резюме в приложении 1). СМХ001 является липидным конъюгатом фосфоната ациклического нуклеотида, цидофовира. СМХ001 обладает широким спектром ингибирования

вирусов, содержащих двунитевую ДНК, которые вызывают заболевание у человека, у CMX001 высокий генетический барьер резистентности, он удобен в применении в виде таблеток или жидкости; до настоящего времени не было установлено каких-либо фактов нефротоксичности. Препарат демонстрирует эффективность против ортопоксвирусов в системах клеточных культур и на животных моделях. СМХ001 разрабатывается в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" Управления по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов и находится в фазе II клинических испытаний на людях, цель которых – оценить возможность применения СMX001 для лечения цитомегаловирусных инфекций. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Обсуждались планы дополнительных исследований на различных видах. Комитет отметил, что диалог между исследователями и регламентирующими органами продолжается. Обсуждался вопрос о том, следует ли приглашать представителей регламентирующих органов на будущие заседания Комитета.

9. Обновленные данные по животным моделям 9.1 Д-р P. Jahrling сообщил о перспективах разработки моделей приматов для оценки средств противодействия оспе человека и оспе обезьян (см. резюме в приложении 1). Д-р Jahrling пояснил, что с 1999 года был достигнут определенный прогресс в разработке животных моделей, но подчеркнул, что все еще нет животных моделей, которые удовлетворительно сочетали бы в себе все существенные особенности оспы человека. Оратор представил новые исследования по патологии оспы человека в сравнении с яванскими макаками, которым внутривенно вводили вирусы натуральной оспы и оспы обезьян. Д-р Jahrling пришел к выводу, что достигнут значительный прогресс, но предстоит еще проделать большую работу с живым вирусом натуральной оспы. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Активно обсуждался вопрос о том, является ли более удачной моделью натуральной оспы человека вирус оспы обезьян или вирус натуральной оспы у обезьян. Был сделан вывод, что ни одна из моделей не воспроизводит полностью натуральную оспу человека, но обе модели могут использоваться для оценки эффективности диагностики противовирусных препаратов и вакцин. Некоторые члены Комитета полагают, что модель заражения вирусом натуральной оспы будет иметь важное значение для лицензирования противооспенных лекарственных средств. Мнения членов Комитета разделились в вопросе о том, следует ли искать дополнительные животные модели, или существующие модели предоставляют достаточную информацию для оценки новых вакцин и противовирусных препаратов.

10. Обновленные данные по противооспенным вакцинам 10.1 Д-р L. Wegner представил ситуацию с клинической разработкой живой ослабленной противооспенной вакцины IMVAMUNE (см. резюме в приложении 1). Подтверждена безопасность IMVAMUNE для здоровых людей и для ВИЧ-инфицированных пациентов с количеством T-клеток+CD4, превышающим 200 на µ1. IMVAMUNE вызывает быструю и сильную vaccinia-специфичную иммунную реакцию, сопоставимую у здоровых объектов и лиц из групп риска.

ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Задавались вопросы относительно Т-клеточного ответа в сравнении с традиционными вакцинами. Д-р Wegner проинформировал Комитет, что IMVAMUNE имеет Т-клеточный ответ, сопоставимый с реакцией традиционных вакцин. Обсуждалось количество требуемых доз, а также способ введения (в настоящее время подкожное введение считается более предпочтительным, чем внутримышечное). Возникла дискуссия относительно проблем, с которыми IMVAMUNE сталкивается в связи с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных", при этом отмечалось, что, хотя IMVAMUNE считается безопасной для проведения испытаний на человеке, любое сравнение с традиционными вакцинами (1-го и 2-го поколения) невозможно, так как по соображениям безопасности USFDA не разрешит проведение испытаний с использованием традиционных вакцин. В предстоящей фазе III исследования внимание будет в основном сосредоточено на вопросах безопасности и иммуногенности, и фаза III будет планироваться в сотрудничестве с USFDA. Результаты данного исследования ожидаются с большим интересом, так как IMVAMUNE, по-видимому, является самым успешным продуктом, исследуемым в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных". Обсуждались побочные эффекты, и подчеркивалось отсутствие кардиотоксичности. Обсуждались преимущества профиля безопасности штамма MVA в чрезвычайных ситуациях, а также относительные преимущества и недостатки различных способов введения вакцины. Кроме того, обсуждались потенциальные преимущества IMVAMUNE, связанные с пополнением существующих запасов вакцин, и преимущества вакцин для лиц с ослабленным иммунитетом. Предусматривается создание лиофилизированного варианта вакцины. Обсуждалась цена вакцины, более высокая, чем цены традиционных вакцин. Было признано, что такая цена создаст определенные проблемы для развивающихся стран, но ожидается, что она будет снижаться. Предполагается, что срок годности вакцины составит по крайней мере три года при современной форме выпуска; для значительного увеличения срока годности необходимо изготовление лиофилизированных вакцин. Обсуждались данные о вакцинации с помощью IMVAMUNE ВИЧ-инфицированных лиц с низким числом T-клеток + CD4, а также данные, полученные в исследованиях на приматах (кроме человека). 10.2 Д-р H. Yokote представил новую информацию об использовании противооспенной вакцины LC16m8 в Японии (см. резюме в приложении 1). В 1960-е годы в Японии был учрежден Комитет по исследованию противооспенной вакцины, результатом работы которого стало создание новой ослабленной противооспенной вакцины LC16m8. LC16m8, вакцина, ослабленная серией пересевов в тканевой культуре, была лицензирована в Японии в 1975 году. Недавно была образована Исследовательская группа по противооспенной вакцине для проведения исследований медицинских мер борьбы с биотерроризмом. Эта Группа доказала, что LC16m8 i) так же эффективна, как вакцина на основе штамма Lister или вакцина на основе штамма NYCBH, с помощью которой была ликвидирована оспа и ii) обладает более высоким уровнем безопасности, чем обе вышеупомянутые вакцины. Результаты постмаркетингового исследования наряду с данными предыдущих клинических исследований показали, что LC16m8 имеет высокие показатели безопасности и иммуногенности как для пациентов, прежде не подвергавшихся действию vaccinia, так и для уже имевших подобный опыт. Д-р Kurane отметил заинтересованность Группы по исследованию противооспенной вакцины в оценке способности сыворотки, полученной после вакцинации LC16m8, к анти-VARV нейтрализации и заинтересованность в совместной работе с Сотрудничающими центрами ВОЗ над этими исследованиями. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Были поставлены вопросы о регистрации пациентов с нарушенным иммунитетом и числе лиц с атопическим дерматитом, которые были

вакцинированы. Комитет поставил вопрос о национальных планах в отношении создания запасов этой вакцины, а также ее доступности в рамках общемирового запаса. В настоящее время официальная политика японского правительства, касающаяся национальных запасов, неизвестна. Установлено, что максимальная мощность производства составляет 80 млн. доз в год. 10.3 Д-р I. Damon рассказал об использовании живого вируса натуральной оспы для содействия разработке менее реактогенной вакцины: продолжающаяся оценка "третьего" поколения вакцин (см. резюме в приложении 1). Д-р Damon остановился на роли теста (реакции) нейтрализации редукции бляшек, которые образует вирус натуральной оспы, как показателя эффективности противооспенной вакцины; такие тесты, возможно, особенно важны для оценки тех вакцин, которые не вызывают типичных кожных поражений, являющихся характерным признаком хорошо принявшейся прививки ("take"). Д-р Damon привел данные, в соответствии с которыми можно предположить, что между показателями нейтрализации vaccinia и вируса натуральной оспы существует только слабая корреляция (что согласуется, как отметил д-р Banerjee, с более ранними исследованиями д-ра Downie). Д-р Damon также представил информацию о том, что вакцина ACAM3000 MVA безопасна и хорошо переносится при всех дозах и способах введения, является иммуногенной, вызывая образование анти-vaccinia вируснейтрализующих антител и Т-клеточные реакции, а также образование анти-VARV нейтрализующих антител. Продолжается анализ корреляции между максимальным образованием анти-VARV нейтрализующих антител (Nab), пониженной восприимчивостью к Dryvax и сопутствующей продолжительностью "раздевания" vaccinia вируса как суррогатного маркера эффективности. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет обсудил вопрос о количестве переменных в экспериментальных моделях (например, вирусы, выращенные в различных лабораториях) и вопрос о том, не отражается ли это на результатах. Было предложено ввести дополнительный контроль. Был поставлен вопрос о том, необходимо ли нейтрализовать вирус натуральной оспы in vitro с целью оценки новых вакцин, но ответ на него получен не был.

11. Запасы вакцин против натуральной оспы в ВОЗ 11.1 Д-р P. Formenty представил обновленные данные о запасах противооспенных вакцин в ВОЗ (см. приложение 1). ВОЗ создала стратегический запас противооспенных вакцин в размере 30,5 млн. доз, который хранится в Швейцарии. Почти все (98%) (противооспенная вакцина АСАМ2000™ – 30 млн. доз были переданы в дар компанией "Бакстер") противооспенные вакцины стратегического запаса ВОЗ являются вакцинами второго поколения. Остальные вакцины (2%) (vaccinia – 530 тыс. доз из Бельгии, Германии, Исламской Республики Иран, Нидерландов и Российской Федерации) стратегического запаса ВОЗ являются вакцинами первого поколения. Кроме того, с помощью виртуального механизма создания запасов четыре государства-члена обязались предоставить ВОЗ еще 27 млн. доз в случае дополнительных потребностей: Франция, Германия, Новая Зеландия и США. Со всеми четырьмя странами ВОЗ согласовала Стандартные операционные процедуры. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Комитет поинтересовался, есть ли планы размещения этой информации на веб-сайте ВОЗ. Веб-сайт ВОЗ будет обновлен в конце 2010 года, и тогда эта информация будет добавлена.

11.2 Секретариат ВОЗ обсудил вопрос об общемировых запасах и перспективе проведения кампаний массовой вакцинации. Была рассмотрена ситуация с распределением противовирусных препаратов во время недавней пандемии гриппа H1N1. В течение 10 рабочих дней 80% наименее развитых стран получили противовирусные препараты, выделенные из запасов. Наибольшую проблему для Организации представляют сценарии, основанные не на приоритетах общественного здравоохранения, а на соображениях безопасности. Нужны прямые обсуждения с партнерами, занимающимися вопросами безопасности.

12. Архивы программы ВОЗ по ликвидации оспы 12.1 Г-жа M. Villemin представила обновленную информацию об оцифровывании архивов Программы ликвидации оспы: результаты, перспективы и стратегия (см. резюме в приложении 1). Проект по оцифровыванию архивов Программы ликвидации оспы был начат в июне 2009 года. Бумажные копии документов были сохранены, а сканированные архивы были включены в специализированную базу данных с мощной поисковой системой. После включения и сохранения информации следующей целью является обеспечение доступности всех имеющихся в мире данных с помощью специализированного веб-интерфейса. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Секретариат публично поблагодарил оратора и ее группу за огромную работу по документированию и сохранению материалов. Большая часть архивов Регионального бюро ВОЗ была либо переведена в штаб-квартиру ВОЗ, либо была продублирована там.

13. Будущее Консультативного комитета 13.1 Всемирная ассамблея здравоохранения в 2011 году определит будущее программы по натуральной оспе и, следовательно, будущее Комитета. Секретариат ВОЗ высказал свое мнение о методе работы Комитета и просил рассмотреть его внутренние функции и их выполнение. ОБСУЖДЕНИЕ В КОМИТЕТЕ: Председатель отметил, что Комитет мог позволить себе сосредоточить основное внимание на исследованиях с живым вирусом натуральной оспы. Согласно другим мнениям, Комитет успешно справился со своей задачей консультирования по программе исследования, не концентрируя внимание на вопросах безопасности и логистики. Было также отмечено, что наблюдалась тенденция сосредоточиться на вопросах регулирования, несмотря на то, что опыт Комитета в этой области недостаточен. 13.2 Секретариат ВОЗ выразил искреннее удовлетворение работой Комитета, высоко оценив его деятельность в области научного анализа и контроля. Секретариат ВОЗ также высказал искреннюю признательность репозитариям за их работу. Было отмечено, что эта работа представляет собой отличный пример эффективного сочетания науки и политики.

Приложение 1. Резюме сообщений Обновленная информация о представленных в ВОЗ предложениях по исследованиям Члены Комитета: Robert Drillien, Mariano Esteban, Grant McFadden, Hermann Meyer, Akhilesh Chandra Mishra, Jean-Claude Piffaretti, Tony Robinson, Oyewale Tomori. 25 ноября 2009 года: предложения, представленные "Вектором" 1. Сохранение Российской национальной коллекции вирусов натуральной оспы. 2. Использование живого вируса натуральной оспы для обеспечения разработки вакцин с низкой реактогенностью. Рецензенты признали необходимость одновременного тестирования одних и тех же сывороток для нейтрализации против vaccinia (как предлагалось в проекте), чтобы получить данные, которые подтвердят или опровергнут потребность в дальнейших серологических исследованиях реакции нейтрализации с использованием вируса натуральной оспы. Рецензенты подчеркнули важность включения в анализы международных стандартов для сывороток. Один из рецензентов, отрицательно относящийся к данному проекту, считает, что возможность нейтрализации vaccinia широко использовалась в прошлом для оценки нейтрализующей активности проб сыворотки, полученных у лиц, вакцинированных против натуральной оспы, и он не видит оснований для использования вируса натуральной оспы вместо vaccinia. Данный рецензент также указал, что нет никаких свидетельств того, что метод нейтрализации вируса натуральной оспы является лучшей гарантией защиты от натуральной оспы, чем метод нейтрализации vaccinia вируса. 30 мая 2010 года: предложения, представленные ЦКЗП 1. Использование живого вируса натуральной оспы для сохранения и регенерации неинфекционных производных материалов натуральной оспы для обеспечения диагностических разработок. 2. Использование живого вируса натуральной оспы для оценки средств борьбы с натуральной оспой. 3. Использование живого вируса натуральной оспы для разработки диагностических методов, основанных на использовании белков, и методов обнаружения, специфичных для вируса натуральной оспы. Один из рецензентов полагает, что в проекте недостаточно четко говорится о том, будут ли применяться новые моноклональные антитела для нейтрализации VARV, или работа предполагает только скрининг уже существующих коллекций моноклональных антител. Подкомитет рекомендовал одобрить это предложение при условии, что данный пункт будет уточнен. 4. Использование живого вируса натуральной оспы для поддержки разработки менее реактогенной вакцины: непрерывная оценка вакцин "третьего" поколения.

