Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: interim guidance, 11 September 2020

-1- Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays Interim guidance 11 September 2020 Background Since the beginning of the COVID-19 pandemic, laboratories have been using nucleic acid amplification tests (NAATs), such as real time reverse transcription polymerase chain reaction (rRT-PCR) assays, to detect SARS-CoV-2, the virus that causes the disease. In many countries, access to this form of testing has been challenging. The search is on to develop reliable but less expensive and faster diagnostic tests that detect antigens specific for SARS-CoV-2 infection. Antigen-detection diagnostic tests are designed to directly detect SARS- CoV-2 proteins produced by replicating virus in respiratory secretions and have been developed as both laboratory-based tests, and for near-patient use, so- called rapid diagnostic tests, or RDTs. The diagnostic development landscape is dynamic, with nearly a hundred companies developing or manufacturing rapid tests for SARS-CoV-2 antigen detection (1). This document offers advice on the potential role of antigen-detecting RDTs (Ag-RDT) in the diagnosis of COVID-19 and the need for careful test selection. The information on Ag-RDTs in this document updates guidance that was included in the Scientific Brief entitled WHO Advice on use of point of care immunodiagnostics test for COVID-19 published on 8 April 2020. Guidance on the use of Ag-RDTs will be regularly updated as new evidence becomes available. Most Ag-RDTs for COVID-19 use a sandwich immunodetection method employing a simple-to-use lateral flow test format commonly employed for HIV, malaria and influenza testing. Ag-RDTs are usually comprised of a plastic cassette with sample and buffer wells, a nitrocellulose matrix strip, with a test line with bound antibody specific for conjugated target antigen- antibody complexes and a control line with bound antibody specific for conjugated-antibody. In the case of SARS-CoV-2 RDTs the target analyte is often the virus’ nucleocapsid protein, preferred because of its relative abundance. Typically, all materials that are required to perform the test, including sample collection materials, are provided in the commercial kit, with the exception of a timer. After collecting the respiratory specimen and applying it to the test strip, results are read by the operator within 10 to 30 minutes with or without the aid of a reader instrument. The use of a reader standardizes interpretation of test results, reducing variance in assay interpretation by different operators, but requires ancillary equipment. Most of the currently manufactured tests require nasal or nasopharyngeal swab samples, but companies are carrying out studies to assess the performance of their tests using alternative sample types such as saliva, oral fluid and sample collection systems to potentially expand options for use and to facilitate safe and efficient testing. Generally, the ease-of-use and rapid turnaround time of Ag-RDTs offers the potential to expand access to testing and decrease delays in diagnosis by shifting to decentralized testing of patients with early symptoms. The trade-off for simplicity of operation of Ag-RDTs is a decrease in sensitivity compared to NAAT. Very few of the SARS- CoV-2 Ag-RDTs have undergone stringent regulatory review. Only four tests have received United States Food and Drug Administration (FDA) Emergency Use Authorization (EUA), and another two tests have been approved by Japan’s Pharmaceutical and Medical Devices Agency. Only three companies have submitted documents toward WHO’s Emergency Use Listing (EUL) procedure (2, 3). Data on the sensitivity and specificity of currently available Ag-RDTs for SARS-CoV-2 have been derived from studies that vary in design and in the test brands being evaluated. They have shown that sensitivity compared to NAAT in samples from upper respiratory tract (nasal or nasopharyngeal swabs) appears to be highly variable, ranging from 0-94% (4-13) but specificity is consistently reported to be high (>97%). Although more evidence is needed on real-world performance and operational aspects, Ag-RDTs are most likely to perform well in patients with high viral loads (Ct values ≤25 or >106 genomic virus copies/mL) which usually appear in the pre-symptomatic (1-3 days before symptom onset) and early symptomatic phases of the illness (within the first 5-7 days of illness) (14, 15, 21). This offers the opportunity for early diagnosis and interruption of transmission through targeted isolation This is an earlier version of an interim guidance which has since been updated. The current version can be obtained at: https://www.who.int/publications/i/item/antigen-detection-in-the-diagnosis-of-sars-cov-2infection-using-rapid-immunoassays. The current version of all WHO information products and publications is authoritative. Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -2- and cohorting of the most infectious cases and their close contacts (16). Patients who present more than 5-7 days after the onset of symptoms are more likely to have lower viral loads, and the likelihood of false negative results with Ag-RDTs is higher. Despite these expected limitations in performance, if correctly performed and interpreted, Ag-RDTs could play a significant role in guiding patient management, public health decision making and in surveillance of COVID-19. At minimum, Ag-RDTs would need to correctly identify significantly more cases than they would miss (sensitivity ≥80%) and have very high specificity (≥97-100%). Based on these performance parameters, this interim guidance proposes several potential roles for Ag-RDT and offers general recommendations for selection of tests and key considerations for their implementation. General recommendations for the use of SARS-CoV-2 Ag-RDTs 1. SARS-CoV-2 Ag-RDTs that meet the minimum performance requirements of ≥80% sensitivity and ≥97% specificity compared to a NAAT reference assay1 can be used to diagnose SARS-CoV-2 infection in a range of settings where NAAT is unavailable or where prolonged turnaround times preclude clinical utility. To optimize performance, testing with Ag-RDTs should be conducted by trained operators in strict accordance with the manufacturer’s instructions and within the first 5-7 days following the onset of symptoms. 2. Appropriate scenarios for use of COVID-19 Ag-RDTs include the following: i) To respond to suspected outbreaks of COVID-19 in remote settings, institutions and semi-closed communities where NAAT is not immediately available. Positive Ag-RDT results from multiple suspects is highly suggestive of a COVID-19 outbreak and would allow for early implementation of infection control measures. Where possible, all samples giving positive Ag-RDT results (or at least a subset) should be transported to laboratories with NAAT capability for confirmatory testing. ii) To support outbreak investigations (e.g. in closed or semi-closed groups including schools, care-homes, cruise ships, prisons, work-places and dormitories, etc.) In NAAT-confirmed COVID-19 outbreaks, Ag- RDTs could be used to screen at-risk individuals and rapidly isolate positive cases (and initiate other 1 Based on well-designed and executed evaluations in representative populations 2 Risk of false positive results is high in low prevalence settings; positive predictive value is 78% if prevalence is 10% and contact tracing efforts) and prioritize sample collection from RDT-negative individuals for NAAT. iii) To monitor trends in disease incidence in communities, and particularly among essential workers and health workers during outbreaks or in regions of widespread community transmission where the positive predictive value and negative predictive value of an Ag-RDT result is sufficient to enable effective infection control.2 iv) Where there is widespread community transmission, RDTs may be used for early detection and isolation of positive cases in health facilities, COVID-19 testing centres/sites, care homes, prisons, schools, front-line and health-care workers and for contact tracing. Note that the safe management of patients with RDT-negative samples will depend on the RDT performance and the community prevalence of COVID-19 (see annex 1). A negative Ag-RDT result cannot completely exclude an active COVID-19 infection, and, therefore, repeat testing or preferably confirmatory testing (NAAT) should be performed whenever possible (Figure 1), particularly in symptomatic patients. v) Testing of asymptomatic contacts of cases may be considered even if the Ag-RDT is not specifically authorized for this use, since asymptomatic cases have been demonstrated to have viral loads similar to symptomatic cases (17), though in that situation, a negative Ag-RDT should not remove a contact from quarantine requirements. 