Некоторые рецензенты отметили, что Консультативному комитету было представлено недостаточно информации об исследованиях по данной теме, и призвали к большей транспарентности в рамках подробных докладов о ходе работы. 8 июля 2010 года: предложение, представленное "Вектором"

1. Открытие противовирусных средств для лечения и профилактики натуральной оспы. Рецензенты внесли несколько предложений и обратились с одной просьбой: – Необходимо проводить сравнение противовирусных лекарств-кандидатов с наиболее эффективными средствами борьбы с натуральной оспой, которые были выявлены к настоящему времени, а именно ST-246 и СМХ001. Особое внимание следует обратить на новые лекарственные препараты, вирусные мишени которых отличаются от ранее обнаруженных. – Некоторые из 90 лекарственных средств, которые будут протестированы, могут быть забракованы на основании их известной или вероятной токсичности для людей. – Подкомитет и со временем весь Комитет должны быть проинформированы о ходе работы по тестированию активности лекарственных препаратов против натуральной оспы in vitro до того, как будет предпринята проверка этих средств на приматах (кроме человека) с применением живого вируса натуральной оспы 23 августа 2010 года: предложение, представленное Университетом Ла Троб, Австралия 1. Открытие молекулярного механизма, лежащего в основе ингибирования гибели клеток, зараженных вирусом натуральной оспы. Большинство рецензентов считают, что это исследование не требует какого-либо одобрения со стороны подкомитета, поскольку эта работа никоим образом не связана с использованием живого вируса натуральной оспы (или какого-либо другого родственного ортопоксвируса). Один из рецензентов высказал опасение по поводу внимания, которое может привлечь публикация такой работы, а также непонимания среди широкой публики относительно ее последствий. Рецензент рекомендовал, чтобы Комитет рассмотрел это предложение в целом до его одобрения.

Обновленная информация о клонах вируса натуральной оспы, хранящихся в Национальном институте вирусологии, Южная Африка Robert Swanepoel Национальный институт вирусологии, Южная Африка В 1979 году Всемирная организация здравоохранения документально заверила, что натуральная оспа ликвидирована во всем мире, а 8 мая 1980 года 33-я Всемирная ассамблея здравоохранения официально объявила об этом. Государствам-членам было рекомендовано перевести свои запасы вируса натуральной оспы в одно из двух назначенных ВОЗ хранилищ – одно в Соединенных Штатах Америки, второе в Советском Союзе (теперь Российская Федерация). Южная Африка, которая ранее была исключена из членов ВОЗ, продолжала хранить запасы вируса натуральной оспы в Национальном институте вирусологии (НИВ). 9 декабря 1983 года министр здравоохранения Южной Африки председательствовал на церемонии автоклавирования и последующего сжигания запасов вируса оспы в НИВ. Министерство здравоохранения согласилось уничтожить запасы вируса оспы человека на том условии, что клоны (фрагменты) ДНК вируса оспы (генетический материал), представляющие собой большую часть генома вируса, которые были подготовлены в Соединенном Королевстве для ВОЗ, будут храниться в НИВ. Теоретически эти клоны могли бы быть использованы для подготовки диагностических реагентов, но не могут быть вновь собраны в целый вирус. Эти клоны никогда не использовались и, по состоянию на октябрь 2010 года, по-прежнему хранятся в лаборатории BSL-4 в Национальном институте инфекционных заболеваний (НИИЗ), преемнике НИВ. Министерство здравоохранения приняло решение сохранить только те клоны, которые могут быть потенциально полезны в изготовлении диагностических реагентов, что составляет не более 20% генома вируса. Остальные будут либо переведены в хранилище в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, Соединенные Штаты Америки, или, в случае наличия там дубликатов, уничтожены под наблюдением ВОЗ.

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 1. Противооспенные вакцины Antonio Alcami1 and Bernard Moss2 1 2

Центр молекулярной биологии Северо Очоа (CSIC-UAM), Мадрид, Испания Национальный институт аллергии и инфекционных болезней, Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд, Соединенные Штаты Америки

Значение для общественного здравоохранения Натуральная оспа – единственное заболевание человека, которое было ликвидировано в результате кампании глобальной вакцинации. Это достижение остается одним из величайших триумфов медицинской науки. Противооспенная вакцина, в составе которой живой вирус коровьей оспы, оказалась высокоэффективной. Однако ее применение сопровождалось случаями тяжелых осложнений, особенно у лиц с иммунодефицитом или страдающих от экземы. Кроме того, поскольку вакцина производилась в живых животных в нестерильных условиях, это не соответствовало современным требованиям, предъявляемым к изготовлению вакцин. Таким образом, очевидно, что в интересах общественного здравоохранения необходимо разработать новую, эффективную и безопасную вакцину. Успехи, достигнутые к настоящему времени Были получены и лицензированы противооспенные вакцины, изготовленные в клетках тканевой культуры. Однако эти вакцины вызывают побочные эффекты, по-видимому, в той же степени, что и оригинальные вакцины. В связи с этим было применено несколько новых подходов с целью получения более безопасных вакцин. Наибольший успех был достигнут со штаммами vaccinia вируса, которые были более ослабленными, а именно с модифицированными вирусами vaccinia Ankara (MVA) и LC16m8, которые были выделены посредством многократных пассажей в тканевых культурах. Штамм MVA в большей степени аттенюирован, чем LC16m8; его обычно вводят внутримышечно или подкожно, и поэтому он не вызывает типичных кожных поражений, которые являются признаком хорошо принявшейся прививки ("take"). Штамм LC16m8 может быть введен путем нанесения насечек на кожу, подобно традиционной противооспенной вакцине, но при этом кожное проявление положительного результата прививки более мягкое, чем при применении родительского штамма, штамма Lister вируса коровьей оспы. Было показано, что MVA и LC16m8 безопасны для приматов (кроме человека) и обеспечивают хорошую иммуногенность, включая защиту от вируса обезьяньей оспы (monkeypox virus), близкого родственника вируса натуральной оспы. Новое поколение вакцин, состоящих из живого vaccinia вируса со специфическими генными мутациями, ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота), кодирующей гены вируса оспы, и очищенных белков, продемонстрировало многообещающие результаты в опытах на животных-моделях, но ни одна из этих вакцин не проходила клинических испытаний. Результаты и выводы Лицензирование противооспенных вакцин, выращенных в тканевой культуре, было важным шагом вперед; однако применение этих вакцин по медицинским критериям противопоказано для лиц с иммунодефицитом и определенными кожными заболеваниями. Поскольку натуральная оспа ликвидирована, эффективность вакцин нового поколения должна тестироваться с применением вирусов оспы, родственных вирусу натуральной оспы, в исследованиях по оценке защиты животных и в клинических исследованиях, проводимых с целью оценки безопасности и иммуногенности вакцин. Однако доверие к способности этих вакцин обеспечивать защиту от натуральной оспы возрастет, если будет применяться живой вирус натуральной оспы в in vitro тестах нейтрализации и в исследованиях на приматах (кроме человека).

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 2. Лабораторная диагностика оспы Inger Damon1, Hermann Meyer2 и Sergei Shchelkunov3 1

Отдел исследований вирусов оспы и бешенства, Центры контроля заболеваний и профилактики, Атланта, Соединенные Штаты Америки 2 Институт микробиологии Бундесвера, Мюнхен, Германия 3 Отдел геномных исследований, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация. Значение для общественного здравоохранения Вирус оспы человека (variola вирус) – возбудитель натуральной оспы, болезни, о ликвидации которой Всемирная ассамблея здравоохранения объявила в 1980 году. Этот вирус рассматривается как потенциальное средство ведения биологической войны или как оружие в руках террористов, поскольку он может вызывать высокую заболеваемость и смертность, а также в связи с тем, что значительная часть населения в настоящее время восприимчива к вирусу натуральной оспы, так как рутинная вакцинация против оспы была в основном прекращена в 1970-х годах (Henderson et al., 1999) 2 . Учитывая серьезные последствия диагностики натуральной оспы или даже последствия неверно поставленного диагноза, следует признать, что необходимо располагать возможностью идентифицировать натуральную оспу безошибочно, быстро и надежно. Кроме того, важно в равной мере надежно дифференцировать оспу от других подобных нозологических форм. Прогностическая ценность положительного диагностического результата (также называемая "положительной диагностической ценностью") чрезвычайно низка в условиях низкой распространенности болезни; необходимо применять диагностические стратегии, которые повысят прогностическую ценность положительных результатов. Успехи, достигнутые к настоящему времени В период 2000–2010 годов были достигнуты значительные успехи, проявившиеся в расширении возможностей клинической и лабораторной диагностики натуральной оспы. В этой главе представлен исторический обзор методов диагностики натуральной оспы и обобщены достижения в области диагностических методов на основе нуклеиновых кислот, серологических анализов и методов обнаружения белков, разрабатывавшихся с 2000 года. Благодаря новым технологиям появились подходы, принятые на вооружение многими исследователями. В частности, в стратегиях обнаружения нуклеиновых кислот все в большей степени используются высокопроизводительные технологии полимеразных цепных реакций в реальном времени и, в некоторых случаях, матричные платформы (array platforms). Результаты и выводы Было разработано много методов анализа на основе нуклеиновых кислот, но лишь несколько иммунологических диагностических методов и методов, основанных на обнаружении белков. Все методы анализа вируса натуральной оспы и поксвируса, включая эти новые методы, разработаны в результате проводившихся исследований; ни по одному из них не завершены процедуры регламентирующей проверки и регистрации. В процессе написания обзора обсуждалась возможная необходимость наличия живых вирусов натуральной оспы для регулирующей проверки методов анализа. Одна диагностическая тест-система, основанная на анализе нуклеиновых кислот, коммерчески доступна; однако она предназначена исключительно для исследовательских целей, а не для диагностического применения.

Henderson DA et al. (1999). Smallpox as a biological weapon: medical and public health management. Working Group on Civilian Biodefense. Journal of the American Medical Association, 281:2127–2137.

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 3. Геномика вируса натуральной оспы Grant McFadden1, David Evans2, Sergei Shchelkunov3 и Inger Damon4 1

Отдел молекулярной генетики и микробиологии, Медицинский колледж, Университет штата Флорида, Гейнсвилл, Соединенные Штаты Америки 2 Школа клинических и лабораторных наук, факультет медицины и стоматологии, Университет Альберты, Эдмонтон, Альберта, Канада 3 Отдел геномных исследований, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация 4 Отдел исследований вирусов оспы и бешенства, Центры контроля заболеваний и профилактики, Атланта, Соединенные Штаты Америки Значение для общественного здравоохранения Новые технологии радикально расширили наши представления о геномике вируса натуральной оспы. В результате были разработаны новые способы обнаружения и диагностики натуральной оспы, повысилось понимание эволюционной истории инфекций натуральной оспы и причин их тяжести. Однако новые технологии в синтетической биологии также создали непредвиденные проблемы, касающиеся контроля доступа к генетическим материалам, связанным с вирусом натуральной оспы. В этой главе представлен общий обзор последних открытий в геномике вируса натуральной оспы, а также обсуждается вопрос о том, каким образом новые технологии в синтезе генома могут помешать реализации существующих стратегий по сдерживанию распространения вируса. Успехи, достигнутые к настоящему времени Полная последовательность ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) геномов двух близкородственных вирусов натуральной оспы была впервые опубликована в начале 1990-х годов. В результате реализации интенсивной программы исследований натуральной оспы, которая была одобрена Секретариатом Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и начала осуществляться в 2000 году, в настоящее время стала широко доступной почти полная информация о геномах 48 изолятов вируса натуральной оспы из разных географических регионов. Эти данные могут быть использованы для лучшего понимания эволюции вируса натуральной оспы, для разработки более совершенных диагностических методов, а также (в совокупности с биоструктурными исследованиями) для более глубокого изучения проблемы чувствительности к определенным лекарствам. Работая с клонированными генами вируса натуральной оспы, исследователи также расширили свои представления о взаимодействиях и активности индивидуальных белков вируса натуральной оспы. Это позволяет еще лучше понять, каким образом вирус вызывает заболевание человека. В этой главе обобщена имеющаяся информация о геномах вируса натуральной оспы и показано, каким образом она применяется для изучения родства этого вируса с другими поксвирусами животных, для изучения эволюции вируса во время эпидемических заболеваний людей и для разработки диагностических тестов. В данной главе обсуждается проблема будущего применения геномного материала вируса натуральной оспы в свете новых технологий получения синтезированных ДНК. Результаты и выводы Имеющаяся в открытом доступе информация о геномах использовалась многими учеными разных стран для разработки высокочувствительных методов диагностики вирусов. Новая информация о взаимосвязи между вирусом натуральной оспы и другими ортопоксвирусами также важна в целях понимания значимости и ограничений в использовании животных моделей для изучения оспы человека. Благодаря чрезвычайному подъему в развитии технологий синтеза, секвенирования и клонирования ДНК в настоящее время стало технически возможным осуществить синтез целого генома вируса натуральной оспы из материала царапины, используя

только открытую информацию о последовательности, и воссоздать инфекционный вирус, используя доступные в настоящее время методы молекулярной биологии.