3. For initial introduction of Ag-RDTs into clinical use, countries should consider selecting some settings where NAAT confirmatory testing is currently available so that staff can gain confidence in the assays, confirm performance of the selected RDT, and troubleshoot any implementation issues encountered. Wherever NAAT will be used for confirmatory testing in patients screened using an Ag-RDT, the samples for the two tests should be collected at roughly the same time, or at most within a period of less than 2 days. 4. In situations where confirmatory testing with NAAT is not feasible, any indications that results may be incorrect should raise suspicions about validity. Examples would include patients who are test-positive but have a clinical syndrome not consistent with COVID-19, or patients with a positive test detected in a low-prevalence setting (where the predictive value of a positive test is low and the risk of false-positives high). minimum performance criteria met; increases to 93% if prevalence is 20% Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -3- Other warning signals might include patients who are test-negative but have a classical syndrome, are close contacts of a case or are tested in a high-prevalence setting. In such situations, considerations should be given to repeating the test, especially if there is also any uncertainty about the visual result (faint bands) or adequacy of sampling. 5. Use of Ag-RDTs is not recommended in settings or populations with low expected prevalence of disease (e.g. screening at points of entry, blood donation, elective surgery), especially where confirmatory testing by NAAT is not readily available. Such use will not be possible until there are more data from high-quality studies confirming high specificity (>99%) of one or more of the commercialized Ag-RDT test kits. Selection of tests for procurement and implementation: Though there are a limited number of SARS-CoV-2 Ag- RDTs currently available commercially, multiple products, of variable quality and performance, are expected to enter the marketplace soon. As noted in the Introduction, most commercial SARS-CoV-2 Ag-RDTs use a conventional lateral flow format with colloidal gold or other visible dye as indicators. Several systems, including some with US FDA approval under EUA, use alternative indicators that may lead to enhanced sensitivity but require a specific device to read and interpret the test results. There are a number of factors to consider when selecting Ag-RDTs for use in the scenarios presented above, in the recommendations section. These include: 1. Quality of available data used to validate the test. The source of data should be considered (independent vs. internal/corporate sponsorship) as should study design (e.g. the reference standard used, the type of specimen, the delay between sample collection and test execution and the number of days since symptom onset), the number of subjects enrolled, and the setting of enrolment. As the concentration of virus in specimens is the greatest predictor of test sensitivity, the selection of patients and study sites is of critical importance. Prospective clinical studies are generally superior to retrospective studies. Data from studies independent of corporate sponsorship have particular value if the studies are well- performed. 2. Reported performance. Data demonstrating the performance of an RDT should be carefully reviewed before procurement is initiated. Given the relatively low prevalence of active SARS- CoV-2 infections even in settings with community transmission, high specificity (minimum >97% and ideally >99%) is necessary to avoid many false-positive results. Sensitivity will depend on the status of patients studied (degree of illness, days since onset of symptoms, etc.) as well as the product quality, but should reach a minimum of ≥80%. A useful assessment is the sensitivity of the test in patients with a rRT-PCR cycle threshold (Ct) below a specific value (e.g. 28 or 30), because the virus is expected to be abundant in respiratory samples when the test is in this range, and test sensitivity correspondingly high (exceeding 90% in some published and unpublished studies) (4,11). It is important to note, however, that Ct values at a given input concentration of target RNA vary between rRT- PCR assays and are not strictly quantitative. 3. Manufacturing quality and regulatory status. Tests should be procured from manufacturers who work under a quality management system (e.g. ISO 13485) and with at least local regulatory approval or right of free sale granted by the country of manufacture. RDTs, as all in vitro diagnostics intended for clinical use, should undergo a rigorous and transparent regulatory review. Approval or authorization by a stringent regulatory body and/or Emergency Use Listing by WHO should be available at the time of procurement. 4. Manufacturing capacity and further evidence of quality. Many new companies without a history of success in the manufacture, sales and support of in vitro diagnostics are entering the market with SARS-CoV-2 Ag- RDTs. Procurers should consider the range of other products offered by the company (especially lateral flow tests), what regulatory approvals they have for non-emergency diagnostic products, and their manufacturing and post-market surveillance capacity. Many companies are able to manufacture high-quality prototypes or completed tests at low volume but may have difficulty when scaling up manufacturing to meet global needs. 5. Distribution and technical support. Consideration should be given to a supplier’s distribution and product support capacity, especially in low and middle-income countries. This is particularly true for tests that require additional equipment like readers. 6. Shipping and storage conditions and shelf- life. The capacity to withstand temperature stress and having an extended shelf-life are critical to the ease-of-use of Ag-RDTs. With new products, shelf-life must be estimated based on accelerated stability studies (usually at higher temperatures), but target shelf-life should be at least 12-18 months at 30°C and Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -4- ideally 40°C. A cold chain requirement for shipping and/or storage would significantly increase the cost and complexity of procurement and distribution. 7. Specimen collection requirements. SARS- CoV-2 Ag-RDTs vary in their requirements for specimen type, number of processing steps, need for accurate timing, instrumentation and interpretation of results, which will influence the extent of training and supervision required. For this reason, an ease-of-use assessment is an important consideration along with test performance. 8. Contents of test kit. Standard kit contents do not necessarily include everything required to perform and quality control the test, and this must be verified prior to purchase. Several commercially available Ag-RDTs for SARS- CoV-2 utilize a reading instrument. 9. The cost of the test. The cost of tests will vary according to the test and the volume to be purchased. In general, they should be less expensive than PCR tests. The cost of transportation, import tariffs, storage, end-user training (and supervision) and post-purchase quality control testing activities required to support quality implementation of RDTs must also be considered. 10. Availability, completeness and clarity of instructions for use. These should be clear, contain illustrations and be user-friendly for a non-laboratory specialist. Implementation considerations: 1. Even though Ag-RDTs may be considerably easier to perform than NAAT, they still require that supplier-recommended procedures be strictly followed with due attention to documentation, execution of time-dependent or volume-dependent steps, storage conditions and shelf-life and equipment and stock management. All test operators must have training in sample collection, relevant biosafety, performance of the test and interpretation and reporting of results as well as in waste management. Quality control measures also need to be put in place. 2. Post-market surveillance, with regulatory oversight, is critical to discover defects in product performance and is an important requirement for the manufacturer. The health system should ensure there is monitoring and evaluation of COVID-19 diagnostic testing activities and clear mechanisms for reporting problems (18). 3. Use of instrumented detection systems demands additional training requirements (instrument use, calibration as required, service requirements, operating conditions) and sufficient infrastructure, such as a reliable source of electricity. 4. Sample collection is one of the most critical factors affecting performance of Ag-RDTs. Instructions for use should be carefully followed, and any staff collecting samples should be trained in the methodology. 5. Each of these tests has a specifically indicated method for sample processing after collection. Instructions should be followed precisely, and no alternative reagents used (e.g. water or other liquid instead of dilution/mixing buffer). 6. Biosafety requirements for operators must be in place – personal protective equipment, biohazard waste bag and good ventilation are essential (19). Methods This Interim Guidance document outlines potential use and non-use case scenarios for SARS-CoV-2 antigen- detecting RDTs based on minimum performance criteria. Minimum performance requirements for Ag- RDTs were established through a formal process of target product profile (TPPs) development for priority SARS-CoV-2 diagnostics (20). They were informed by an evolving understanding of the temporal dynamics of viral shedding and transmissibility and the anticipated benefits of earlier and expanded testing. PubMed and medRxiv databases were searched for both peer- reviewed and published, pre-print reports of test accuracy of point of care/near patient rapid antigen- detecting SARS-CoV-2 tests. One systematic review of diagnostic test accuracy was identified (21). Additionally, unpublished independent reports on the performance of two SARS-CoV-2 Ag-RDTs were shared confidentially with WHO. Interim guidance was reviewed by members of the WHO Reference Laboratory Network for COVID-19 and members of the WHO COVID-19 Diagnostics Target Product Profile Review Group, as well as other outside experts. We recognize the shortcomings of the available evidence. They include small sample sizes, skewed sampling based on expected presence or absence of SARS-CoV-2 infection, and lack of details in studies aimed at validating tests regarding symptom status or time from symptom onset. In addition, the lack of data from asymptomatic cases, use of tests outside of manufacturers’ instructions for use and performance of tests in laboratories as opposed to point of care/near- patient settings limit the generalizability of recommendations. Nonetheless, it was concluded that some Ag-RDTs are likely to at least meet and likely exceed minimum performance requirements in the early Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -5- phase of the illness (within the first 5-7 days, when viral loads and risk of transmission are highest). Expanding testing to potentially interrupt transmission through the use of antigen RDTs is considered more beneficial than not testing or performing tests that fail to inform infection control measures due to very long turnaround times or the risk of false negatives in patients with low viral loads. Test performance The performance of an Ag-RDT is determined by the sensitivity and specificity of the test to detect a SARS- CoV-2 infection compared with a reference standard, NAAT (generally rRT-PCR). Sensitivity is the percentage of cases positive by a NAAT reference standard that are detected as positive by the Ag-RDT under evaluation. Specificity is the percentage of cases negative by a NAAT reference standard that are detected as negative by the Ag-RDT under evaluation. The prevalence of disease in the community being tested strongly affects the predictive value of a positive or negative result (see Annex 1). Thus, the clinical value of a positive or negative test result will depend on what action is taken on the basis of the test result when interpreted in the context of local prevalence. In general, the higher the prevalence of SARS-COv-2 infection in the tested population, the more likely a person who tests positive is to have COVID-19. The lower the prevalence in the community, the more likely a test-negative patient is not to have the disease, see Annex 1. For example, when the prevalence of active SARS-CoV-2 infection in a community is 1%, even a test that is 99% specific would have a poor positive predictive value, since one-half of all positive results would be false positive. Roles for antigen detecting RDTs for case management and surveillance for COVID-19 Use of Ag-RDTs can be considered in countries or areas that are experiencing widespread community transmission, where the health system may be over- burdened and where it may not be possible to test all or any suspect cases by NAAT. As with all diagnostic tests, but especially those with sub-optimal sensitivity and/or specificity, to correctly interpret and act on the results of the RDT, the prevalence of disease (according to the reference standard) must be estimated based on surveillance, since this determines the positive and negative predictive values (PPV and NPV, respectively) of the RDTs (Annex 1). The proposed process for utilizing an Ag-RDT for COVID-19 case management when there is widespread community transmission is shown in Figure 1. In such a setting, the pre-test probability of COVID-19 disease (the likelihood that the patient has COVID-19 before their results are known, based on epidemiologic and clinical factors) is relatively high, and positive test results have a high predictive value. Likewise, in a setting of community transmission, the predictive value of a negative RDT result may be low, even when there are strong epidemiologic or clinical indicators of COVID-19 exposure or disease. NPV- negative predictive value; PPV – positive predictive value Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -6- Table 1. Situations where SARS-CoV-2 Ag-RDTs should not be used, based on currently available information Do not use SARS-CoV-2 Ag-RDTs: Explanation In individuals without symptoms unless the person is a contact of a confirmed case Pre-test probability (the likelihood, before testing, that the patient has the disease based on epidemiology, case contact, clinical findings) is low. Where there are zero or only sporadic cases Ag-RDTs are not recommended for routine surveillance purposes or case management in this setting. Positive test results would likely be false positives. Molecular testing is preferred. Appropriate biosafety and infection prevention and control measures (IPC) are lacking To safeguard health workers, respiratory sample collection for any test from patients with suspected COVID-19 requires that operators wear gloves, gown, mask and face shield or goggles (19, 22, 23). Management of the patient does not change based on the result of the test If test-positive and test-negative patients will be treated the same way because of unknown or low PPV and/or NPV, then there is no benefit to testing. For airport or border screening at points of entry Prevalence of COVID-19 will be highly variable among travellers, and it is therefore not possible to determine PPV and NPV of test results. Positive and negative tests would require confirmatory testing to increase PPV and NPV for decision making. In screening prior to blood donation A positive RDT result would not necessarily correlate with presence of viremia. Asymptomatic blood donors do not meet the definition of a suspect case (24). Factors influencing test performance As mentioned above, many factors may affect the performance of antigen-detecting RDTs. Consequently, findings in clinical settings may be variable. The following should be taken into account: • patient factors such as the time from illness onset and immune status • sample type (upper or lower respiratory tract), quality and processing, including storage conditions and dilution in viral transport medium • viral factors including the concentration and duration of viral antigen shedding and structural variation in the target antigen, cross reactivity with other viruses • specific protein target, as some antigens are produced in higher concentrations than others, e.g. nucleocapsid versus spike proteins • product design or quality issues including: - insufficient antibody quantity or affinity for the target antigen(s) - poor packaging and exposure to heat and humidity during improper transport and/or storage, which can degrade antibodies in the test - unclear or incorrect instructions that can affect test performance • inadequate training or competency of the test operator, which may lead to error in preparing the antigen-detecting RDT, performing the test or interpreting the result, with erroneous conclusions. Future updates and product specific recommendations WHO is working closely with groups evaluating the performance and operational characteristics of commercialized SARS-CoV-2 antigen detecting RDTs to systematically compile the evidence as it emerges and coordinate updates. Currently, there is insufficient evidence on performance and operational use to recommend specific commercial products. Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -7- References 1. Foundation for Innovative New Diagnostics. SARS- CoV-2 Diagnostic Pipeline 2020 [Available from: https://www.finddx.org/covid-19/pipeline/. 