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 4. Статус репозиториев вируса натуральной оспы и нуклеиновых кислот в Сотрудничающих центрах ВОЗ Evgeny Stavskiy1, Christine Hughes2, Inger K Damon2 1

Отдел геномных исследований, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Новосибирская область, Российская Федерация 2 Отдел исследований вирусов оспы и бешенства, Центры контроля заболеваний и профилактики, Атланта, Джорджия, Соединенные Штаты Америки В данной главе обобщены данные о статусе (по состоянию на январь 2010 года) запасов живого вируса натуральной оспы (VARV) и запасов VARV-ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), а также – там, где это уместно – данные об использовании и распределении фрагментов генов VARV, согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). Поскольку кампания по ликвидации натуральной оспы проходила с нарастающим успехом, в 1976 году Отдел ВОЗ по ликвидации натуральной оспы инициировал попытки уменьшить запасы VARV, хранящиеся в лабораториях. В результате число лабораторий, докладывавших о запасах VARV в Комиссию по глобальной ликвидации натуральной оспы, снизилось с 75 до 7 к декабрю 1979 года и впоследствии до 4 к 1981 году. Оставшиеся запасы были локализованы в Российской Федерации, Южной Африке, Соединенном Королевстве и Соединенных Штатах. В 1982 году запасы VARV из Портон-Дауна в Соединенном Королевстве были переправлены в Соединенные Штаты, в Центры контроля заболеваний и профилактики (ЦКЗП) в Атланте, штат Джорджия. Запасы вируса в Южной Африке, хранившиеся в Национальном институте вирусологии в Сандригеме, были уничтожены в 1983 году (хотя Южная Африка все еще сохраняет клонированные, неинфекционные фрагменты VARV). В мае 1996 года своей резолюцией WHA 33.4 Всемирная Ассамблея здравоохранения одобрила рекомендации, предложенные в связи с завершением ликвидации натуральной оспы. В резолюции четко указано, что оставшиеся репозитории VARV должны находиться в ограниченном количестве мест. Коллекция с тех пор уменьшилась, и в настоящее время ограничена двумя лабораториями: Сотрудничающий центр ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций в ЦКЗП и Сотрудничающий центр ВОЗ по диагностике ортопоксвирусных заболеваний и репозиторий штаммов вируса натуральной оспы и ДНК в Российском государственном научном центре вирусологии и биотехнологии "Вектор" в Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация. Ежегодные отчеты из этих двух лабораторий представляются в Секретариат ВОЗ. Отчеты содержат данные об использовании живых VARV и статусе репозиториев. С 2000 года эти отчеты также представляются лично на ежегодных заседаниях Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы, которые созываются с целью проверки работы, которая проводится с живыми VARV. Резюме этих выступлений доступны в режиме онлайн, на веб-сайте ВОЗ3.

http://www.who.int/csr/disease/smallpox/research/en/index.html.

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 5. Животные модели и патогенез Peter B. Jahrling Объединенный научно-исследовательский центр, Национальный институт аллергии и инфекционных болезней, Национальные институты здравоохранения, Фредерик, Соединенные Штаты Америки Значение для общественного здравоохранения Возможность использования вируса натуральной оспы террористами в качестве биологического оружия общеизвестна. Кроме того, повторное появление оспы обезьян в Демократической Республике Конго, ставшее угрозой для общественного здравоохранения, в еще большей степени способствовало осознанию необходимости экстренной разработки усовершенствованных мер противодействия ортопоксвирусам, включая использование таких средств, как вакцины и противовирусные лекарства. Поскольку является общепризнанным, что для доказательства эффективности этих мер противодействия необходимы животные модели, в настоящей главе основное внимание уделено животным моделям, оказавшимся удобными для изучения мер борьбы с ортопоксвирусными болезнями. Успехи, достигнутые к настоящему времени Мелкие животные модели, применявшиеся в экспериментах с вирусом эктромелии (возбудителем оспы мышей), вирусом оспы коров, вирусом оспы кроликов и vaccinia вирусом, содействовали более глубокому пониманию патогенеза и иммунологии поксвирусных инфекций; эти знания были использованы для организации очень важных исследований с участием приматов. Приматы в качестве моделей в экспериментах с вирусом натуральной оспы или вирусами оспы обезьян в наибольшей степени подходят для разработки безопасных и эффективных средств борьбы с натуральной оспой человека. Современные проблемы С помощью различных комбинаций доз вируса натуральной оспы и путей экспозиции приматов (обезьян cynomolgus) получают прогнозируемые типы болезней, которые воспроизводят некоторые, но не все характерные признаки натуральной оспы человека. Хотя модели требуют дальнейшего усовершенствования, они адекватно продемонстрировали эффективность нескольких противовирусных лекарств-кандидатов, включая цидофовир и ST-246. Возможно, ни одна отдельно взятая комбинация условий не позволит выявить модель, которая одновременно удовлетворяла бы всем критериям, предусмотренным “animal rule” (Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных) Управления по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов Соединенных Штатов (US 21CRF 310.610); для различных показаний могут потребоваться разные модели. Дальнейшее усовершенствование приматов в качестве моделей может включать патофизиологические данные, полученные в исследованиях с использованием телеметрии и методов медицинской визуализации. Особое внимание следует уделять выявлению образцов биомаркеров, которые могли бы быть использованы в клинических испытаниях в качестве сигналов (пусковых механизмов) к раннему вмешательству, тем самым повышается вероятность успешного вмешательства и упрощается лицензирование мер противодействия ортопоксвирусным заболеваниям. Хотя многие из этих разработок могут быть осуществлены с использованием суррогатных ортопоксвирусов в экспериментах на грызунах и приматах, более достоверные данные о средствах борьбы с вирусом натуральной оспы могут быть получены только путем оценки их эффективности на приматах в качестве моделей с использованием вируса натуральной оспы.

"Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Глава 6. Разработка противовирусных лекарств для лечения натуральной оспы John W. Huggins1 и Nina Tikunova2 1

Институт медицинских исследований инфекционных заболеваний армии Соединенных Штатов, Форт-Детрик, Соединенные Штаты Америки 2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация Значение для общественного здравоохранения Крайне маловероятно, что крупномасштабная вакцинация против натуральной оспы будет проводиться прежде, чем произойдет первая вспышка эпидемии натуральной оспы, поскольку с существующими противооспенными вакцинами сопряжены серьезные, а иногда и летальные случаи заболеваний. Поэтому, если натуральная оспа возникнет повторно, вероятно, будет необходимо лечить большое число больных противовирусными лекарствами, поскольку пройдет некоторое время, прежде чем кампании массовой вакцинации обеспечат населению адекватный защитный иммунитет. Ранее при осуществлении мер контроля натуральной оспы приходилось полагаться исключительно на вакцинацию и поддерживающее лечение инфицированных больных, вероятность смерти у которых могла составлять 30%. Однако опыт борьбы с недавней эпидемией гриппа H1N1 показал, что и вакцины, и противовирусные лекарства могут играть важную роль в мероприятиях служб общественного здравоохранения, обеспечивая как контроль эпидемии, так и снижение смертности инфицированных больных. Описываемый в настоящей главе проект был разработан в целях получения двух разрешенных к применению пероральных противовирусных лекарств с различными механизмами действия для лечения клинических случаев натуральной оспы. Необходимо, чтобы эти лекарства получили одобрение ведомств, регулирующих производство и применение лекарственных средств, если их придется использовать во время вспышки эпидемии. Санкционирование регулирующих ведомств предоставляет также убедительные доказательства эффективности лекарств, которые необходимы должностным лицам, разрабатывающим стратегии контроля. Поскольку оспа, вызываемая вирусом натуральной оспы, была ликвидирована в результате массовой вакцинации, эффективность этих лекарств может быть продемонстрирована только с помощью животных моделей, а именно, моделей вирус натуральной оспы – инфицированные приматы (кроме человека). Успехи, достигнутые к настоящему времени Разработка любых противовирусных терапевтических средств – это долгий и трудоемкий процесс, который оказывался безуспешным в борьбе со многими вирусными инфекциями, включая обычную простуду. Что касается натуральной оспы, то значительный успех был достигнут в начальной стадии открытия лекарств, и для ряда лекарств – потенциальных кандидатов необходима оценка с применением животных моделей. Три соединения – цидофовир, ST-246 и CMX001, которые ингибируют репликацию вируса натуральной оспы в клеточной культуре и во многих животных моделях (суррогатные ортопоксвирусные модели), получили от Управления по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов Соединенных Штатов (USFDA) статус нового исследуемого препарата, разрешенного к применению в клинических исследованиях (IND); лекарства предназначены для лечения ортопоксвирусных инфекций. Проводятся начальные исследования на человеке. Два из этих соединений (цидофовир и ST-246) продемонстрировали активность в летальной модели приматы – вирус натуральной оспы, а третье соединение

является пролекарством цидофовира, которое можно принимать перорально. Разработка ST-246 и СМХ001 продвигается, и продолжаются клинические испытания. Дополнительная работа, которую необходимо выполнить с живым вирусом натуральной оспы, в целях получения разрешенных к применению противовирусных лекарств для лечения натуральной оспы Несмотря на то, что к настоящему времени получены многообещающие результаты, обширный опыт промышленного производства лекарственных препаратов позволяет сделать вывод, что менее 35% соединений, с которыми проводятся расширенные испытания по оценке безопасности (USFDA, фаза II), будут лицензированы. Процесс продвижения от стадии IND до применения нового лекарства занимает в среднем от пяти до семи лет. Поскольку вирус натуральной оспы был ликвидирован в человеческой популяции, традиционные клинические испытания эффективности неосуществимы. Кроме того, невозможно проводить клинические испытания на людях по этическим соображениям, таким образом, для демонстрации эффективности необходимо следовать Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных (далее Правила) USFDA (US21CRF310.610). Учитывая неопределенности в Правилах, а также тот факт, что ни одно из противовирусных лекарств в настоящее время не получило одобрения по какому-либо из типов показаний натуральной оспы (лечение или химиопрофилактика), трудно определить, какие понадобятся сроки и какие данные потребуются для регистрации лекарств; ожидается, что необходимые данные должны включать (но не ограничиваться этим) работу с вирусом натуральной оспы. Тщательность проверки данных и уровень критического научного анализа при проведении исследований с использованием животных моделей, которые, как предполагается, призваны подтвердить соответствие критериям Правил, должны быть такими же, как при проведении клинических испытаний на человеке, цель которых – содействовать получению одобрения продуктов по другим типам показаний, с использованием других путей санкционирования. Получению одобрения в других странах, кроме Соединенных Штатов, сопутствует по меньшей мере такая же неопределенность. Можно утверждать, что работа с живым вирусом натуральной оспы должна оставаться вариантом выбора до тех пор, пока адекватное количество лекарств с различными механизмами действия не будет зарегистрировано регулирующими ведомствами и не появится возможность их повсеместного применения для борьбы со вспышками эпидемии натуральной оспы. В заключительной части доклада Института медицины национальных академий под названием "Рассмотрение вопроса о необходимости продолжать исследования живых вирусов натуральной оспы" отмечается, что "наиболее убедительная причина необходимости долговременного сохранения запасов живых вирусов натуральной оспы – это их важнейшая роль в идентификации и разработке противовирусных лекарственных средств, предназначенных для применения в случае крупномасштабной вспышки эпидемии натуральной оспы".

"Консультативная группа независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы: замечания к "Научному обзору исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" Tania Sorrell и Rakesh Aggarwal от имени AGIES. Консультативная группа независимых экспертов (AGIES) пришла к выводу, что "Научный обзор исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" написан четким и понятным языком и дает точное и современное представление об исследованиях натуральной оспы, в том числе о воздействии регуляционных ограничений на настоящие и будущие исследования. Полный текст доклада представлен в трех частях в соответствии с кругом полномочий, предоставленных AGIES. В части 1 представлено резюме каждой главы Научного обзора с последующими конкретными комментариями. В части 2 содержатся рекомендации Комитета по дальнейшим исследованиям и замечания по репозиториям вируса натуральной оспы (VARV). В части 3 обобщаются рекомендации AGIES для обеспечения высоких стандартов безопасности, связанных с возможностью новых вспышек эпидемии натуральной оспы.

Рекомендации для дальнейших исследований и использования живого вируса натуральной оспы Часть 1. Геномика, диагностика и репозитории Геномика Практически полные геномные последовательности имеются для примерно 50 изолятов вируса натуральной оспы. Поскольку геном вируса натуральной оспы обладает лишь ограниченным геномным разнообразием и демонстрирует серьезные гомологии с геномами других ортопоксвирусов, AGIES считает, что для общественного здравоохранения нет нужды в секвенировании дополнительных изолятов вируса натуральной оспы. Диагностика Были разработаны несколько методов, основанных на нуклеиновых кислотах. В некоторых использовались клонированные или синтезированные генетические элементы ДНК вируса натуральной оспы для оценки соответствующих подходов и их разработки, в других использовались интактные геномные ДНК натуральной оспы; в некоторых клонированные ДНК натуральной оспы применялись в качестве положительного контроля. Для их дальнейшей разработки применение живого VARV не требуется. В отсутствие клинического заболевания невозможно определить чувствительность, специфичность, прогностичность положительного или отрицательного результата этих испытаний в клинических ситуациях. Существует необходимость в нормативном подтверждении этих подходов. Следует предпринять прямые сравнительные исследования и дальнейшую оптимизацию существующих методов, особенно полимеразной цепной реакции в реальном времени PCR и микроматричных платформ. По мере развития технологии диагностики следует разрабатывать более современные методы. Существует ряд серологических тестов для выявления антител ортопоксвирусов. Методы "антигенной ловушки" находятся на ранней стадии разработки; в настоящее время они подходят для ортопоксвирусов, но ни один из них не подходит конкретно для вируса

натуральной оспы. Они также могут получить выгоды от прямого сравнительного исследования. Требуются усилия для улучшения их показателей; по мере прогресса в технологии диагностики могут быть разработаны и более совершенные методы. Живой вирус натуральной оспы AGIES придерживается мнения, что живой вирус натуральной оспы не требуется ни для дальнейшей разработки диагностических тест-систем, ни для валидации технических методов анализа. Репозиторий См. часть 3. Вопросы безопасности. Часть 2. Вакцины, животные модели и лекарственные средства – будущие исследования и потребность в использовании живого вируса натуральной оспы

Вакцины AGIES полагает, что необходимо продолжать попытки разрабатывать вакцины, которые будут более безопасными и, по крайней мере, столь же эффективными, как и оригинальные и/или существующие лицензированные вакцины против натуральной оспы. Для того чтобы подготовиться к потенциальной вспышке натуральной оспы, необходимо разработать стратегии эффективной терапевтической иммунизации, такие как постконтактная вакцинация или доставка иммуноглобулинов и/или моноклональных антител для борьбы с vaccinia. Эти подходы должны помочь сократить время реагирования систем здравоохранения в случае вспышки заболевания. Кроме того, пассивная иммунизация могла бы смягчить побочные эффекты имеющихся вакцин в особых подгруппах населения. Животные модели Ни модели натуральной оспы у животных, ни инфицирование животных натуральным поксвирусом не может с точностью смоделировать натуральную оспу. Хотя существующие модели на приматах (кроме человека), на которых используется VARV, имеют недостатки, проведенные за последнее десятилетие исследования по дальнейшему их развитию принесли определенные результаты. Единственной причиной для продолжения попыток разработать такие модели является обеспечение соответствия нынешним жестким нормативным требованиям в отсутствие заражения вирусом натуральной оспы. По мнению AGIES, более продуктивным подходом был бы пересмотр нормативных требований для вакцин и лицензирования лекарственных средств для борьбы с вирусом натуральной оспы, учитывая, что заражения людей этим вирусом больше не происходит. Поэтому AGIES рекомендует, чтобы вместо разработки животных моделей, в которых применяется VARV, в исследованиях основное внимание уделялось улучшению суррогатных моделей, в которых используют инфицирование другими ортопоксвирусами их естественных хозяев (например, вирусом оспы обезьян (MPXV), вирусом коровьей оспы (CPXV), вирусом оспы кроликов (RPXV), вирусом эктромелии/оспы мышей (ECTV), инфекциями у приматов (кроме человека), кроликов и грызунов)). Такие модели позволили бы провести исследования патогенеза поксвирусной инфекции, анализ эффективности лекарственных средств и вакцин и создать критерии оценки защиты. Лекарственные средства Два противооспенных лекарственных средства, а именно цидофовир и ST-246, находятся на окончательных этапах разработки. Описана устойчивость к каждому из этих лекарств в лабораторных условиях, но риск устойчивости, вызванной лечением в естественных условиях, неизвестен. AGIES полагает, что, если развитие устойчивости в естественных условиях 29

считается Консультативным комитетом ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы (ACVVR) вполне вероятной перспективой, тогда следует разработать дополнительные лекарственные препараты с альтернативными механизмами противовирусного действия. Однако в первую очередь усилия следует сосредоточить на цидофовире и ST-246. Живой вирус натуральной оспы В настоящее время, если предположить, что вопросы регулирования, касающиеся тестирования вакцин и лекарственных средств, решены, единственным показанием для использования живого VARV является проверка эффективности лекарственных средств в лабораторных условиях. Часть 3. Вопросы безопасности Мониторинг мер по предотвращению распространения вируса натуральной оспы Необходимо продолжать строгую регулярную проверку обеспечения качества и практических мер по предотвращению распространения VARV в Российском государственном научном центре вирусологии и биотехнологии ("Вектор") и Центрах контроля заболеваний и профилактики Соединенных Штатов (ЦКЗП). Созданные методами генной инженерии VARV, мутанты VARV или поксвирусы, содержащие части генома VARV AGIES предлагает следующие рекомендации. Необходимо разработать новые стратегии в целях создания потенциала для синтеза живого VARV с самого первого этапа, включая принятие государствами – членами ВОЗ национальной политики по этому вопросу. Рекомендуется, чтобы на уровне национальной политики были рассмотрены последние предложения в области биобезопасности (Bügl et al. 2007)4. Всемирная организация здравоохранения должна стремиться получить от всех стран обновленное подтверждение достоверности данных об их запасах ДНК вируса натуральной оспы (в различных формах, таких как фрагменты, ампликоны и/или плазмиды). Что касается существующего запрещения на лаборатории, помимо лабораторий двух Сотрудничающих центров ВОЗ, в которых содержится более 20% генома VARV, рекомендуется, чтобы как ЦКЗП, так и "Вектор" представили в ВОЗ документацию с перечнями, в которых указано, в какие лаборатории какие сегменты ДНК были распределены. Также следует выяснить, был ли распределен целый геном (или должен быть распределен) в некоторые лаборатории, или хотя бы сегменты различных генов, содержащих <20% генома.

Bügl H et al. (2007). DNA synthesis and biological security. Nature Biotechnology, 25:627–629.

Подкомитет для создания Сети лабораторий по исследованию вируса натуральной оспы Jean-Claude Piffaretti Interlifescience, Massagono, Switzerland Подкомитет был создан для обсуждения вопроса создания глобальной сети диагностических лабораторий высокого уровня в системе ВОЗ, Сети лабораторий по исследованию вируса натуральной оспы (SLN), которая обладала бы потенциалом быстро и точно обнаруживать любое проявление вируса натуральной оспы. Задача Сети будет состоять в том, чтобы в самые кратчайшие сроки уведомлять ВОЗ о любом значительном событии, связанным с возможным проявлением натуральной оспы. В настоящее время подкомитет включает представителей двух справочных лабораторий (ЦКЗП и "Вектор") и представителей каждого региона ВОЗ. В настоящее время определяется сфера деятельности данной Сети лабораторий. Она будет включать две справочные лаборатории, а также по крайней мере по две лаборатории от каждого региона ВОЗ. Региональные лаборатории будут обладать потенциалом быстрого и надежного выявления вируса натуральной оспы с использованием исключительно молекулярных методов, основанных на ДНК. Две справочные лаборатории уже заготавливают вирусные культуры натуральной оспы и обладают потенциалом по применению соответствующих диагностических методов, включая типирование штаммов вируса натуральной оспы. Справочные лаборатории будут осуществлять окончательную подтверждающую диагностику вируса натуральной оспы и затем хранить выявленные штаммы вирусов в своих репозиториях. Региональной лаборатории-кандидату потребуется придерживаться ряда критериев, касающихся компетенции, биобезопасности и биозащиты, чтобы получить право на вхождение в сеть. Эти критерии включают: – регулярную диагностическую деятельность в области медицинской вирусологии с применением методов молекулярной биологии, в том числе PCR в реальном времени; – успешное регулярное участие в проверках профессионального уровня, включая и те, которые организовывает ВОЗ совместно со справочными лабораториями в отношении ортопоксвирусов и вирусов натуральной оспы; – контролируемый доступ к усовершенствованной лаборатории BSL-3; – успешное инспектирование специальным комитетом ВОЗ; – способность быстро обрабатывать образцы в пределах ограниченного периода времени (например, в пределах 8 часов с момента объявления тревоги); – предварительно вакцинированный персонал и т. д. Работа Сети лабораторий по исследованию оспы человека будет координироваться руководящим комитетом, в который войдут представители всех лабораторий сети, а также представитель Секретариата ВОЗ. Руководящий комитет Сети будет: – организовывать работу лабораторной сети; – разрабатывать и утверждать процедуры, которые будут использовать лаборатории, в частности те, которые будут заниматься приемкой и инактивацией образцов, а также используемые методы диагностики; – осуществлять на регулярной основе проверку, с тем чтобы удостовериться, что все вышеупомянутые процедуры и методы обновляются и отражают современный уровень науки; – осуществлять на регулярной основе проверку, с тем чтобы удостовериться, что региональные лаборатории продолжают соответствовать этим критериям; – следить за результатами проверки профессионального уровня; – оказывать, в случае необходимости, поддержку региональным лабораториям.

Считается, что некоторые государства-члены могут иметь одну или несколько отвечающих самым высоким требованиям лабораторий, уполномоченных своим правительством проводить молекулярную диагностику натуральной оспы. Об этих лабораториях необходимо уведомить Секретариат ВОЗ и уполномочить их непосредственно связываться со справочными лабораториями и Секретариатом ВОЗ. Предлагается, чтобы Сеть лабораторий по исследованию вируса натуральной оспы в конце концов могла войти в состав более общей сети диагностических лабораторий, объединенных Международными медико-санитарными правилами.

Использование живого вируса натуральной оспы для сохранения и воссоздания неинфекционных производных материалов натуральной оспы в целях развития диагностики Исследователи: Inger Damon, Kevin Karem, Victoria Olson Сотрудничающий центр ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций, Атланта, Джорджия, Соединенные Штаты Америки Значение для общественного здравоохранения Возможность подтверждения достоверности диагностических методов, основанных на использовании нуклеиновых кислот и белков, играет решающую роль для раннего выявления и распознавания натуральной оспы, если ее повторная интродукция станет реальностью. Последствия как ложноотрицательного, так и ложноположительного результата могут привести к значительным задержкам и ошибкам при проведении ответных мер, осуществляемых системами здравоохранения в случае вспышки данного заболевания. В свете вышесказанного сохраняется необходимость сохранения запасов ДНК и антигенов вируса натуральной оспы для продолжения исследований в соответствии с протоколами, утвержденными Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ). За время проведения санкционированных исследований запасы ДНК вируса натуральной оспы истощились. Эти запасы использовались для оценки различных основанных на использовании нуклеиновых кислот диагностических методов с целью подтверждения их достоверности и профессионального использования в работе с партнерами из разных стран. Этот неинфекционный материал, который соответствует материалу, экстрагируемому из клинического изолята, бесценен для подтверждения диагнозов, основанных на анализе нуклеиновых кислот. Хотя плазмиды, представляющие собой соответствующие таргетные части ДНК, можно использовать в качестве внутреннего положительного контроля, подтверждение метода будет гораздо более надежным, если использовать материалы, близкие к аутентичному клиническому изоляту. При анализах чувствительности расчет уровня обнаружения (LoD) можно произвести, используя ДНК вируса, которая была извлечена из очищенных вирионов. Такие материалы будут по-прежнему использоваться для подтверждения достоверности методов обнаружения, а также в клинической диагностике. Кроме того, неинфекционный материал также необходим для тестирования методов диагностики, основанных на обнаружении белков в предварительной фазе исследования. Методы Вся работа с живым вирусом натуральной оспы проводится на 4-м уровне биобезопасности (BSL-4) в соответствии с мандатом Сотрудничающего центра ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, США. Проверка соблюдения правил безопасности и биозащиты проводится в лаборатории независимыми группами из США и ВОЗ на регулярной основе. Любое использование ДНК или антигена вируса натуральной оспы за пределами лаборатории BSL-4 требует инактивации данного вируса. Вирус натуральной оспы инактивируется до извлечения нуклеиновой кислоты путем применения нагрева и лизиса. Материал для подготовки антигена инактивируется гамма-облучением.

Результаты ДНК-диагностика В целях проведения тщательной оценки диагностических методов, основанных на нуклеиновых кислотах, необходимо провести полную оценку панели ДНК, изолированной от ближайших соседей, для подтверждения ее специфичности. У одного ортопоксвируса, вируса коровьей оспы, было выявлено широкое филогенетическое разнообразие, о чем свидетельствует анализ незавершенных последовательностей. Было обнаружено, что несколько вновь полученных изолятов вируса коровьей оспы, как ни странно, дают перекрестную реакцию при использовании метода PCR в реальном времени с ранее подтвержденной сигнатурой, характерной для вируса натуральной оспы. Диагностика на основе белков Специфической реактивностью по отношению к вирусу натуральной оспы обладает гибридомная линия моноклональных мышиных антител. Однако оказалось, что эта реактивность существенно смещена к гамма-облученному антигену по сравнению с антигеном живого вируса натуральной оспы. Изменение реактивности оказалось характерным для процедуры инактивации с помощью гамма-облучения, поскольку такие методы инактивации, как тепловое воздействие, УФ или формалин, индуцировали меньшую степень реактивности (схожую с антигеном живого вируса натуральной оспы) по сравнению с гамма-облученным антигеном вируса натуральной оспы. Обсуждение/Направления будущих исследований Несмотря на тот факт, что специфическая для вируса натуральной оспы мишень была в высококонсервативном гене, оказалось, что этот район не был уникальным для вируса натуральной оспы: подобная последовательность также была обнаружена в человеческом возбудителе коровьей оспы. Характерные для вируса натуральной оспы сигнатуры других опубликованных диагностических методов в настоящее время сравниваются с данными биоинформатики, чтобы определить, сохраняют ли они свою специфичность, исходя из этих вновь полученных последовательностей вируса коровьей оспы. Возможность перекрестных реакций VARV с ближайшим соседом, вирусом коровьей оспы, при проведении специфических для VARV анализов резко повышает вероятность получения ложноположительных результатов, что может привести к сбою в рамках инфраструктуры общественного здравоохранения. В будущих исследованиях будет получено больше биоинформативных данных в результате секвенирования геномных ДНК из других ближайших соседних вирусов и оценки новых сигнатур для специфичности в отношении более широкой панели ДНК вируса натуральной оспы, близких к нему вирусов и других возбудителей, провоцирующих появление сыпи. В совокупности эти данные помогут разработать наиболее точный и чувствительный метод PCR в реальном времени, который сделает возможным надежное выявление вируса натуральной оспы. Что касается метода исследования на основе белков, то началась работа по "сортировке" антигенных детерминант в надежде найти эпитоп, распознаваемый с помощью моноклонального антитела, характерного для натуральной оспы. Был начат еще один экспериментальный проект по оценке замороженных гибридом (предварительно генерированных) для новых моноклональных антител-кандидатов. Продолжаются эксперименты по созданию банка протеинов натуральной оспы для использования в микроматричных анализах на основе белков. Полученные в результате этих исследований реагенты в дальнейшем принесут пользу при подтверждении результатов, полученных с живым вирусом натуральной оспы. В результате продолжающихся исследований будут разработаны варианты методов обнаружения вирусов, основанных на использовании белков, а также серологические тесты, обеспечивающие более высокую надежность тестирования ортопоксвирусов.