2. U.S. Food & Drug Administration. In Vitro Diagnostics EUAs 2020 [Available from: https://www.fda.gov/medical- devices/coronavirus-disease-2019-covid-19-emergency-use- authorizations-medical-devices/vitro-diagnostics-euas. 3. Agency PaMD. PMDA’s Efforts to Combat COVID-19 2020 [Available from: https://www.pmda.go.jp/english/about-pmda/0002.html. 4. Porte L, Legarraga P, Vollrath V, Aguilera X, Munita JM, Araos R, et al. Evaluation of novel antigen-based rapid detection test for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. Int J Infect Dis. 2020:S1201- 9712(20)30405-7. 5. Diao B, Wen K, Chen J, Liu Y, Yuan Z, Han C, et al. Diagnosis of Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection by Detection of Nucleocapsid Protein. medRxiv. 2020:2020.03.07.20032524. 6. Lambert-Niclot S, Cuffel A, Le Pape S, Vauloup- Fellous C, Morand-Joubert L, Roque-Afonso AM, et al. Evaluation of a Rapid Diagnostic Assay for Detection of SARS-CoV-2 Antigen in Nasopharyngeal Swabs. J Clin Microbiol. 2020;58(8). 7. Mertens P, De Vos N, Martiny D, Jassoy C, Mirazimi A, Cuypers L, et al. Development and Potential Usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip Diagnostic Assay in a Pandemic Context. Front Med (Lausanne). 2020;7:225-. 8. Blairon L, Mokrane S, Wilmet A, Dessilly G, Kabamba-Mukadi B, Beukinga I, et al. Large-scale, molecular and serological SARS-CoV-2 screening of healthcare workers in a 4-site public hospital in Belgium after COVID-19 outbreak. J Infect. 2020:S0163- 4453(20)30514-4. 9. Mak GC, Cheng PK, Lau SS, Wong KK, Lau CS, Lam ET, et al. Evaluation of rapid antigen test for detection of SARS-CoV-2 virus. Journal of clinical virology : the official publication of the Pan American Society for Clinical Virology. 2020;129:104500-. 10. Nagura-Ikeda M, Imai K, Tabata S, Miyoshi K, Murahara N, Mizuno T, et al. Clinical evaluation of self- collected saliva by RT-qPCR, direct RT-qPCR, RT-LAMP, and a rapid antigen test to diagnose COVID-19. J Clin Microbiol. 2020:JCM.01438-20. 11. Omi K, Takeda Y, Mori M. SARS-CoV-2 qRT-PCR Ct value distribution in Japan and possible utility of rapid antigen testing kit. medRxiv. 2020:2020.06.16.20131243. 12. Scohy A, Anantharajah A, Bodéus M, Kabamba- Mukadi B, Verroken A, Rodriguez-Villalobos H. Low performance of rapid antigen detection test as frontline testing for COVID-19 diagnosis. J Clin Virol. 2020;129:104455. 13. Weitzel T, Legarraga P, Iruretagoyena M, Pizarro G, Vollrath V, Araos R, et al. Head-to-head comparison of four antigen-based rapid detection tests for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. bioRxiv. 2020:2020.05.27.119255. 14. Weiss A, Jellingsø M, Sommer MOA. Spatial and temporal dynamics of SARS-CoV-2 in COVID-19 patients: A systematic review and meta-analysis. EBioMedicine. 2020;58. 15. Arons MM, Hatfield KM, Reddy SC, Kimball A, James A, Jacobs JR, et al. Presymptomatic SARS-CoV-2 Infections and Transmission in a Skilled Nursing Facility. New England Journal of Medicine. 2020;382(22):2081-90. 16. Bullard J, Dust K, Funk D, Strong JE, Alexander D, Garnett L, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from diagnostic samples. Clinical infectious diseases : an official publication of the Infectious Diseases Society of America. 2020:ciaa638. 17. Lee S, Kim T, Lee E, Lee C, Kim H, Rhee H, et al. Clinical Course and Molecular Viral Shedding Among Asymptomatic and Symptomatic Patients With SARS-CoV- 2 Infection in a Community Treatment Center in the Republic of Korea. JAMA Internal Medicine. 2020. 18. World Health Organization. Post-market surveillance of in-vitro diagnostics. 2015. 19. World Health Organization. Laboratory biosafety guidance related to coronavirus disease 2019 (COVID-19) 2020 [updated 13 May 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/laboratory-biosafety- guidance-related-to-coronavirus-disease-2019-(covid-19). 20. World health Organization. COVID-19 Target product profiles for priority diagnostics to support response to the COVID-19 pandemic v.0.1 2020 [updated 31 July 2020. Available from: https://www.who.int/publications/m/item/covid-19-target- product-profiles-for-priority-diagnostics-to-support- response-to-the-covid-19-pandemic-v.0.1. 21. Dinnes J, Deeks JJ, Adriano A, Berhane S, Davenport C, Dittrich S, et al. Rapid, point‐of‐care antigen and molecular‐based tests for diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. Cochrane Database of Systematic Reviews. 2020(8). 22. World Health Organization. Infection prevention and control during health care when COVID-19 is suspected 2020 [updated 19 March 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/laboratory- biosafety-guidance-related-to-coronavirus-disease-2019- (covid-19). 23. World Health Organization. Rational use of personal protective equipment (PPE) for coronavirus disease (COVID-19) 2020 [updated 4 April 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/rational-use-of- personal-protective-equipment-for-coronavirus-disease- (covid-19)-and-considerations-during-severe-shortages. 24. World Health Organization. WHO COVID-19 Case definition 2020 [updated 7 August 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/WHO-2019-nCoV- Surveillance_Case_Definition-2020.1. Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -8- Acknowledgments This document was developed in consultation with: External: Sergio Carmona, FIND, Switzerland; Arlene Chua, Médecins Sans Frontières, Switzerland; Antonino Di Caro, Istituto Nazionale per le Malattie Infettive Lazzaro Spallanzani, Italy; Sally Hojvat, Partners in Diagnostics, USA; Erik Karlsson, Institut Pasteur du Cambodge, Cambodia; Rosanna Peeling, London School of Hygiene & Tropical Medicine, UK; Leo Poon, Hong Kong University, China, Hong Kong SAR; Chantal Reusken, RIVM, Netherlands; Bill Rodriguez, Draper Richards, Kaplan Foundation, USA; Jilian Sacks, FIND, Switzerland; Anne von Gottberg, National Institute for Communicable Diseases, South Africa WHO: Jane Cunningham and Mark Perkins (Leads), Amal Barakat, Golubinka Boshevksa, Lisa Carter, Lora Chernyshova, Sebastien Cognat, Radu Cojocaru, Janet Victoria Diaz, Soudeh Ehsani, Belinda Louise Herring, Francis Inbanathan, Alexandr Jaguparov, Iaroslava Maksymovych, Marco Marklewitz, Jairo Mendez-Rico, Karen Nahapetyan, Dmitriy Pereyaslov, Anne Perrocheau, Irena Prat, Artem Skrypnyk, Maja Stanojevic, Ute Ströher, Maria Van Kerkhove, Karin von Eije. Declaration of interests Declarations of interests were collected from all external contributors and assessed for any conflicts of interest. There were no significant conflicts of interest declared. WHO continues to monitor the situation closely for any changes that may affect this interim guidance. Should any factors change, WHO will issue a further update. Otherwise, this interim guidance document will expire 2 years after the date of publication. © World Health Organization 2020. Some rights reserved. This work is available under the CC BY-NC-SA 3.0 IGO licence. WHO reference number: WHO/2019-nCoV/Antigen_Detection/2020.1 Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays: Interim guidance -9- Annex 1 Annex : Positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) and the number of true positive (TP), false positive (FP), true negative (TN) and false negative (FN) tests in a population of 100 000 with the prevalence of COVID-19 estimated at 5, 10, 20, 30% prevalence and based on recommended performance criteria: sensitivity of 70, 80%, 90% and specificity of 97,5% and 99,5%. Example prevalence target populations Prevalence (%) Sensitivity Specificity NPV PPV TP FP TN FN No. with disease No. positive tests Total Symptomatic general population; contacts of index case 5 70 97,5 98,4 59,6 3500 2375 92625 1500 5000 5875 100000 70 99,5 98,4 88,1 3500 475 94525 1500 5000 3975 100000 80 97,5 98,9 62,8 4000 2375 92625 1000 5000 6375 100000 80 99,5 99,0 89,4 4000 475 94525 1000 5000 4475 100000 90 97,5 99,5 65,5 4500 2375 92625 500 5000 6875 100000 90 99,5 99,5 90,5 4500 475 94525 500 5000 4975 100000 Community transmission: Symptomatic patients presenting to health care facilities; contacts of index cases; institutions & closed communities with confirmed outbreaks 10 70 97,5 96,7 75,7 7000 2250 87750 3000 10000 9250 100000 70 99,5 96,8 94,0 7000 450 89550 3000 10000 7450 100000 80 97,5 97,8 78,0 8000 2250 87750 2000 10000 10250 100000 80 99,5 97,8 94,7 8000 450 89550 2000 10000 8450 100000 90 97,5 98,9 80,0 9000 2250 87750 1000 10000 11250 100000 90 99,5 98,9 95,2 9000 450 89550 1000 10000 9450 100000 Symptomatic at referral centre; Symptomatic or screening of health care work workers; care homes 20 70 97,5 92,9 87,5 14000 2000 78000 6000 20000 16000 100000 70 99,5 93,0 97,2 14000 400 79600 6000 20000 14400 100000 80 97,5 95,1 88,9 16000 2000 78000 4000 20000 18000 100000 80 99,5 95,2 97,6 16000 400 79600 4000 20000 16400 100000 90 97,5 97,5 90,0 18000 2000 78000 2000 20000 20000 100000 90 99,5 97,6 97,8 18000 400 79600 2000 20000 18400 100000 Symptomatic health care worker/cleaners; care home residents 30 70 97,5 88,4 92,3 21000 1750 68250 9000 30000 22750 100000 70 99,5 88,6 98,4 21000 350 69650 9000 30000 21350 100000 80 97,5 91,9 93,2 24000 1750 68250 6000 30000 25750 100000 80 99,5 92,1 98,6 24000 350 69650 6000 30000 24350 100000 90 97,5 95,8 93,9 27000 1750 68250 3000 30000 28750 100000 90 99,5 95,9 98,7 27000 350 69650 3000 30000 27350 100000

-1- 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断 SARS-CoV-2感染 临时指导文件 2020年9月11日 背景 自 2019 冠状病毒病（COVID-19）大流行开始 以来，实验室一直在使用核酸扩增检测（NAAT） 来检测导致该疾病的 SARS-CoV-2病毒，例如实时 逆转录聚合酶链反应（rRT-PCR）检测。在许多国 家，获得这种形式的检测具有挑战性。目前正在进 行研究，以开发可靠但更便宜和更快速的诊断检测 方法，以检测 SARS-CoV-2感染特异性抗原。抗原 检测这一诊断检测旨在直接检测呼吸道分泌物中复 制病毒产生的 SARS-CoV-2蛋白，是作为实验室检 测和患者近旁检测开发的，即所谓的快速诊断检 测，或RDT。诊断发展前景是动态的，有近百家公 司开发或生产 SARS-CoV-2抗原检测的快速检测工 具(1)。 本文件提供了关于抗原检测 RDT（Ag-RDT） 在 COVID-19 诊断中的潜在作用和仔细选择检测工 具的必要性的建议。本文件中关于 Ag-RDT的信息 更新了 2020年 4月 8日公布的题为“世卫组织关于 对 2019 冠状病毒病（COVID-19）进行卫生服务点免疫 诊断检测的建议”的科学简报中包含的指导。在出 现新的证据时，将定期更新关于采用 Ag-RDT的指 导。 针对 COVID-19的 Ag-RDT大都采用夹心免疫 检测法，该方法使用一种通常用于艾滋病毒、疟疾 和流感检测的简单易用的横向流动检测方式。Ag- RDT通常包括一个装有样本和缓冲液的塑料盒，一 个硝化纤维素条，一条标记目标抗原-抗体复合物 特异性结合抗体测试线和一条标记抗体特异性结合 抗体对照线。就 SARS-CoV-2快速诊断检测而言， 目标分析物通常是病毒的核衣壳蛋白，首选核衣壳 蛋白是因为其相对丰度。通常，除了计时器之外， 商业试剂盒中提供了进行检测所需的所有材料，包 括样本收集材料。 在采集呼吸样本并将其应用于检测条后，操作 人员在 10至 30分钟内读取结果，无论是否有阅读 器的帮助。阅读器的使用使检测结果的解读标准 化，减少了不同操作人员在分析解释上的差异，但 需要辅助设备。目前生产的检测工具大都需要鼻或 鼻咽拭子样本，但公司正在开展研究，以评估其在 使用替代样本类型如唾液、口腔液体和样本采集系 统的情况下的检测性能，以便有可能的话扩大使用 选项，并促进安全有效的检测。一般来说，Ag- RDT操作简单，周转时间短，因而有可能通过转向 对早期症状患者的分散检测来扩大检测范围并减少 诊断延迟。Ag-RDT操作简单，但与 NAAT相比灵 敏度降低了。只有极少数的 SARS-CoV-2 Ag-RDT 经过了严格的监管审查。只有四种检测工具获得了 美国食品和药品管理局的紧急使用授权，另有两种 检测工具获得了日本药物和医疗器械管理局的批 准。只有三家公司提交了符合世卫组织紧急使用列 表（EUL）程序的文件 (2, 3)。 目前可用的 SARS-CoV-2 Ag-RDT 的灵敏度和 特异性数据来自于设计和所评估的检测品牌不同的 研究。数据表明，与 NAAT 相比，上呼吸道样本 （鼻或鼻咽拭子）的灵敏度变化很大，范围为 0- 94% (4-13)，但报告的特异性一直很高（>97%）。 虽然需要更多关于实际性能和操作方面的证据，但 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -2- 在高病毒载量（Ct值≤25或>106个基因组病毒拷贝 数/毫升）的患者中，Ag-RDT 最有可能表现良好， 这些患者通常处于症状前（症状出现前 1-3 天）和 疾病的早期症状阶段（疾病的前 5-7天内）(14, 15, 21)。这为早期诊断和通过有针对性地隔离和集中 最具传染性的患者及其密切接触者来阻断传播提供 了机会 (16)。症状出现后超过 5-7 天的患者更有可 能具有较低的病毒载量，并且 Ag-RDT的假阴性结 果的可能性更高。 尽管存在这些预期的性能限制，但如果正确操 作和解释，Ag-RDT 可以在指导患者管理、公共卫 生决策和 COVID-19 监测方面发挥重要作用。至 少，Ag-RDT 需要正确识别出比遗漏病例多得多的 病例（灵敏度≥80%），并具有非常高的特异性 （≥97-100%）。基于这些性能参数，本临时指导 提出了 Ag-RDT的几个潜在作用，并提供了检测选 择方面的一般建议以及检测实施方面的关键考虑因 素。 对采用SARS-CoV-2 Ag-RDT的一般建议 1. 与 NAAT 参考分析 1相比，符合灵敏度≥80% 和特异性≥97%这些最低性能要求的 SARS-CoV-2 Ag-RDT 可用于在一系列环境中诊断 SARS-CoV-2 感染，在这些环境中，NAAT 不可用或周转时间长 妨碍了临床应用。 为了优化性能，应由训练有素的操作人员严格 按照制造商的说明，在症状出现后的前 5-7 天内进 行 Ag-RDT检测。 2. 适合采用 COVID-19 Ag-RDT的情形包括： i) 为了应对不能立即获得 NAAT的偏远地区、 机构和半封闭社区的疑似 COVID-19 疫情。来 自多个疑似病例的阳性 Ag-RDT 结果强烈提示 COVID-19 爆发，可以据此及早实施感染控制 措施。在可能的情况下，应将所有 Ag-RDT 结 1 基于在代表性人群中精心设计和实施的评估。 果为阳性的样本（或至少一个子集）运送到具 有 NAAT能力的实验室进行确认性检测。 ii) 为了支持疫情调查（例如在封闭或半封闭的 群体中，包括学校、疗养院、游轮、监狱、工 作场所和宿舍等）。在经 NAAT 确认的 COVID-19 疫情中，可以利用 Ag-RDT 来筛查 高危个体，快速隔离阳性病例（并启动其它接 触者追踪工作），并为 NAAT 之目的优先从 RDT阴性个体中采集样本。 iii) 为了监测社区中的发病率趋势，特别是疫 情期间或社区传播广泛地区（Ag-RDT 结果的 阳性预测值和阴性预测值足以启动有效的感染 控制措施）基本工作人员和卫生工作者中的发 病率趋势 2。 iv) 在社区传播广泛的地方，RDT 可用于在卫 生设施、COVID-19 检测中心/场所、疗养院、 监狱、学校、前线和卫生保健工作者中早期发 现和隔离阳性病例，并用于追踪接触者。请注 意，RDT 阴性患者的安全管理将取决于 RDT 的性能和 COVID-19 的社区患病率（见附 件）。Ag-RDT 阴性结果不能完全排除活动性 COVID-19 感染，因此，应尽可能进行重复检 测或优选确认性检测（NAAT）（图 1），特 别是在有症状的患者中。 v) 即使 AG-RDT没有被特别授权用于对无症状 的病例接触者进行检测，也可以考虑此种用 途，因为无症状病例已被证明具有与有症状病 例相似的病毒载量（17），尽管在这种情况 下，不应因 AG-RDT的结果为阴性而取消对接 触者的隔离要求。 3. 就初步将 Ag-RDT 引入临床使用而言，各国应 考虑选择一些目前可进行 NAAT 确认性检测的环 境，以便工作人员可以获得对检测的信心，确认所 选 RDT 的性能，并解决遇到的任何实施问题。在 2 在低患病率环境中，假阳性结果的风险很高；如果患病率 为10%，并且满足最低性能标准，则阳性预测值为78%；如 果患病率为20%，则提高到93%。 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -3- 使用 NAAT对经 Ag-RDT筛查的患者进行确认性检 测的情况下，两次检测的样本应大致同时采集，或 最多在不到 2天的时间内采集。 4. 在利用 NAAT 进行确认性检测不可行的情况 下，任何结果可能不正确的迹象都应引起对有效性 的怀疑。例如，检测结果呈阳性但临床综合征与 COVID-19 不符的患者，或在低流行率环境中（其 中阳性检测结果的预测值较低，而假阳性的风险较 高）检测结果呈阳性的患者。其他警示信号可能包 括检测结果呈阴性但有典型综合征的患者、与病例 密切接触的患者或在高患病率环境中检测的患者。 在这种情况下，应考虑再次进行检测，特别是如果 在视觉效果（模糊的条带）或取样充分性方面也存 在任何不确定性的话。 5. 不建议在预期患病率低的环境或人群中使用 Ag-RDT（例如，入境点、献血点、选择性外科手 术时的筛查），尤其是在 NAAT确认性检测尚不可 用的情况下。在有更多的高质量研究数据证实一种 或多种商业化 Ag-RDT 试剂盒的高特异性 （> 99%）之前，不可将其用于此种用途。 为采购和实施的目的选择检测工具： 尽管目前市面上销售的 SARS-CoV-2 Ag-RDT 数量有限，但多种质量和性能各异的产品有望很快 进入市场。如引言中所述，大多数商用 SARS- CoV-2 Ag-RDT 使用传统的侧向流动形式，以胶体 金或其它可见染料为指示剂。有几个系统，包括一 些获得了美国食品和药品管理局紧急使用授权的系 统，使用可提高灵敏度的替代指示剂，但需要特定 的设备来读取和解释检测结果。 选择用于上文建议部分所述情形的 Ag-RDT 时，需要考虑许多因素。其中包括： 1. 用于验证检测的可用数据的质量。应考虑 数据来源（独立的还是内部 /公司赞助 的），以及研究设计（例如，使用的参考 标准、样本类型、采集样本与执行检测之 间间隔的时间以及症状出现后的天数）、 招募的研究对象人数和招募环境。由于标 本中的病毒浓度是检测灵敏度的最大预测 因素，因此选择患者和研究地点至关重 要。前瞻性临床研究通常优于回顾性研 究。如果研究进行得很好，未接受公司赞 助的研究所提供的数据具有特殊价值。 2. 报告的性能。在开始采购之前，应仔细审 查证明 RDT 性能的数据。即使在社区传播 环境中，活动性 SARS-CoV-2感染的发生率 也相对较低，因此高特异性（最低≥97%， 理想情况下≥99%）对于避免大量假阳性结 果是必要的。灵敏度将取决于作为研究对 象的患者的状况（疾病程度、症状出现后 的天数等）以及产品质量，但最低应达到 ≥80%。一项有用的评估是在 rRT-PCR循环 阈值（Ct）低于特定值（如 28或 30）的患 者中检测的灵敏度，因为在这一范围内进 行检测时，预计呼吸道样本中会有大量病 毒，检测灵敏度相应较高（在一些已发表 和未发表的研究中超过 90%）(4, 11)。然 而，值得注意的是，在给定的目标 RNA 输 入浓度下，Ct 值在 rRT-PCR 分析之间变 化，并且不是严格定量的。 3. 生产质量和监管状况。检测工具应向在质 量管理体系（例如 ISO 13485）下开展工作 的制造商采购，这些制造商应至少获得了 当地监管机构的批准或生产国授予的自由 销售权。RDT，作为用于临床的体外诊断 工具，应该经过严格和透明的监管审查。 采购时应获得严格监管机构和/或世卫组织 紧急使用清单的批准或授权。 4. 生产能力和质量的进一步证明。许多在体 外诊断工具的生产、销售和支持方面没有 成功经验的新公司正借助 SARS-CoV-2 Ag- RDT 进入市场。采购人员应考虑公司提供 的其它产品系列（尤其是横向流动检测工 具）、它们在非紧急诊断产品方面获得的 监管批准以及它们的生产和上市后监控能 力。许多公司在数量少的情况下能够生产 出高质量的原型或完成检测，但难以扩大 生产规模以满足全球需求。 5. 分销和技术支持。应考虑供应商的分销和 产品支持能力，特别是在低收入和中等收 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -4- 入国家。对于需要额外设备（如阅读器） 的检测工具尤其如此。 6. 运输和储存条件以及保质期。抗温度应力 的能力和保质期长是Ag-RDT易于使用的关 键。就新产品而言，保质期必须根据加速 稳定性研究（通常在较高温度下）进行估 计，但目标保质期在 30℃以及理想情况下 40℃时至少应为 12-18个月。对运输和/或储 存的冷链要求将显著增加采购和分销的成 本和复杂性。 7. 标本采集要求。SARS-CoV-2 Ag-RDT 在标 本类型、处理步骤数量、准确时间要求、 仪器和结果解释方面的要求各不相同，这 将影响所需培训和监督的程度。因此，易 用性评估跟检测性能一样是一个重要的考 虑因素。 8. 检测套件的内容。标准套件内容不一定包 括执行检测和质量控制所需的一切，这必 须在购买前核实。几种市面上可买到的 SARS-CoV-2 Ag-RDT使用读数仪器。 9. 检测费用。检测费用将根据检测和购买量 而有所不同，一般来说应该比 PCR 检测便 宜。还必须考虑运输成本、进口关税、储 存、最终用户培训（和监督）以及支持高 质量地实施快速诊断检测所需的采购后质 量控制测试活动的成本。 10. 使用说明的可用性、完整性和清晰度。使 用说明应该是清晰的，包含插图，对非实 验室专家来说容易使用。 实施注意事项： 1. 尽管Ag-RDT可能比NAAT更容易执行，但 仍需严格遵循供应商建议的程序，并适当 注意文件、时间相关或容量相关步骤的执 行、储存条件和保质期以及设备和库存管 理。所有检测操作人员必须接受过样本采 集、相关生物安全、检测性能、结果解释 和报告以及废物管理方面的培训。质量控 制措施也需要到位。 2. 监管监督下的上市后监测对于发现产品性 能缺陷至关重要，也是对制造商的一项重 要要求。卫生系统应确保对 COVID-19诊断 检测活动进行监测和评估，并建立报告问 题的明确机制 (18)。 3. 仪器检测系统的使用提出了额外的培训要 求（仪器使用、所需校准、服务要求、操 作条件）并需要足够的基础设施，如可靠 的电源。 4. 样本采集是影响Ag-RDT性能的最关键因素 之一。应仔细遵循使用说明，采集样本的 工作人员均应接受方法方面的培训。 5. 这些检测工具都特别说明了如何处理采集 的样本。应严格遵循说明，不得使用替代 试剂（例如，用水或其它液体代替稀释/混 合缓冲液）。 6. 对操作人员的生物安全要求必须到位—— 个人防护装备、生物危害废物袋和良好的 通风是必不可少的 (19)。 方法 本临时指导文件概述了基于最低性能标准的 SARS-CoV-2抗原检测 RDT的潜在用例和非用例情 形。通过针对 SARS-CoV-2重点诊断工具 (20)的目 标产品概况（TPP）开发的正式流程，确定了 Ag- RDT的最低性能要求。最低性能要求考虑到了对病 毒脱落时间动态和传播能力以及早期和扩大检测的 预期益处的不断发展的认识。在 PubMed 和 medRxiv 数据库中检索了不管是经过同行评审和已 发表的还是预印本的关于卫生服务点 /患者近旁 SARS-CoV-2 快速抗原检测的检测准确性的报告。 发现了一份关于诊断检测准确性的系统综述 (21)。 此外，与世卫组织秘密分享了关于两种 SARS- CoV-2 Ag-RDT 的性能的未公布独立报告。世卫组 织 COVID-19 参考实验室网络成员、世卫组织 COVID-19 诊断目标产品概况审查小组成员以及其 他外部专家对临时指导进行了审查。 我们认识到现有证据的种种不足。其中包括样 本量小、基于预期存在或不存在 SARS-CoV-2感染 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -5- 的偏斜抽样，以及旨在验证检测工具的研究缺乏症 状状态或症状出现时间方面的细节。此外，缺乏无 症状病例的数据，在制造商的使用说明范围外使用 检测工具，以及在实验室而不是在卫生服务点/患 者近旁进行检测，这些都限制了建议的普遍性。尽 管如此，我们得出的结论是，在疾病的早期阶段 （在病毒载量和传播风险最高的前 5-7 天内），一 些 Ag-RDT可能至少满足并有可能超过最低性能要 求。与不检测或周转时间过长或低病毒载量患者存 在假阴性风险导致无法为感染控制措施提供信息的 检测相比，通过使用抗原 RDT 来扩大检测范围以 便可能的话阻断传播被认为更有益。 检测性能 Ag-RDT 的性能由旨在发现 SARS-CoV-2 感染 的检测与参考标准即 NAAT（通常为 rRT-PCR）相 比的灵敏度和特异性决定。 灵敏度是指所评估的 AG-RDT检测为阳性的病 例中根据参考标准 NAAT为阳性的百分比。 特异性是指所评估的 AG-RDT检测为阴性的病 例中根据参考标准 NAAT为阴性的百分比。接受检 测社区中的疾病流行程度强烈影响阳性或阴性结果 的预测值（见附件）。因此，阳性或阴性检测结果 的临床价值将取决于根据在当地流行情况的背景下 解读的检测结果采取的措施。 一般来说，受试人群中 SARS-COv-2感染的患 病率越高，检测结果呈阳性的人患 COVID-19 的可 能性越大。社区中的患病率越低，检测结果呈阴性 的患者未患该疾病的可能性越大，见附件。例如， 当社区中活动性 SARS-CoV-2 感染的患病率为 1% 时，即使特异性为 99%的检测也具有较低的阳性预 测值，因为所有阳性结果的一半将是假阳性。 抗原检测RDT在COVID-19病例管理和监测中 的作用 在正在经历广泛社区传播的国家或地区，卫生 系统可能负担过重，并且可能无法对所有或任何疑 似病例进行 NAAT检测，在这种情况下可以考虑使 用 Ag-RDT。与所有诊断检测，特别是那些灵敏度 和/或特异性次优的检测一样，为了正确解释 RDT 结果并据以采取行动，必须根据监测来估计患病率 （根据参考标准），因为这决定了 RDT 的阳性和 阴性预测值（分别为 PPV 和 NPV）（见附件）。 当存在广泛的社区传播时，利用 Ag-RDT 进行 COVID-19 病例管理的建议流程如图 1 所示。在这 种情况下，COVID-19 疾病的检测前概率（根据流 行病学情况和临床因素，在结果揭晓前患者罹患 COVID-19 的可能性）相对较高，阳性检测结果具 有较高的预测值。同样，在社区传播的情况下， RDT 阴性结果的预测值可能较低，即使有明显的 COVID-19暴露或疾病的流行病学或临床指标。 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -6- 图1. 流程图展示了在存在广泛社区传播并且没有NAAT能力的环境中基于抗原的RDT（满足最低性能标准） 的潜在用途。 NPV- 阴性预测值；PPV – 阳性预测值 图中文字翻译： Who:……（人员：训练有素的操作员） Where:……（地点：卫生设施或其它指定地点） Patients meets……（患者符合世卫组织的COVID-19病例定义） Sample managemen（样本管理） Respiratory sample……（按照使用说明和生物安全要求采集呼吸道样本） Ag-RDT performed……（对样本进行抗原快速诊断检测） Results are interpreted（通过人工或仪器解释结果） Patient management（患者管理） SARS-CoV-2 NOT DETECTED （未发现SARS-CoV-2） SARS-CoV-2 DETECTED （发现SARS-CoV-2） NPV high （NPV高） NPV low （NPV低） ppv moderate/high （ppv为中/高） Refer patient with……（将有中度/严重症状的患者转到低可能性病房（NPV为中到高），检查所有病例以查找其它病 因） Advise patients……（建议有呼吸道症状的患者采取感染控制措施，如果症状持续或继续发展，考虑再次进行Ag-RDT。 如果临床表现与肺炎一致，以下呼吸道标本为目标。） Admit patient……（将有中度/严重症状的患者送进高可能性病房，或对无发热或呼吸道症状的轻症患者进行居家或群体 隔离，隔离时间为出现症状后10天加3天） 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -7- 表1. 