Новые данные о современном состоянии коллекции штаммов вируса натуральной оспы и открытии противовирусных препаратов для борьбы с натуральной оспой Evgeny Stavskiy и Sergei Shchelkunov Отдел геномных исследований, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, Российская Федерация

Сотрудничающий центр ВОЗ по диагностике ортопоксвирусных заболеваний и репозиторий штаммов вируса натуральной оспы и ДНК, Кольцово, Новосибирская область, Россия Согласно результатам инспектирования хранящихся материалов, в российской коллекции штаммов вируса натуральной оспы (VARV) имеется: – лиофилизированных и замороженных культур – 120 штаммов; – 17 первичных проб, взятых у больных людей в прошлом; – общее количество зарегистрированных хранящихся единиц – 691. В 2010 году работа с вирусом натуральной оспы продолжалась в следующих направлениях: – стеклянные пробирки, содержащие вирусы, хранившиеся в замороженном состоянии, были заменены полипропиленовыми криопробирками с напечатанными этикетками, устойчивыми к дезинфицирующим растворам. Это было сделано для повышения безопасности как в процессе хранения, так и во время работы; – тестирование противовирусных свойств препаратов с ранее выявленной противовирусной эффективностью в отношении других ортопоксвирусов; – тестирование нейтрализующих свойств мини-антител с выявленной ранее нейтрализующей активностью в отношении других ортопоксвирусов. Все культуры VARV, которые ранее хранились в стеклянных пробирках, в настоящее время перемещены в полипропиленовые криопробирки. Было исследовано примерно 90 химических соединений различных классов (гетероциклические производные, производные нуклеозидов, производные адамантина и т. д.). Наиболее перспективные из этих химических соединений прошли полный цикл тестирования на суррогатных вирусах in vitro и in vivo (vaccinia, коровья оспа и эктромелия). По результатам этих испытаний 31 наиболее перспективное химическое соединение было отобрано для дальнейших исследований in vitro для оценки наличия противовирусной активности в отношении четырех штаммов вируса натуральной оспы с различными уровнями вирулентности (6-58, Ind-3a, Congo-9 и Butler). Из этих соединений самую высокую активность против натуральной оспы продемонстрировали четыре соединения, синтезированные в Новосибирском институте органической химии Сибирского филиала Российской академии наук. Была протестирована группа как ранее, так и вновь синтезированных одноцепочечных человеческих антител против ортопоксвирусов на их способность подавлять инфекционность вируса натуральной оспы. Наличие вируснейтрализующих свойств было проверено на реакциях нейтрализации редукции бляшек вируса натуральной оспы в эукариотической культуре клеток Vero. В качестве положительного контроля использовались мышиные моноклональные антитела 2D5. Исследование проводилось при стабильном титре (250PFU/ml) вируса натуральной оспы, штамм Ind-3a. Результаты показали, что четыре из семи исследованных одноцепочечных человеческих антител были способны нейтрализовать инфекционность вируса натуральной оспы. Коллекция вируса натуральной оспы в настоящее время постоянно хранится во вновь созданном репозитории в лаборатории Сотрудничающего центра ВОЗ, предназначенном для

исследований VARV. Этот репозиторий оборудован полным комплектом систем физической защиты, а также аварийно-предупредительной и пожарной сигнализациями.

Использование живого вируса натуральной оспы для оценки противовирусных средств борьбы с этим заболеванием Inger Damon, Kevin Karem, Victoria Olson Сотрудничающий центр ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций, Атланта, Джорджия, Соединенные Штаты Америки Дополнительные партнеры из других организаций: Jeffrey Langland, Mark Prichard, Michele Barry. Значение для общественного здравоохранения Основной целью обеспечения готовности к акту биотерроризма, вызвавшему вспышку натуральной оспы, является спасение жизней, если каким-либо образом данное заболевание возникнет вновь. Наличие терапевтических средств для борьбы с оспой обеспечило бы значительные преимущества в период вспышки этого заболевания, позволяя проводить лечение после экспозиции. В исследовании Stittelaar et al., опубликованном в журнале "Nature" 11 декабря 2005 года, дается описание летального интратрахеального инфицирования оспой обезьян и показано, что лечение с помощью противовирусного средства во время заболевания оказывало защитное действие, тогда как вакцинация не давала этого эффекта. Похоже, что эти результаты подвергают сомнению ограниченную информацию, собранную в период кампании ликвидации натуральной оспы, согласно которой вакцинация, проведенная в течение первых 4-х дней после экспозиции, эффективно предотвращает заражение натуральной оспой. Согласно современной точке зрения, необходимы два противовирусных соединения с различными механизмами действия, которые должны быть лицензированы и доступны для применения. Желательно получить соединения, мишенями которых являются вирусные белки, вирусные процессы или клеточные функции, необходимые для вируса, но несущественные для человеческого организма-хозяина. Оценка терапевтических средств предполагает изучение их активности в отношении инфекции, вызванной живым вирусом натуральной оспы, которое проводится in vitro и/или на животных моделях. К настоящему времени получено несколько соединений, которые представляются перспективными – они воздействуют на клеточные мишени хозяина, подавляя репликацию вируса, или воздействуют непосредственно на вирусные белки, необходимые для репликации и созревания вируса. Успешная разработка этих препаратов потребует тестирования с применением живого вируса натуральной оспы, которое дало бы возможность оценить и обеспечить прямое воздействие и эффективность этих препаратов. Методы Вся работа с живым вирусом натуральной оспы проводится на 4-м уровне биобезопасности (BSL-4) в соответствии со сферой компетенции Сотрудничающего центра ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, США. Проверка соблюдения правил безопасности и биозащиты проводится в лаборатории независимыми группами из США и ВОЗ на регулярной основе. Результаты Оценка ингибиторов тирозинкиназы Предыдущие работы с vaccinia ортопоксвирусом позволили предположить, что определенные семейства клеточных тирозинкиназ участвуют в выходе вируса из инфицированной клетки. Некоторые соединения ингибируют одно или оба семейства клеточных тирозинкиназ (Abl- и 36

Src-семейства), которые в настоящее время применяются для терапевтического лечения хронического миелолейкоза и стромальных опухолей. Количественная оценка образования внеклеточного оболочечного вируса (EEV) и зрелого вириона (MV) в присутствии ингибиторов тирозинкиназы подтвердила, что они специфически подавляют образование/высвобождение EEV. Понимание механизма действия этих потенциальных терапевтических средств очень важно не только для безопасности пациентов, но также для возможной разработки будущих терапевтических средств. Вирус натуральной оспы, как и вирус оспы обезьян, выходит из клеток через актиновые отростки, как это видно на примере vaccinia вируса. Более того, лицензированные лекарства и их производные предотвращали EEV-выход вируса оспы обезьян и вируса натуральной оспы. Клеточные тирозинкиназы необходимы для эффективного высвобождения и распространения EEV во время ортопоксвирусной инфекции; Src-семейство тирозинкиназ необходимо для образования актиновых отростков, а Abl-семейство тирозинкиназ выполняет функцию высвобождения EEV. Наши данные свидетельствуют о том, что эти клеточные тирозинкиназы являются подходящими мишенями для терапевтических средств, и недавно наша работа была принята к публикации в Journal of Virology. Поскольку мишенями этих терапевтических средств являются клеточные белки, такой метод вряд ли может вызвать устойчивость к вирусу. Оценка растительного лекарственного средства против оспы человека В результате проведенных в лаборатории Джеффри Лэнглэнда исследований недавно было "вновь открыто" растение-хищник, обладающее противоортопоксвирусной активностью. Существует множество исторических описаний успешного лечения в период вспышек натуральной оспы на Северо-Американском континенте с помощью этого растительного экстракта. Группа Лэнглэнда показала, что этот экстракт эффективно подавляет репликацию вируса и цитопатические эффекты различных ортопоксвирусов, вызываемые вирусом. При дозах, которые подавляют репликацию вируса, наблюдалась либо незначительная клеточная токсичность, либо ее отсутствие. Репликация вируса блокировалась в начальной стадии, но вскоре после этого наблюдалась частичная репликация, скорее всего вследствие распада или утилизации активных компонентов, входящих в экстракт. Однако обработка клеток свежим экстрактом через каждые шесть часов полностью подавляла репликацию вируса. Этот экстракт эффективно подавляет репликацию vaccinia вирусов, вирусов обезьяньей оспы и натуральной оспы, действуя на этапе ранней транскрипции вируса. Эффект подавления был характерен для ортопоксвирусов, но экстракт не оказывал значительного воздействия на репликацию других тестировавшихся вирусов. Наконец, другие прошедшие испытания растительные лекарственные средства не оказывали воздействия на репликацию vaccinia вируса. Эта активность в отношении ортопоксвирусов свидетельствует о возможности его применения в качестве терапевтического средства. Обсуждение/Направления будущих исследований В будущем основное внимание в работе будет уделено дальнейшему исследованию свойств этого экстракта: идентификации его активного компонента (для чего может понадобиться дальнейшая оценка его противовирусных свойств) и оценке эффективности его применения на животных моделях с системным ортопоксвирусным заболеванием. Существуют другие интересные потенциальные препараты для борьбы с вирусом натуральной оспы, требующие оценки; по крайней мере два новых перспективных класса противовирусных средств (5-substituted 4’-thiodeoxyribonucleosides, proteosome inhibitors) дают надежду на возможность борьбы с другими ортопоксвирусами, например vaccinia вирусами и вирусами коровьей оспы. Использование живого вируса натуральной оспы для определения эффективности этих препаратов in vitro позволит выявить противовирусные средства с уникальными механизмами действия на различных этапах жизненного цикла вируса.

Перспективы разработки моделей приматов для оценки средств борьбы с натуральной оспой и оспой обезьян Peter Jahrling Объединенный исследовательский центр, Национальный институт аллергии и инфекционных болезней, Национальные институты здоровья, Фредерик, Соединенные Штаты Америки Начиная с 1999 года в разработке животных моделей был достигнут определенный прогресс, в то же время следует подчеркнуть, что до сих пор еще нет таких животных моделей, которые удовлетворительно воспроизводили бы все соответствующие аспекты оспы человека. Вирус натуральной оспы может быть полезным для понимания физиологии и иммунологии человека, поскольку он обладает способностью подавлять "хозяина" таким образом, каким это могут делать немногие вирусные возбудители заболевания. Необходимы дальнейшие исследования для разработки усовершенствованных животных моделей, которые могут воспроизводить основные аспекты заболевания человека, и для понимания взаимодействия между вирусом и клеткой в человеческих клетках-мишенях, важного для патогенеза и иммунной реакции. Новые исследования в области патологии оспы человека в сравнении с яванскими макаками, которым были внутривенно введены вирусы натуральной оспы и оспы обезьян, показали, что необходимо дальнейшее изучение роли смешанных инфекций, механизмов лимфоидного некроза и лимфоидной гиперплазии, патологии репродуктивной функции, легких и почек. Хотя необходимость в параллельных исследованиях с оспой обезьян чрезвычайно важна и в работе с моделями натуральной оспы был достигнут значительный прогресс, предстоит еще много сделать. Для достижения конкретных целей модели следует оптимизировать путем варьирования штамма вируса, дозы и способов доставки в организм. Следует продолжать исследования, чтобы определить механизмы лимфоидного некроза, гиперплазии и апоптоза, усовершенствовать анализ коагулопатии/фибринолитических процессов и выявить соответствующие биомаркеры для клинического вмешательства.

Новые данные о разработке ST-246 Dennis E Hruby SIGA Technologies, Inc., Соединенные Штаты Америки Существует необходимость в эффективных ингибиторах для борьбы с заболеваниями, вызванными поксвирусами, например оспой человека, вызванной вирусом натуральной оспы, который является потенциальным средством ведения биологической войны. Таким же образом разработки эффективных мер противодействия необходимы для новых зоонозов, вызванных вирусами коровьей оспы и оспы обезьян. Противовирусное средство борьбы с оспой человека ST-246, разработанное компанией SIGA, отвечает этой нереализованной потребности и находится на последнем этапе разработки и подготовки для поставок. ST-246 продемонстрировало свою эффективность на всех моделях мелких животных и приматах (кроме человека), протестированных к настоящему времени. Завершена фаза II клинических испытаний, а также подана заявка на лицензирование нового лекарства, которая дает возможность проводить токсикологические исследования. SIGA находится в процессе выпуска продукции на рынок и подготовки к опорным исследованиям безопасности и эффективности. В 2010 году SIGA сосредоточит основное внимание на завершении подготовки к масштабному производству, получении разрешения регуляторного органа и проводимой в настоящее время работе по соблюдению "Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных" при использовании вирусов оспы обезьян и натуральной оспы на моделях приматов (кроме человека).