根据现有信息，不应使用SARS-CoV-2 Ag-RDT的情况 不使用SARS-CoV-2 Ag-RDTs： 说明 无症状者，除非其是确诊病例的接触者 检测前概率（检测前，根据流行病学、病例接触、临床发 现，患者患有该疾病的可能性）较低。 在没有或只有零星病例的地方 在这种情况下，不建议将 Ag-RDT 用于常规监测或病例管 理。阳性检测结果很可能是假阳性。分子检测优先。 缺乏适当的生物安全和感染预防和控制措施 为了保护卫生工作者，从疑似 COVID-19 患者身上采集呼吸 道样本进行任何检测都需要操作人员穿戴手套、长袍、口 罩、面罩或护目镜 (19, 22, 23)。 对患者的管理不会因检测结果而改变 如果检测结果呈阳性和阴性的患者因为 PPV和/或 NPV不详 或低而接受同样的治疗，那么检测就没有意义。 入境点的机场或边境检查 COVID-19 的患病率在旅行者中变化很大，因此不可能确定 检测结果的阳性预测值和阴性预测值。阳性和阴性检测结果 将需要确认性检测来提高阳性预测值和阴性预测值以供作出 决定。 献血前的筛查 阳性 RDT 结果不一定与病毒血症相关。无症状献血者不符 合疑似病例的定义 (24)。 影响检测性能的因素 如上所述，许多因素可能影响抗原检测 RDT 的性 能。因此，临床发现可能是可变的。应考虑以下因 素： • 患者因素，如发病时间和免疫状态样本类 型（上呼吸道或下呼吸道）、质量和处 理，包括储存条件和在病毒运输介质中的 稀释度 • 病毒因素，包括病毒抗原脱落的浓度和持 续时间、目标抗原的结构变异、与其它病 毒的交叉反应性 • 特异性蛋白质靶标，因为产生的某些抗原 比其它抗原的浓度高，例如核衣壳蛋白与 刺突蛋白相比 • 产品设计或质量问题，包括： - 抗体数量不足或对目标抗原的亲和 力不足 - 包装不良，在不适当的运输和/或储 存过程中暴露在湿热环境中，这可 能会使检测的抗体降解 - 可能影响检测性能的不清楚或不正 确的说明 • 检测操作员的培训或能力不足，这可能导 致在准备抗原检测 RDT、执行检测或解释 结果时出现错误，并得出错误的结论。 未来的更新和针对特定产品的建议 世卫组织正在与评估商业化 SARS-CoV-2抗原 检测 RDT 的性能和操作特性的小组密切合作，以 便在证据出现时系统地汇编证据并协调更新工作。 目前，没有足够的性能和操作使用证据来推荐特定 的商品。 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -8- 参考文献 1. Foundation for Innovative New Diagnostics. SARS- CoV-2 Diagnostic Pipeline 2020 [Available from: https://www.finddx.org/covid-19/pipeline/. 2. U.S. Food & Drug Administration. In Vitro Diagnostics EUAs 2020 [Available from: https://www.fda.gov/medical- devices/coronavirus-disease-2019-covid-19-emergency-use- authorizations-medical-devices/vitro-diagnostics-euas. 3. Agency PaMD. PMDA’s Efforts to Combat COVID-19 2020 [Available from: https://www.pmda.go.jp/english/about-pmda/0002.html. 4. Porte L, Legarraga P, Vollrath V, Aguilera X, Munita JM, Araos R, et al. Evaluation of novel antigen-based rapid detection test for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. Int J Infect Dis. 2020:S1201- 9712(20)30405-7. 5. Diao B, Wen K, Chen J, Liu Y, Yuan Z, Han C, et al. Diagnosis of Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection by Detection of Nucleocapsid Protein. medRxiv. 2020:2020.03.07.20032524. 6. Lambert-Niclot S, Cuffel A, Le Pape S, Vauloup- Fellous C, Morand-Joubert L, Roque-Afonso AM, et al. Evaluation of a Rapid Diagnostic Assay for Detection of SARS-CoV-2 Antigen in Nasopharyngeal Swabs. J Clin Microbiol. 2020;58(8). 7. Mertens P, De Vos N, Martiny D, Jassoy C, Mirazimi A, Cuypers L, et al. Development and Potential Usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip Diagnostic Assay in a Pandemic Context. Front Med (Lausanne). 2020;7:225-. 8. Blairon L, Mokrane S, Wilmet A, Dessilly G, Kabamba-Mukadi B, Beukinga I, et al. Large-scale, molecular and serological SARS-CoV-2 screening of healthcare workers in a 4-site public hospital in Belgium after COVID-19 outbreak. J Infect. 2020:S0163- 4453(20)30514-4. 9. Mak GC, Cheng PK, Lau SS, Wong KK, Lau CS, Lam ET, et al. Evaluation of rapid antigen test for detection of SARS-CoV-2 virus. Journal of clinical virology : the official publication of the Pan American Society for Clinical Virology. 2020;129:104500-. 10. Nagura-Ikeda M, Imai K, Tabata S, Miyoshi K, Murahara N, Mizuno T, et al. Clinical evaluation of self- collected saliva by RT-qPCR, direct RT-qPCR, RT-LAMP, and a rapid antigen test to diagnose COVID-19. J Clin Microbiol. 2020:JCM.01438-20. 11. Omi K, Takeda Y, Mori M. SARS-CoV-2 qRT-PCR Ct value distribution in Japan and possible utility of rapid antigen testing kit. medRxiv. 2020:2020.06.16.20131243. 12. Scohy A, Anantharajah A, Bodéus M, Kabamba- Mukadi B, Verroken A, Rodriguez-Villalobos H. Low performance of rapid antigen detection test as frontline testing for COVID-19 diagnosis. J Clin Virol. 2020;129:104455. 13. Weitzel T, Legarraga P, Iruretagoyena M, Pizarro G, Vollrath V, Araos R, et al. Head-to-head comparison of four antigen-based rapid detection tests for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. bioRxiv. 2020:2020.05.27.119255. 14. Weiss A, Jellingsø M, Sommer MOA. Spatial and temporal dynamics of SARS-CoV-2 in COVID-19 patients: A systematic review and meta-analysis. EBioMedicine. 2020;58. 15. Arons MM, Hatfield KM, Reddy SC, Kimball A, James A, Jacobs JR, et al. Presymptomatic SARS-CoV-2 Infections and Transmission in a Skilled Nursing Facility. New England Journal of Medicine. 2020;382(22):2081-90. 16. Bullard J, Dust K, Funk D, Strong JE, Alexander D, Garnett L, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from diagnostic samples. Clinical infectious diseases : an official publication of the Infectious Diseases Society of America. 2020:ciaa638. 17. Lee S, Kim T, Lee E, Lee C, Kim H, Rhee H, et al. Clinical Course and Molecular Viral Shedding Among Asymptomatic and Symptomatic Patients With SARS-CoV- 2 Infection in a Community Treatment Center in the Republic of Korea. JAMA Internal Medicine. 2020. 18. World Health Organization. Post-market surveillance of in-vitro diagnostics. 2015. 19. World Health Organization. Laboratory biosafety guidance related to coronavirus disease 2019 (COVID-19) 2020 [updated 13 May 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/laboratory-biosafety- guidance-related-to-coronavirus-disease-2019-(covid-19). 20. World health Organization. COVID-19 Target product profiles for priority diagnostics to support response to the COVID-19 pandemic v.0.1 2020 [updated 31 July 2020. Available from: https://www.who.int/publications/m/item/covid-19-target- product-profiles-for-priority-diagnostics-to-support- response-to-the-covid-19-pandemic-v.0.1. 21. Dinnes J, Deeks JJ, Adriano A, Berhane S, Davenport C, Dittrich S, et al. Rapid, point‐of‐care antigen and molecular‐based tests for diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. Cochrane Database of Systematic Reviews. 2020(8). 22. World Health Organization. Infection prevention and control during health care when COVID-19 is suspected 2020 [updated 19 March 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/laboratory- biosafety-guidance-related-to-coronavirus-disease-2019- (covid-19). 23. World Health Organization. Rational use of personal protective equipment (PPE) for coronavirus disease (COVID-19) 2020 [updated 4 April 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/rational-use-of- personal-protective-equipment-for-coronavirus-disease- (covid-19)-and-considerations-during-severe-shortages. 24. World Health Organization. WHO COVID-19 Case definition 2020 [updated 7 August 2020. Available from: https://www.who.int/publications/i/item/WHO-2019-nCoV- Surveillance_Case_Definition-2020.1. 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -9- 鸣谢 本文件是与以下各方协商制定的： 外部：Sergio Carmona，FIND，瑞士；Arlene Chua，无国界医生，瑞士；Antonino Di Caro，拉撒 路 斯帕拉赞国家传染病研究所，意大利；Sally Hojvat，诊断合作伙伴，美国；Erik Karlsson，柬埔 寨巴斯德研究所，柬埔寨；Rosanna Peeling，伦敦卫 生和热带医学学院，英国；Leo Poon，香港大学， 中国香港特别行政区；Chantal Reusken，RIVM，荷 兰 ； Bill Rodriguez ， Draper Richards ， Kaplan Foundation，美国；Jilian Sacks，FIND，瑞士；Anne von Gottberg，国家传染病研究所，南非 世卫组织：Jane Cunningham和 Mark Perkins（负 责人），Amal Barakat, Golubinka Boshevksa, Lisa Carter, Lora Chernyshova, Radu Cojocaru, Janet Victoria Diaz, Soudeh Ehsani, Belinda Louise Herring, Francis Inbanathan, Alexandr Jaguparov, Iaroslava Maksymovych, Marco Marklewitz, Jairo Mendez-Rico, Karen Nahapetyan, Dmitriy Pereyaslov, Anne Perrocheau, Irena Prat, Artem Skrypnyk, Maja Stanojevic, Ute Ströher, Maria Van Kerkhove, Karin von Eije。 利益声明 从所有外部贡献者那里收集了利益声明，并对 这些声明进行了评估以确定是否存在利益冲突。没 有宣布重大利益冲突。 世卫组织继续密切监测情况，以了解可能影响这一临时指导的任何变化。如果任何因素发生变化，世卫 组织将发布进一步的更新。否则，本临时指导文件将自发布之日起2年后失效。 © 世界卫生组织 2020年。保留部分版权。本作品可在知识共享署名——非商业性使用——相同方式共享 3.0 政府间组织（CC-BY-NC-SA 3.0 IGO）许可协议下使用。 WHO reference number: WHO/2019-nCoV/Antigen_Detection/2020.1 使用快速免疫测定法检测抗原以诊断SARS-CoV-2感染：临时指导 -10- 附件 附件 ：阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）以及10，0 00人中检测结果为真阳性（TP）、假阳性（FP）、真阴性（TN）和假阴性（FN）的数量，COVID-19患病率估计 为5%、10%、20%、30%，并基于推荐的性能标准：灵敏度为70%、80%、90%，特异性为98%和100%。 目标人群患病率示例 患病率 （%） 灵敏度 特异性 NPV PPV TP FP TN FN 患者人数 阳性检测结 果的数量 共计 有症状的一般人群； 指示病例的接触者 5 70 98 98 60 350 238 9263 150 500 588 10000 70 100 98 88 350 48 9453 150 500 398 10000 80 98 99 63 400 238 9263 100 500 638 10000 80 100 99 89 400 48 9453 100 500 448 10000 90 98 99 65 450 238 9263 50 500 688 10000 90 100 99 90 450 48 9453 50 500 498 10000 社区传播：到卫生保 健机构就诊的有症状 患者；指示病例的接 触者；确认爆发的机 构和封闭社区 10 70 98 97 76 700 225 8775 300 1000 925 10000 70 100 97 94 700 45 8955 300 1000 745 10000 80 98 98 78 800 225 8775 200 1000 1025 10000 80 100 98 95 800 45 8955 200 1000 845 10000 90 98 99 80 900 225 8775 100 1000 1125 10000 90 100 99 95 900 45 8955 100 1000 945 10000 转诊中心的有症状 者；有症状的卫生保 健工作者或卫生保健 工作者筛查；疗养院 20 70 98 93 88 1400 200 7800 600 2000 1600 10000 70 100 93 97 1400 40 7960 600 2000 1440 10000 80 98 95 89 1600 200 7800 400 2000 1800 10000 80 100 95 98 1600 40 7960 400 2000 1640 10000 90 98 98 90 1800 200 7800 200 2000 2000 10000 90 100 98 98 1800 40 7960 200 2000 1840 10000 有症状的卫生保健工 作者/清洁工；疗养院 居民 30 70 98 88 92 2100 175 6825 900 3000 2275 10000 70 100 89 98 2100 35 6965 900 3000 2135 10000 80 98 92 93 2400 175 6825 600 3000 2575 10000 80 100 92 99 2400 35 6965 600 3000 2435 10000 90 98 96 94 2700 175 6825 300 3000 2875 10000 90 100 96 99 2700 35 6965 300 3000 2735 10000