Ход работы по разработке препарата СМХ001, активного в отношении вируса натуральной оспы и других дцДНК-содержащих вирусов Randall Lanier, Scott Foster, Bernhard Lampert, Tim Tippin, Lawrence C. Trost, Rose O’Mahony, Laurie Keilholz, Alice Robertson, Merrick Almond и George Painter Chimerix Inc., Durham NC, Соединенные Штаты Америки СМХ001 представляет собой липидный коньюгат фосфоната ациклического нуклеотида, цидофовира (CDV, Vistide). И СМХ001, и CDV подавляют репликацию вирусных ДНК и активны in vitro в отношении всех 5 семейств вирусов, содержащих двухцепочечные ДНК (дцДНК), которые вызывают заболеваемость и смертность среди людей; к ним относятся и такие ортопоксвирусы, как вирус натуральной оспы. Однако клиническое применение CDV ограничено необходимостью внутривенного вливания и высокой частотой случаев острой почечной токсичности. СМХ001 в настоящее время проходит фазу II клинических испытаний в качестве средства профилактики цитомегаловирусного заражения человека и разрабатывается в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" (USFDA) в качестве средства борьбы с инфекцией натуральной оспы. Препарат продемонстрировал свою эффективность в снижении заболеваемости и смертности у животных моделей, инфицированных вирусом натуральной оспы, даже после появления клинических признаков заболевания, включая поражения кожного покрова. СМХ001 имеет ряд преимуществ по сравнению с CDV и другими лекарственными средствами, разрабатываемыми для лечения натуральной оспы, включая широкий спектр ингибирования дцДНК-содержащих вирусов, которые вызывают заболевание у людей, высокий генетический барьер резистентности, удобное пероральное применение в виде таблеток или жидкости и отсутствие к настоящему времени свидетельств нефротоксичности. Отсутствие нефротоксичности подтверждается данными, полученными in vitro, которые говорят о том, что СМХ001 не является субстратом для переносчиков органических анионов в организме человека, которые активно выводят CDV в клетки почек. Основными преимуществами в разработке этого противовирусного препарата для показаний при натуральной оспе являются профиль резистентности СМХ001 и возможность оценивать безопасность и эффективность СМХ001 на пациентах с опасными для жизни дцДНК-вирусными инфекциями, которые имеют много общего с вирусом натуральной оспы.

Ход клинических исследований нерепликационной противооспенной вакцины третьего поколения IMVAMUNE Lars Staal Wegner Bavarian Nordic, Kvistgaard, Дания IMVAMUNE (MVA-BN), разрабатываемая в настоящее время как самостоятельная нерепликационная вакцина третьего поколения против натуральной оспы, представляет собой живую сильно ослабленную вакцину на основе штамма vaccinia, который не воспроизводится в клетках человека. Более 3200 участников были вакцинированы IMVAMUNE (> 5000 доз), в том числе более 1000 участников из групп риска с противопоказаниями для обычных противооспенных вакцин, то есть ВИЧ-инфицированные и пациенты с атопическим дерматитом. IMVAMUNE доказала свою безопасность как для здоровых людей, так и для групп населения с нарушенной иммунной функцией. IMVAMUNE вызывает быструю и сильную vaccinia-специфичную иммунную реакцию, сопоставимую у здоровых объектов и людей из групп риска, и не уступает традиционным вакцинам типа Dryvax. Кроме того, одна или две вакцинации с помощью IMVAMUNE вызывают долговременный иммунитет. Это показывает, что IMVAMUNE является подходящим кандидатом для использования среди взрослого населения в целом, включая и тех, у кого есть противопоказания для применения обычных противооспенных вакцин. Поддержка в разработке IMVAMUNE осуществляется в соответствии с контрактами правительства США DMID N01-AI-30016, DMID N01-AI-40072, HHSO100200700034C, и в мае 2010 года первые 2 млн. доз из общего количества 20 млн. были доставлены на место хранения Стратегического государственного запаса США согласно Разрешению на использование в чрезвычайных ситуациях (EUA).

Новые данные об использовании противооспенной вакцины LC16m8 в Японии H. Yokote1 и I. Kurane2 1 2

Химио-серо-терапевтический научно-исследовательский институт, Кумамото, Япония Национальный институт инфекционных болезней, Toyama Shinjuku-ku, Япония

История вопроса До 1970-х годов было известно, что обычные противооспенные вакцины эффективны, но при этом вызывают ряд побочных неблагоприятных эффектов. В 1972 году Министерство здравоохранения и социального обеспечения Японии создало Комитет по исследованиям противооспенных вакцин (SRVC) для проведения исследований побочных неблагоприятных эффектов, связанных с вакцинацией против оспы. В рамках этого исследования свыше 10 тыс. детей были вакцинированы LC16m8; в результате побочные эффекты стали мягче по сравнению с теми, которые раньше наблюдались при применении штаммов обычных противооспенных вакцин. В результате в 1975 году LC16m8 была лицензирована в Японии. Учитывая растущую глобальную обеспокоенность в связи с возможностью применения вируса натуральной оспы в качестве оружия биотерроризма, фармацевтическая фирма Kaketsuken, по просьбе правительства Японии, возобновила изготовление вакцины LC16m8 для пополнения государственных запасов. Кроме того, была создана новая научно-исследовательская структура, Группа по исследованию противооспенных вакцин (SRVG), состоящая в основном из представителей Национального института инфекционных болезней (NIID), фирмы Kaketsuken и университета Keio, для проведения базовых и клинических исследований вакцины LC16m8. Клинические исследования Дети Всего вакцина LC16m8 была введена 9538 участникам. В течение одного месяца после вакцинации велось наблюдение за состоянием их здоровья и ежедневно измерялась температура тела. Результаты были следующими: – Показатель успешной прививки (сильная кожная реакция): 9075 объектов (95,2%) – повышенная температура: 663 (7%), вакцинальная экзема: 1 (0,01%) – аутоинокуляция: 9 (0,09%) – сопутствующая везикуляция: 28 (0,29%) – поствакцинальная экзантема: 8 (0,08%) – временные доброкачественные фебрильные судороги: 3 (0,03%). Взрослые Всего с помощью LC16m8 было вакцинировано 3221 взрослых участников из числа служащих сил самообороны Японии (включая 1529 взрослых, которые никогда ранее не были вакцинированы). Показатель успешной прививки в течение 10–14 дней после вакцинации составил 94,4% у тех взрослых, которые никогда ранее не были вакцинированы, и 86,6% у тех, кто ранее был вакцинирован. Сероконверсия или эффективная бустерная реакция с сильной кожной реакцией в течение 30 дней после вакцинации наблюдались у 90,2% взрослых, которые никогда ранее не были вакцинированы, и у 60,0% ранее вакцинированных взрослых. Был отмечен один случай аллергического дерматита и один случай экссудативной эритемы – реакции, предположительно связанные с вакцинацией. Оба случая были слабо выраженными и быстро прошли. Никаких серьезных побочных эффектов не наблюдалось.

Исследование результатов пострегистрационного наблюдения Исследование результатов пострегистрационного наблюдения проводилось в Японии с участием 268 здоровых взрослых (196 участников, никогда ранее не вакцинированных, и 71 ранее вакцинированный участник). Титр нейтрализующего антитела измерялся у 100 участников из групп ранее вакцинированных и никогда ранее не вакцинированных лиц. Никаких сообщений о серьезных побочных эффектах или смертельных случаях, вызванных вакцинацией, не было. Неблагоприятные реакции наблюдались у 58 лиц, их частота составила 21,6%. Серьезные неблагоприятные реакции включали лимфаденопатию (частота 19,4%), эритему в месте инъекции (5,2%) и повышение температуры (1,5%). При этом показатель "успешной" прививки оценивался по результатам оценки всех 268 участников и составил 94,4%. Вакцинация объектов с ослабленным иммунитетом Взрослые У двух объектов проявились признаки возможных тяжелых побочных эффектов, вызванных вакцинацией. У 26-летнего никогда ранее не вакцинированного мужчины на третий день после вакцинации появилась сыпь; она распространилась от конечностей до туловища. Он был госпитализирован на 20-й день после вакцинации. В результате биопсии кожи с проявлением сыпи был диагностирован аллергический дерматит. У 29-летнего ранее не вакцинированного мужчины на 10-й день после вакцинации появилась сыпь на туловище, которая была диагностирована как экссудативная эритема. Объекты с аллергией в анамнезе У одного из объектов с аллергией на пиразолон, указанной в истории болезни, наблюдалось увеличение лимфоузлов, которое исчезло в течение месяца. У объектов с экземой никаких побочных эффектов не наблюдалось.

Использование живого вируса натуральной оспы при разработке менее реактогенной вакцины: продолжение оценки вакцин "третьего" поколения Inger Damon, Kevin Karem, Victoria Olson, Scott K. Smith, Zachary Braden, Christine Hughes, Whitni Davidson Сотрудничающий центр ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций, Атланта, Джорджия, Соединенные Штаты Америки Дополнительные партнеры из других организаций: R. Lindsey Baden, Гарвардский университет Frances Newman, Sharon Frey, Robert Belshe, Университет Сент-Луис Bernard Moss, LVD/NIAID/NIH Поддержка: DMID/NIAID/NIH Значение для общественного здравоохранения Противооспенные вакцины, содержащие живые, полностью репликационные штаммы vaccinia вируса, с успехом использовались в качестве основной меры, применявшейся службами общественного здравоохранения при ликвидации натуральной оспы. В то же время отмечалась недопустимо высокая частота побочных эффектов, при этом некоторые из них представляли угрозу для жизни. Увеличение числа иммунодепрессивных состояний, отмечаемое в настоящее время во всем мире, повышает вероятность того, что широкое применение этих вакцин в качестве единственной формы вмешательства служб общественного здравоохранения приведет к повышению уровня нежелательных побочных эффектов. Следовательно, возникает необходимость в новой противооспенной вакцине с меньшими побочными эффектами – вакцине, которая будет как безопасной, так и эффективной. В отсутствие животных моделей с использованием вируса натуральной оспы единственной прямой демонстрацией эффективности вакцин, индуцирующих иммунную реакцию на вирус натуральной оспы, является тестирование реакции нейтрализации редукции бляшек (PRNT) на инфекционность in vitro. Действительная эффективность вакцин со сниженной реактогенностью, также известных как вакцины "третьего" поколения, в предупреждении заболевания оспой пока неясна. Роль нейтрализации вируса натуральной оспы как маркера эффективности вакцины, возможно, больше всего важна именно для оценки этих вакцин, так как они не вызывают типичных кожных поражений, являющихся признаком хорошо принявшейся прививки. Методы Вся работа с живым вирусом натуральной оспы проводится на 4-м уровне биобезопасности (BSL-4) в соответствии с мандатом Сотрудничающего центра ВОЗ по изучению натуральной оспы и других поксвирусных инфекций в Центрах контроля заболеваний и профилактики в Атланте, США. Проверка соблюдения правил безопасности и биозащиты проводится в лаборатории независимыми группами из США и ВОЗ на регулярной основе. Результаты Чтобы определить, насколько хорошо согласуются между собой тесты нейтрализации, были рассчитаны среднегеометрические титры антител (GMT) как для 60%, так и для 90% титров нейтрализации для каждой ортопоксвирусной мишени нейтрализации, используемой двумя центрами (SLU [vaccinia вирусы Dryvax и MVA] и ЦКЗП [variola virus]). Хотя при сравнении титров 60-процентной нейтрализации никаких существенных различий не было отмечено, в титрах 90-процентной нейтрализации были получены более убедительные результаты. При использовании парного t-критерия были отмечены статистически значимые различия между разными антигенными мишенями. Коэффициенты корреляции Спирмена выявили слабые

положительные корреляции для каждого целевого сравнения. Вирусные препараты содержали сходные соотношения геномов на бляшкообразующую единицу, это снижает вероятность того, что различия в качестве вирусных препаратов можно будет объяснить различиями в реакциях нейтрализации редукции бляшек (PRNT). Индивидуальная изменчивость была отмечена в общей кинетике противовирусной иммунной реакции, измерявшейся методом нейтрализации variola вируса Solaimen. У большинства участников в промежутке между первой и второй дозами MVA отмечено повышение титров, вызывающих 50-процентную нейтрализацию (PRNT) variola вируса. Хотя по истечении 6 месяцев после отбора участников для испытаний происходило незначительное снижение этого показателя у всех объектов, иммунизованных стандартной вакциной Dryvax, наблюдалось амнестическое повышение титров антител, вызывающих 50-процентную нейтрализацию variola вируса Solaimen (PRNT), как показала оценка сыворотки, проведенная приблизительно 30 дней спустя. Аналогичное четырехкратное увеличение титров было отмечено для обоих режимов вакцинации MVA. Когда оценивались совокупные данные, среднегеометрические титры (GMT), вызывавшие 50-процентную нейтрализацию variola вируса Solaimen (PRNT), в целом были эквиваленты в течение двух недель после каждого режима вакцинами MVA. Нейтрализующая способность увеличилась через один месяц после иммунизации Dryvax при обоих режимах вакцинации. Хотя через год после вакцинации GMT снизились, у тех, кому была введена вакцина Dryvax, GMT были выше, чем у тех, кому она не вводилась, независимо от способа введения. Обсуждение/Направления будущих исследований Исторически типичные кожные поражения считались показателями успешной вакцинации/предполагаемой защиты. Новые противооспенные вакцины "третьего поколения" не вызывают заметной дерматологической реакции. Повторный анализ данных от DMID 02-017 позволяет предположить, что значительные различия в конечных титрах наблюдаются при использовании различных вирусов в качестве субстратов для нейтрализации. Использование vaccinia вируса Dryvax в качестве нейтрализующего антигена занижает показатели, а использование vaccinia вируса MVA в качестве нейтрализующего антигена будет завышать нейтрализующий титр variola вируса Solaimen. Возможно, большее беспокойство вызывает очевидное отсутствие пропорциональности между реакцией отдельных участников. Приведенный здесь анализ, в сочетании с данными других испытаний вакцин, возможно, поможет выяснить, можно ли будет обнаружить соответствие между титрами нейтрализации с vaccinia вирусом в качестве мишени, и титрами, нейтрализующими вирус натуральной оспы. Кроме того, понимание иммунной реакции после вакцинации MVA играет решающую роль в выявлении аналога защиты. Baden et al. приблизительно определили корреляцию между самым высоким титром MVA-PRNT после второй дозы MVA и последующей аттенюацией кожных поражений при успешной вакцинации и продолжительностью "раздевания" вируса после введения Dryvax5. Мы планируем определить, существует ли такая же корреляция в отношении титров нейтрализации вируса натуральной оспы. Для этого нам понадобится провести оценку сыворотки оставшихся участников, поскольку число уже протестированных участников в этих двух группах не обеспечивает достаточной статистической мощности. Эти данные также помогут нам сравнить противовирусную иммунную реакцию при интрадермальном и подкожном способах введения вакцины. Предварительные наблюдения дают основания полагать, что интрадермальный способ введения вакцины может оказаться более удобным режимом дозирования вакцины. Кроме того, эти данные позволят нам более полно охарактеризовать кинетику противовирусной реакции.

Seaman MS et al. Effect of vaccination with modified vaccinia Ankara (ACAM3000) on subsequent challenge with Dryvax. Journal of Infectious Diseases. 2010, 201:1353-1360.

Запасы противооспенной вакцины в ВОЗ, обновленные данные Всемирная организация здравоохранения, Секретариат по вопросам оспы Резолюции ВАЗ: В своем заключительном докладе за 1979 год Глобальная комиссия по сертификации ликвидации оспы поставила вопрос о необходимости поддержания резервных запасов вакцины и сделала вывод, что со стороны ВОЗ и государственных органов власти было бы целесообразно обеспечить готовность к непредвиденным обстоятельствам. Комиссия рекомендовала, чтобы ВОЗ сохраняла запасы лиофилизированной противооспенной вакцины в количестве, достаточном для вакцинирования 200 млн. человек, а также запасы игл-вилок. В 1986 году глобальный резерв был постепенно снижен. В 2004 году Специальный комитет по ортопоксвирусным инфекциям рекомендовал, чтобы: – ВОЗ создал, контролировал и поддерживал стратегический запас противооспенных вакцин, хранящийся в Женеве. Этот стратегический запас должен быть доступен только для использования в чрезвычайных ситуациях. Объем запаса в Женеве должен составлять по крайней мере 5 млн. доз; – запас противооспенных вакцин следует создавать посредством принятия государствами-членами соответствующих обязательств. Размер гарантированного запаса должен быть по крайней мере эквивалентен объему, имевшемуся в ВОЗ на конец осуществления программы ликвидации оспы (200 млн. доз). В 2004 году рекомендации Специального комитета по ортопоксвирусным инфекциям были приняты к сведению, а в 2005 году утверждены Всемирной ассамблеей здравоохранения. Запасы вакцины ВОЗ создала стратегический запас противооспенных вакцин в размере 30,5 млн. доз, который хранится в Швейцарии. Девяносто восемь процентов (30 млн. доз) стратегического запаса противооспенных вакцин ВОЗ представляют собой вакцины второго поколения. Два процента (530 тыс. доз из Бельгии, Германии, Исламской республики Иран, Нидерландов и Российской Федерации) стратегического запаса ВОЗ являются вакцинами первого поколения. Кроме того, с помощью механизма виртуального хранилища четыре государства-члена взяли на себя обязательства предоставить ВОЗ еще 27 млн. доз в случае дополнительных потребностей: Франция, Германия, Новая Зеландия, США. ВОЗ согласовала со всеми четырьмя государствами-членами Стандартные операционные процедуры. По состоянию на 1 июля 2010 года ВОЗ создала запасы, составляющие в целом 57,5 млн. доз (стратегический запас + запасы в соответствии с обязательствами). Этого количества достаточно, чтобы справиться с различными сценариями событий. При этом в настоящее время близка к завершению работа по лицензированию вакцин третьего поколения, и ВОЗ надеется, что как только вакцины третьего поколения будут доступны, государства-члены помогут их включению в общие запасы.

Оцифровывание архивов Программы ликвидации оспы: результаты, перспективы и стратегия Marie Villemin Partow Всемирная организация здравоохранения История вопроса Проект оцифровывания архивов Программы ликвидации оспы был начат в июне 2009 года. К настоящему времени достигнуты положительные результаты, которые открывают большие возможности для будущей работы. Архивы Программы ликвидации оспы: Материальные фонды: Хранение: Размер: Период времени: Инструменты исследования: Оцифрованные фонды: Оцифровка: Формат: Размер: Хранение: архивы, штаб-квартира ВОЗ 122 погонных метра, 600 архивных коробок, 2000 папок 1948–1987 годы, в основном 1965–1980 годы архивы Программы ликвидации оспы, Руководство и инвентарная опись, тома I и II, 1982 и 1988 годы Colour, 1/1, 300 dpi, OCR TIFF and PDF/A 10 TB SATA2 discs on MD3000i, security copies on magnetic tracks LTO3 (EMC Networker)

Описание и файлы PDF/A для справок включены в ERMS Livelink Entreprise Server. Этапы выполнения проекта Анализ потребностей Оцифровка Внесение информации в базу данных Технико-экономическое обоснование Опытный образец Правила каталогизации Введение метаданных Результаты Основную проблему в данном проекте представлял объем обрабатываемой бумажной и электронной информации. Группа исполнителей воспользовалась опытом как внутренних, так и внешних специалистов. Это был первый широкомасштабный проект по оцифровке материалов, предпринятый Архивами ВОЗ. Поэтому учитывались более долговременные потребности, которые позволили бы сохранить и в будущем вновь использовать приобретенные знания и опыт для следующих проектов по оцифровке. Данный проект продемонстрировал важность качественного планирования и подробного анализа потребностей, а также значительную роль партнерства с внешними экспертами, например специалистами в технической области и ИТ. май – сентябрь 2009 года сентябрь 2009 года – август 2010 года 5 месяцев август 2009 года 1 месяц (январь – февраль 2010 года) 1 месяц (март – июнь 2010 года) 4 месяца (июль – октябрь 2010 года)

Основной объем работы составили:  сохранение бумажных копий материалов;  внесение сканированных архивных данных в специализированную базу данных с мощной поисковой системой. Обе цели были достигнуты. Стратегия После завершения этапа внесения материалов в базу данных и сохранения бумажных копий следующим шагом будет обеспечение доступности оцифрованных файлов для общественности. Сотрудники ВОЗ смогут получить доступ к этим файлам через специализированный сайт SharePoint в начале 2011 года. Все файлы касающихся оспы архивных материалов были оцифрованы в формате pdf с однозначно определяемым вводом в специализированную базу данных. В результате любой файл можно найти по запросу внешних или внутренних исследователей. Предполагается, что в конце концов все данные будут доступны повсюду в мире через специализированный веб-интерфейс.

Приложение 2. Повестка дня совещания 12-е совещание Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы, 17–18 ноября 2010 года Зал А, ВОЗ, Женева, Швейцария Повестка дня 17 ноября 2010 года 9 ч. 00 м. – 9 ч. 15м. Открытие – помощник Генерального директора по вопросам безопасности в области здравоохранения и окружающей среды Выборы председателя и докладчика Доклад Секретариата – Секретариат ВОЗ Обновленные данные о предложениях по исследованиям, представленных в ВОЗ и утвержденных научным подкомитетом – R. Drillien Обновленные данные о клонах вируса натуральной оспы, хранящихся в Национальном институте инфекционных заболеваний в Южной Африке – B. Swanepoel Резюме процесса обзора за 2011 год – Секретариат ВОЗ Представление шести глав "Научного обзора исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" (начало) 10 мин. + 5 мин. на обсуждение каждой главы Противооспенные вакцины – Antonio Alcami и Bernard Moss Лабораторная диагностика – Inger Damon, Hermann Meyer и Sergei Shchelkunov Геномика натуральной оспы – Grant McFadden, David Evans, Sergei Shchelkunov и Inger Damon Перерыв на чай/кофе Представление шести глав "Научного обзора исследований вируса натуральной оспы, 1999–2010 годы" (продолжение) 11 ч. 00 м. – 11 ч. 15 м. 11 ч. 15 м. – 11 ч. 30 м. 11 ч. 30 м. – 11 ч. 45 м. 11 ч. 45 м. – 12 ч. 15 м. 12 ч. 15 м. – 13 ч. 15 м. Состояние репозиториев ВОЗ-СЦ – Evgeniy Stavskiy, Christine Hughes, Inger K Damon Животные модели и патогенез – Peter B. Jahrling. Разработка противовирусных лекарств для лечения натуральной оспы – John W. Huggins и Nina Tikunova Обсуждение шести глав обзора Консультативного комитета по исследованию вируса натуральной оспы Обед

9 ч. 15 м. – 9 ч. 25 м. 9 ч. 25 м – 9 ч. 35 м.

9 ч. 35 м. – 9 ч. 50 м.

9 ч. 50 м. – 10 ч. 00 м.

10 ч. 00 м. – 10 ч. 15 м. 10 ч. 15 м. – 10 ч. 30 м. 10 ч. 30 м. – 10 ч. 45 м. 10 ч. 45 м. – 11 ч. 00 м.

13 ч. 30 м. – 14 ч. 00 м.

Представление доклада Консультативной группы независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы – Tania Sorrell и Rakesh Aggarwal Обсуждение доклада Консультативной группы независимых экспертов по обзору программы исследования вируса натуральной оспы Резюме обсуждения – R. Drillien/G.L. Smith Перерыв на чай/кофе Подгруппа Сети лабораторий диагностики оспы – J.-C. Piffaretti Использование живого вируса натуральной оспы для сохранения и воссоздания неинфекционных производных материалов натуральной оспы в помощь развитию диагностики – K. Karem and V. Olson Доклад за 2010 год о коллекции вируса натуральной оспы в Сотрудничающем центре ВОЗ "Вектор" в Российской Федерации – S. Shchelkunov Обсуждение Использование живого вируса натуральной оспы для оценки противовирусных средств борьбы с этим заболеванием – V. Olson Животные модели и патогенез с точки зрения общественного здравоохранения – P. Jahrling Новые данные о разработке ST-246 – D. Hruby Ход работы по разработке препарата СМХ001, активного в отношении вируса натуральной оспы и других дцДНК-содержащих вирусов – Randall Lanier Ход клинических исследований нерепликационной противооспенной вакцины третьего поколения IMVAMUNE – Lars Staahl Wegner Новые данные об использовании противооспенной вакцины LC16m8 в Японии – H. Yokote и I Kurane Использование живого вируса натуральной оспы при разработке менее реактогенной вакцины: продолжение оценки вакцин "третьего" поколения – I. Damon Культурная программа ОКОНЧАНИЕ 1-ГО ДНЯ РАБОТЫ

14 ч. 00 м. – 14 ч. 30 м.

14 ч. 30 м. – 15 ч. 00 м. 15 ч. 00 м. – 15 ч. 30 м. 15 ч. 30 м. – 16 ч. 00 м. 16 ч. 00 м. – 16 ч. 15 м.

16 ч. 15 м. – 16 ч. 30 м.

16 ч. 30 м. – 16 ч. 45 м. 16 ч. 45 м. – 17 ч. 00 м. 17 ч. 00 м. – 17 ч. 15 м. 17 ч. 15 м. – 17 ч. 30 м. 17 ч. 30 м. – 17 ч. 45 м.

17 ч. 45 м. – 18 ч. 00 м.

18 ч. 00 м. – 18 ч. 15 м. 18 ч. 15 м. – 18 ч. 30 м.

18 ч. 30 м. – 19 ч. 30 м.