-1- Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 Временные рекомендации 11 сентября 2020 г. Введение В целях выявления вируса SARS-CoV-2, который вызывает заболевание COVID-19, в лабораторной диагностике с момента начала пандемии применяют методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), например полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). Доступ к этим видам тестирования во многих странах затруднен. В настоящее время ведется поиск новых диагностических тестов для определения антигенов, которые специфичны для вируса SARS-CoV-2, характеризующихся более высокой надежностью, меньшей стоимостью и большей скоростью выполнения. Диагностические тесты для определения антигенов позволяют непосредственно выявлять в секрете дыхательных путей белки вируса SARS-CoV-2, синтезирующиеся в ходе репликации, и выпускаются как для лабораторного использования, так и для применения по месту оказания помощи, в виде так называемых диагностических экспресс-тестов или ДЭТ. В настоящее время в сфере создания диагностических средств наблюдается высокая активность: порядка ста компаний заняты разработкой или производством экспресс-тестов для определения антигенов вируса SARS-CoV-2 (1). В этом документе представлены рекомендации, касающиеся возможного применения ДЭТ для определения антигенов (АГ-ДЭТ) в целях диагностики COVID-19, а также тщательного выбора теста. В части информации, касающейся АГ-ДЭТ, настоящий документ является обновлением рекомендаций, представленных в научной справке ВОЗ «Рекомендации по использованию иммунодиагностических тестов на COVID-19 по месту лечения» от 8 апреля 2020 г. По мере появления новых фактических сведений в рекомендации, касающиеся использования АГ-ДЭТ, будут регулярно вноситься изменения. Большинство АГ-ДЭТ для диагностики COVID-19 основаны на так называемой сэндвич-схеме иммуноанализа с применением удобного латерального проточного метода, который также часто используется для тестирования на ВИЧ, малярию или грипп. Устройство для проведения АГ-ДЭТ, как правило, состоит из пластиковой тест-кассеты с лунками для образца и буфера, полоски с мембраной на основе нитрата целлюлозы с нанесенной на ней тестовой линией (сорбированы специфические антитела против комплексов определяемого антигена с конъюгированными антителами), а также контрольной линией (сорбированы специфические антитела против конъюгированных антител). В случае ДЭТ для выявления вируса SARS-CoV-2 определяемым веществом зачастую является белок вирусного нуклеокaпсида, который присутствует в достаточно большом количестве и поэтому является удобной мишенью. В комплекте с тестовыми наборами, доступными в коммерческой продаже, как правило поставляются все необходимые средства для проведения теста, в том числе для взятия образцов, за исключением таймера. После взятия образца материала из дыхательных путей и его нанесения на тест-полоску оператор через 10 – 30 минут получает результаты, определяемые либо визуально, либо при помощи инструментального оборудования (ридера). Применение ридера позволяет стандартизовать интерпретацию результатов тестирования, снизить вариативность интерпретаций тестов, выполняемых разными операторами, однако требует наличия дополнительного оборудования. В большинстве производимых в настоящее время тестов в качестве образца используется материал мазка из носа или носоглотки, тем не менее, стремясь расширить возможности применения тестов и обеспечить безопасность и эффективность процесса тестирования, компании-производители изучают результативность использования других образцов, например, слюны, или материала, собранного при Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -2- помощи системы для взятия образцов из полости рта. В целом, благодаря удобству применения и небольшому времени, которое необходимо для выполнения теста, АГ-ДЭТ могут способствовать переходу к децентрализованным схемам проведения тестирования пациентов, у которых возникают первые симптомы заболевания, за счет расширения масштабов тестирования и увеличения темпов диагностической работы. Платой за удобство применения АГ-ДЭТ является меньшая чувствительность теста по сравнению с МАНК. Крайне небольшое количество средств АГ-ДЭТ для выявления вируса SARS-CoV-2 прошли строгий нормативный контроль. Управление по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами Соединенных Штатов Америки выдало экстренное разрешение на применение только для четырех тестов, и еще два теста были одобрены Управлением по контролю за фармацевтическими средствами и медицинскими изделиями Японии. В рамках процедуры включения в перечень ВОЗ средств для применения в чрезвычайных ситуациях заявки поданы всего тремя компаниями (2, 3). Сведения, касающиеся чувствительности и специфичности имеющихся АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2, получены в исследованиях с различным дизайном и выполнявшихся в отношении изделий различных производителей. Согласно исследованиям, при использовании данных тестов для анализа образцов материала из верхних дыхательных путей (мазок из носа или носоглотки) наблюдался крайне большой разброс чувствительности по сравнению с МАНК в диапазоне 0–94% (4-13), тогда как специфичность оставалась стабильно высокой (более 97%). Для оценки эффективности и других аспектов практического применения АГ-ДЭТ необходим больший объем фактических сведений, тем не менее, наилучшие результаты применения АГ-ДЭТ, по-видимому, наблюдаются у пациентов с высокой вирусной нагрузкой (значение Ct ≤25 или >106 копий вирусного генома/мл), как правило, находящихся на предсимптомной (1–3 дня до появления симптомов) или в начале манифестной (первые 5–7 дней болезни) стадии заболевания (14, 15, 21). Благодаря этому появляется возможность диагностики заболевания и прерывания цепочек передачи инфекции на ранней стадии посредством адресных мер изоляции и взятия под наблюдение большинства зараженных и близко контактировавших с ними лиц (16). По прошествии 5–7 дней от возникновения симптомов заболевания имеется высокая вероятность снижения вирусной нагрузки у пациентов, и при обследовании с 1 В качественно выполненном исследовании с соответствующим дизайном и проведенном в репрезентативных популяциях. использованием АГ-ДЭТ возрастает вероятность получения ложноотрицательных результатов. Несмотря на подобные ограничения эффективности, при условии правильного применения и интерпретации АГ-ДЭТ обладают значительным потенциалом для построения на их основе процессов ведения пациентов, принятия решений в области общественного здравоохранения и реализации эпиднадзора за COVID-19. Необходимо, чтобы при использовании АГ-ДЭТ по меньшей мере обеспечивалось достижение высокого соотношения между числом достоверно выявленных и не выявленных заболевших (чувствительность ≥80%), а также исключительно высокая специфичность теста (≥97–100%). На основе этих характеристик тестов в данном рекомендательном документе рассмотрен ряд возможных вариантов применения АГ-ДЭТ и предложены общие рекомендации в отношении выбора тестов, а также основные соображения, касающиеся реализации этих рекомендаций. Общие рекомендации в отношении применения АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2 1. При возникновении ситуаций, в которых МАНК недоступны либо их применение клинически нецелесообразно ввиду длительного времени выполнения, для диагностики инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, допускается использование АГ- ДЭТ, отвечающих минимальным характеристикам чувствительности ≥80% испецифичности≥97%, значения которых определены путем сравнения с референсным тестом МАНК 1. В целях достижения оптимальных результатов тестирование с использованием АГ-ДЭТ должно быть выполнено подготовленным оператором в строгом соответствии с инструкциями производителя в течение первых 5–7 дней от момента возникновения симптомов заболевания. 2. Оптимальными случаями применения АГ-ДЭТ для диагностики COVID-19 являются: i) Реагирование на предполагаемые вспышки COVID-19 в периферийных районах, труднодоступных учреждениях и полузакрытых коллективах, когда МАНК не доступны для оперативного применения. Выявление положительных результатов АГ-ДЭТ у большого количества лиц, подозрительных на заражение COVID-19, будет с высокой вероятностью Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -3- свидетельствовать о вспышке заболевания и позволит своевременно принять меры для контроля за распространением инфекции. По возможности все образцы (либо подгруппа образцов), которые охарактеризованы как положительные по итогам применения АГ-ДЭТ, должны быть направлены в лабораторию, располагающую МАНК, для подтверждения результатов. ii) Содействие процессу расследования вспышек (например, в закрытых или полузакрытых коллективах, в том числе в школах, в домах-интернатах, на морских лайнерах, в тюрьмах, на рабочих местах, в общежитиях и т.