12-е совещание Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы, 17–18 ноября 2010 года Зал А, ВОЗ, Женева, Швейцария 18 ноября 2010 года 9 ч. 00 м. – 9 ч. 15 м. 9 ч. 15 м. – 9 ч. 45 м. 9 ч. 45 м. – 10 ч. 15 м. 10 ч. 15 – 10 ч. 45 м. 10 ч. 45 м. – 11 ч. 15 м. 11 ч. 15 м. – 12 ч. 00 м. 12 ч. 00 м. – 13 ч. 30 м. 13 ч. 30 м. – 15 ч. 00 м. 15 ч. 00 м. – 15 ч. 30 м. 15 ч. 00 м. – 16 ч. 30 м. Запасы противооспенных вакцин ВОЗ, новые данные – Секретариат ВОЗ Оцифровка архивов Программы ликвидации оспы: результаты, перспективы и стратегия – M. Villemin Partow Общие прения и подготовка проекта доклада совещания Перерыв на чай/кофе Общие прения и подготовка проекта доклада совещания (продолжение) Обсуждение будущего Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы Обед Общие прения и подготовка проекта доклада совещания (продолжение) Перерыв на чай/кофе Заключительная дискуссия и окончательная доработка проекта доклада совещания

ЗАКРЫТИЕ СОВЕЩАНИЯ КОНСУЛЬТАТИВНОГО КОМИТЕТА ВОЗ ПО ИССЛЕДОВАНИЮ ВИРУСА НАТУРАЛЬНОЙ ОСПЫ

Приложение 3. Список участников 12-е совещание Консультативного комитета ВОЗ по исследованию вируса натуральной оспы, 17–18 ноября 2010 года Зал А, штаб-квартира ВОЗ, Женева

СПИСОК УЧАСТНИКОВ ВРЕМЕННЫЕ КОНСУЛЬТАНТЫ ЧЛЕНЫ КОНСУЛЬТАТИВНОГО КОМИТЕТА Д-р Isao Arita, председатель Агентства международного сотрудничества в области здравоохранения, 4–11 – 1 Higashi-Machi, город Кумамото, ЯПОНИЯ Д-р Robert Drillien, директор по исследованиям в INSERM, Институт генетики и молекулярной и клеточной биологии, Illkirch cedex, ФРАНЦИЯ Профессор Mariano Esteban, директор, отделение молекулярной и клеточной биологии, Национальный центр биотехнологии (CSIC), Мадрид, ИСПАНИЯ Д-р David Evans*, профессор и заведующий кафедрой медицинской микробиологии и иммунологии, Университет провинции Альберта, провинция Альберта, КАНАДА Д-р Ali Shan Khan, заместитель директора Национального центра зоонозных заболеваний, Центры по борьбе с трансмиссивными и кишечными заболеваниями и их профилактике, город Атланта, штат Джорджия, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Профессор J. Michael Lane, д-р медицины, магистр общественного здравоохранения, почетный профессор профилактической медицины, медицинский факультет Университета Эмори, город Атланта, штат Джорджия, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Willem Luytjes*, заведующий отделом исследования вакцин, руководитель проекта по разработке вакцины против респираторного синцитиального вируса (РСВ), руководитель исследований по гриппу, Нидерландский институт вакцин (NVI), отделение НИОКР, Vaccine Research AL, Билтховен, НИДЕРЛАНДЫ Д-р Akhilesh Mishra, директор Национального института вирусологии, Пуна, ИНДИЯ Д-р Jean-Vivien Mombouli*, директор, отделение исследований и производства, Браззавиль, КОНГО Профессор Peter M. Ndumbe*, микробиолог, Центр изучения и борьбы с инфекционными заболеваниями (CSCCD), факультет медицины и биомедицинских наук, Университет Яунде, КАМЕРУН Д-р Andreas Nitsche, высокопатогенные вирусы, Центр биологической безопасности, Институт имени Роберта Коха, Берлин, ГЕРМАНИЯ Д-р Gerald W. Parker, первый заместитель помощника министра, Секретариат помощника министра по вопросам готовности и ответным мерам, Министерство здравоохранения и социального обеспечения, Вашингтон, О.К., СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Профессор Pilaipan Puthavathana, отделение микробиологии, медицинский факультет на базе госпиталя Сирирай, Университет Махидол, Бангкок, ТАИЛАНД 52

Д-р Tony Robinson, консультант-вирусолог, Научно-промышленная исследовательская организация Содружества Наций (НПИОСН), Устойчивые экосистемы, Мишелаго, штат Новый Южный Уэльс, АВСТРАЛИЯ Д-р Li Ruan, руководитель и профессор отделения Биотехнологического центра по чрезвычайным ситуациям, связанным с вирусными заболеваниями, Министерство здравоохранения, Xunawu Qu, Пекин, КИТАЙ Профессор Geoffrey L. Smith, отделение вирусологии, медицинский факультет Лондонского имперского колледжа, кампус Святой Марии, площадь Норфолк, Лондон, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО Д-р Evgeny Stavskiy*, заместитель генерального директора по научно-исследовательской работе, Федеральный государственный научно-исследовательский институт, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Кольцово, Новосибирская область, РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ Профессор Robert Swanepoel, руководитель отделения особых патогенных организмов, Национальный институт вирусологии, Йоханнесбург, ЮЖНАЯ АФРИКА Профессор Muyembe Tamfum, директор, Национальный институт биомедицинских исследований (INRB), Киншаса, ДЕМОКРАТИЧЕСКАЯ РЕСПУБЛИКА КОНГО Д-р Prasert Thongcharoen*, сектор вирусологии, отделение микробиологии, медицинский факультет на базе госпиталя Сирирай, Университет Махидол, Бангкок, ТАИЛАНД Д-р Oyewale Tomori, региональный вирусолог, Университет Спасителя, Икеджа, штат Лагос, НИГЕРИЯ Д-р Henda Triki, руководитель лаборатории пастеровский институт, город Тунис, ТУНИС клинической вирусологии, Тунисский

Д-р Kummuan Ungshusak*, директор бюро эпидемиологии, Министерство здравоохранения, Нонтабури, ТАИЛАНД

КОНСУЛЬТАНТЫ КОМИТЕТА Профессор Rakesh Aggarwal, отделение гастроэнтерологии, Институт квалификации в области медицинских наук им. Санджай Ганди, Лакнау, ИНДИЯ повышения

Д-р Xu Aiqiang*, Шаньдунский центр профилактики заболеваний, провинция Шаньдун, КИТАЙ Д-р Antonio Alcami, профессор-исследователь, Центр молекулярной биотехнологии Северо Очоа (CSIC-UAM), Campus de Cantoblanco, Мадрид, ИСПАНИЯ Д-р Kalyan Banerjee, вице-президент Ассоциации содействия развитию наук, штат Махараштра, Пуна, ИНДИЯ Д-р Zhenqiang Bi, директор Шаньдунского центра контроля и профилактики заболеваний, город Цзинань, провинция Шаньдун, КИТАЙ Д-р Peter D. E. Biggins, Руководитель международных исследований, DERA-CBD (Управление исследований и оценок МО – химическая/биологическая защита), системы CBY, Портон-Даун, Salisbury Wilshire SP, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО Д-р Luciana L. Borio, Противооспенные вакцины и терапевтические средства, Отделение защитных мер от химического, биологического, радиологического и ядерного оружия (CBRN), 53

Министерство здравоохранения и социального обеспечения, Силвер Спринг, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Jacob Thorup Cohn, вице-президент, отдел по связям с правительством, Bavarian Nordic A/S, Kvistagard, ДАНИЯ Д-р Clarissa Damaso, руководитель лаборатории вирусов Института биофизики, Федеральный университет Рио-де-Жанейро, Рио-де-Жанейро, БРАЗИЛИЯ Д-р Inger K. Damon, Руководитель секции поксвирусов и отделения рабической инфекции, DVRD/NCZUED/CCID (Центр инфекционных заболеваний), Центры контроля заболеваний и профилактики (ЦКЗП), Атланта, СОЕДНИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Falk Ehmann, руководитель научно-исследовательского отдела, Отдел оценки лекарств для применения человеком на предмет их резистентности к патогенным факторам, Европейское агентство по лекарственным средствам (ЕМЕА), Лондон, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО Д-р Olivier Engler, Spiez Laboratory, Groupement de l'armement, Шпиц, ШВЕЙЦАРИЯ Профессор Daniel Garin, руководитель вирусологической лаборатории, CRSSA Emile Parde, Гренобль, ФРАНЦИЯ Д-р Dennis E. Hruby, старший научный сотрудник, SIGA Technologies Inc., Корвалис, штат Орегон, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Профессор Zhihong Hu*, Уханьский институт вирусологии, Китайская академия наук, Учан, Ухань, провинция Хубей, КИТАЙ Д-р John Huggins, руководитель отдела противовирусных терапевтических средств, отделение вирусологии, Институт медицинских исследований инфекционных заболеваний армии Соединенных Штатов (USAMRIID), Форт Детрик, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Peter Jahrling, руководитель Национального центра комплексных исследований, город Бетесда, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Jørgen de Jonge, старший научный сотрудник по исследованию вакцин, Нидерландский институт вакцин (NVI), Билтховен, НИДЕРЛАНДЫ Д-р Kevin Karem, исполняющий обязанности руководителя группы по исследованию поксвирусов, Центры контроля заболеваний и профилактики (ЦКЗП), Атланта, штат Джорджия, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Randall Lanier, старший управляющий отдела вирусологии, руководитель отдела/помощник руководителя, Chimerix Inc., город Дарем, штат Северная Каролина, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р James LeDuc, профессор микробиологии и иммунологии, Техасский медицинский филиал Гальвестонской национальной лаборатории, округ Гальвестон, штат Техас, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Boris D. Lushniak*, помощник комиссара по контртеррористической деятельности, Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов (USFDA), город Роквил, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Jean-Claude Manuguerra, руководитель лаборатории по экстренному реагированию на биологические угрозы, Институт Пастера, молекулярно-генетический анализ респираторных вирусов, Париж, ФРАНЦИЯ

Д-р Grant McFadden, факультет молекулярной генетики и микробиологии, Медицинский колледж Университета Флориды, город Гейнсвил, штат Флорида, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Michael Merchlinsky*, Отделение защитных мер от химического, биологического, радиологического и ядерного оружия (CBRN) Управления перспективных биомедицинских исследований и разработок (BARDA), Секретариат помощника министра по вопросам готовности и ответным мерам (ASPR), Министерство здравоохранения и социального обеспечения США, Вашингтон, О.К., СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Hermann Meyer, руководитель лаборатории BSL-3, Институт микробиологии бундесвера, Lohhof, ГЕРМАНИЯ Д-р Aubrey K. Miller*, главный медицинский специалист отдела по борьбе с терроризмом и возникающими угрозами; Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов, город Роквил, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Shigeru Morikawa, руководитель лаборатории особых патогенных микроорганизмов, отделение вирусологии 1, Национальный институт инфекционных заболеваний, Токио, ЯПОНИЯ Д-р Darcey Moore*, руководитель отдела/помощник руководителя, Chimerix Inc., город Дарем, штат Северная Каролина, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Bernard Moss, исследователь, Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний, Национальные медицинские институты, город Бетесда, штат Мэриленд, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Dawn Myscofski*, руководитель отделения по противооспенным вакцинам и терапевтическим средствам, Отделение защитных мер от химического, биологического, радиологического и ядерного оружия (CBRN), Министерство здравоохранения и социального обеспечения США, Вашингтон, О.К., СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Victoria Olson, микробиолог-исследователь, Программа по поксвирусам, отделение заболеваний, вызванных вирусами и риккетсиями, Национальный центр инфекционных заболеваний, Центры контроля заболеваний и профилактики, Атланта, штат Джорджия, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ Д-р Jean-Claude Piffaretti, Interlifescience, Massagono, ШВЕЙЦАРИЯ Г-н Vladimir Ryabenko*, главный специалист, отдел координации и планирования НИОКР, Федеральный государственный научно-исследовательский институт, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ Профессор Sergei Shchelkunov, руководитель отдела молекулярной биологии геномов, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор", Кольцово, Новосибирская область, РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ Профессор Tania C. Sorrell, директор центра инфекционных заболеваний и микробиологии Сиднейского университета, город Сидней, Австралия Д-р David Ulaeto, научный руководитель по биомедицинским наукам, DERA-CBD (Управление исследований и оценок МО – химическая/биологическая защита), Солсбери, Уилтшир, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО Д-р Hiroyuki Yokote, отдел нормативно-правового регулирования, Институт химических серологических терапевтических исследований, Кумамото, ЯПОНИЯ

НАБЛЮДАТЕЛИ Д-р Ichiro Kurane, заместитель генерального инфекционных болезней (NIID), Токио, ЯПОНИЯ директора, Национальный институт

Д-р Lars S. Wegner, директор по маркетингу медицинской продукции, Bavarian Nordic, Solford Stand, ДАНИЯ

ВСЕМИРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕГИОНАЛЬНЫЕ БЮРО Д-р Francis Kasolo, руководитель программы, Комплексная программа контроля заболеваний, представитель Регионального бюро для стран Африки Представитель Регионального бюро для стран Америки* Д-р Hassan El Bushra, представитель Регионального бюро для стран Восточного Средиземноморья Д-р Eugene Gavrilin, координатор лабораторной сети по инфекционным заболеваниям, представитель Европейского регионального бюро Д-р Kasai Takeshi, представитель Регионального бюро для стран Юго-Восточной Азии* Представитель Регионального бюро для стран Западной части Тихого океана* ШТАБ-КВАРТИРА Д-р Dr Keiji Fukuda, помощник здравоохранения и окружающая среда Генерального директора/Безопасность в области

Д-р Dr Mike Ryan, директор, Безопасность в области здравоохранения и окружающая среда/ Глобальное предупреждение и ответные действия Д-р Jean-Marie Okwo-Bele, директор, Здоровье в семье и общине/Департамент по иммунизации, вакцинам и биологическим препаратам* Д-р Joachim M. Hombach, директор, Здоровье в семье и общине/Глобальное предупреждение и ответные действия/Инициатива в области исследования вакцин (врем.)* Д-р David Wood, координатор, Здоровье в семье и общине/Департамент по иммунизации, вакцинам и биологическим препаратам/группа "Качество, безопасность, стандарты"* Д-р Pierre Formenty, координатор, Безопасность в области здравоохранения и окружающая среда/Глобальное предупреждение и ответные действия/Снижение биориска в отношении опасных патогенов (врем.) Г-н Jean-Christophe Azé, руководитель группы, Безопасность в области здравоохранения и окружающая среда/Глобальное предупреждение и ответные действия/Операции оповещения и реагирования/LOG* Г-жа Marie Sarah Villemin Partow, референт, Поддержка служб иммунизации/RAS Д-р Faith McLellan, Безопасность в области здравоохранения и окружающая среда/ММСП, (докладчик) * Не смогли присутствовать 56

Informations clés

Organisation Organisation mondiale de la santé (OMS)

Type de document Technical Documents

Date d'adoption 31 décembre 2010

Source Organisation mondiale de la santé