п.). АГ-ДЭТ могут применяться во время вспышек COVID-19, подтвержденных МАНК, для скрининга лиц из групп риска и их оперативной изоляции в случае положительного результата тестирования (с последующим отслеживанием контактных лиц), а также направления образцов, охарактеризованных как отрицательные при использовании ДЭТ, на исследование с использованием МАНК в приоритетном порядке. iii) Мониторинг динамики заболеваемости в коллективах во время вспышек заболеваний, особенно среди работников непрерывно действующих организаций и работников здравоохранения, либо в районах с массовым характером распространения болезни, когда прогностическая ценность положительного результата и прогностическая ценность отрицательного результата АГ-ДЭТ достаточны для обоснования эффективных мер для борьбы с инфекцией2. iv) В условиях широкой циркуляции инфекции среди населения ДЭТ могут использоваться для раннего выявления и изоляции лиц с положительными результатами тестирования в учреждениях здравоохранения, пунктах тестирования на COVID-19 или исследовательских центрах, домах-интернатах, тюрьмах, школах, а также среди медицинских работников, в том числе непосредственно занятых в ликвидации вспышки инфекции, и для отслеживания контактов. Следует заметить, что методы безопасного ведения больных с отрицательными результатами ДЭТ будут определяться характеристиками ДЭТ и показателем распространенности COVID-19 среди местного населения (см. приложение 1). 2 В условиях низкой распространенности заболевания возрастает риск ложноположительных результатов; при условии соответствия теста минимальным критериям Отрицательный результат тестирования с применением АГ-ДЭТ не позволяет полностью исключить активную инфекцию COVID-19, в связи с чем рекомендуется по возможности проводить подтверждающее исследование (с использованием МАНК, рисунок 1), особенно у пациентов с симптомами инфекции. v) Тестирование контактных лиц без симптомов заболевания допускается даже в том случае, если АГ-ДЭТ не был разработан для этого вида использования, так как имеются убедительные фактические сведения о том, что вирусная нагрузка у лиц с бессимптомным течением заболевания сходна с таковой у лиц, имеющих манифестные формы заболевания (17); тем не менее в подобной ситуации отрицательный результат тестирования с применением АГ-ДЭТ не должен являться основанием для прекращения карантина в отношении контактного лица. 3. Для первоначального внедрения АГ-ДЭТ в клиническую практику страны должны предусмотреть наличие учреждений, которые располагают МАНК для проведения контрольного тестирования, с тем чтобы создать персоналу, работающему с ДЭТ, условия для ознакомления с тестами, сравнения характеристик выбранных ДЭТ и разрешения возможных трудностей практического применения. При назначении исследования с использованием МАНК для контрольного тестирования у пациентов, прошедших скрининг с применением АГ-ДЭТ, необходимо взятие образцов материала в близкие моменты времени с интервалом не более 2 дней. 4. При невозможности проведения контрольного тестирования с применением МАНК и подозрении на ошибочные результаты исследований следует предполагать недостаточную практическую пригодность теста. К числу примеров можно отнести случаи получения положительных результатов тестирования у пациентов на фоне наличия клинических синдромов, которые не характерны для COVID-19, либо в условиях низкой распространенности заболевания (то есть при низкой прогностической ценности положительного результата и высоком риске получения ложноположительного результата). К другим ситуациям, требующим повышенного внимания, могут быть отнесены случаи получения отрицательных результатов тестирования у эффективности в случае распространенности заболевания 10% прогностическая ценность положительного результата составит 78%, а при распространенности 20% — возрастет до 93%. Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -4- пациентов, которые имеют классические синдромы заболевания, находились в тесном контакте с заболевшими либо пребывают в районе с высокой распространенностью инфекции. В этих ситуациях необходимо рассмотреть возможность повторного проведения тестирования, особенно при неоднозначной трактовке визуально определяемого результата (неяркие полосы) либо сомнениях в отношении качества сбора образцов. 5. В случае если имеются основания предполагать низкую распространенность заболевания в определенном районе или в определенной популяции (например, при выполнении скрининга в пунктах пересечения границы, перед донацией крови или плановым хирургическим вмешательством), применение АГ-ДЭТ не рекомендуется, особенно при отсутствии возможностей оперативного выполнения контрольного тестирования с использованием МАНК. Применение в подобных целях может стать возможным только после появления новых сведений качественно выполненных исследований, которые бы подтвердили высокую специфичность (более 99%) одного или нескольких средств АГ-ДЭТ, доступных в коммерческой продаже. Выбор тестов для закупки и дальнейшего применения: В настоящее время количество тестов АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2, находящихся в коммерческой продаже, ограничено, однако в ближайшее время ожидается появление на рынке целого ряда продуктов различного качества и эффективности. Как было замечено во вводном разделе, большинство АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2 представляют собой традиционные тесты для латерального проточного иммуноанализа, в которых для визуального определения результата используется коллоидное золото или другие метки. В ряде тестов, включая некоторые, в отношении которых было выдано экстренное разрешение Управлением по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами Соединенных Штатов Америки, применяются другие метки, позволяющие увеличить чувствительность теста, однако для регистрации и интерпретации результатов тестирования необходимы специализированные устройства. При выборе АГ-ДЭТ для использования в ситуациях, описанных выше в разделе рекомендаций, необходимо принимать во внимание ряд факторов. К ним относятся: 1. Качество имеющихся данных, на основе которых проводится валидация теста. Необходимо принимать во внимание характер данных (независимо полученные или полученные при финансовой поддержке самой компании/корпоративных спонсоров), а также дизайн исследования (например, применявшийся референсный стандарт, тип клинического образца, время от момента взятия образцов до выполнения теста и количество дней, прошедших с момента появления симптомов), количество испытуемых, набранных в исследование, и подробные сведения о наборе в исследование. Концентрация вирусных частиц в клиническом образце является основным предиктором чувствительности теста, в связи с чем набор пациентов и выбор исследовательского центра имеют первостепенное значение. Как правило, проспективные клинические исследования более предпочтительны по сравнению с ретроспективными. Особую ценность имеют данные качественно выполненных исследований, не имеющих корпоративной спонсорской поддержки. 2. Заявленная эффективность. До начала закупок необходимо тщательно проанализировать данные в отношении характеристик ДЭТ. Принимая во внимание относительно низкую распространенность активной инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, в том числе в условиях широкой циркуляции вируса среди населения, необходимо применение тестов с высокой специфичностью (не менее 97%, а в идеальном случае не менее 99%). Чувствительность теста определяется состоянием здоровья испытуемых (выраженность заболевания, количество дней, прошедших от момента появления симптомов, и т. п.), а также качеством самого изделия, и она должна составлять не менее 80%.Информативнымпоказателем может стать чувствительность изучаемого теста в группе пациентов, у которых при выполнении ОТ-ПЦР-РВ значение порогового цикла (Ct) не превышает определенной величины (например, 28 или 30), так как при этих значениях следует ожидать большого количества вирусных частиц в материале из дыхательных путей и, соответственно, высокой чувствительности теста (согласно данным ряда опубликованных и неопубликованных исследований – более 90%) (4,11). Тем не менее, следует заметить, что значения параметра Ct при определенных исходных концентрациях определяемой РНК отличаются для разных Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -5- ОТ-ПЦР-РВ тестов и не являются количественными в строгом смысле. 3. Качество изготовления и разрешение регулирующих органов. Следует закупать тесты у производителей, деятельность которых налажена в соответствии с системой управления качеством(напр. ISO 13485), и которые, по меньшей мере, получили одобрение местных регулирующих органов либо наделены правом свободной продажи изделия в стране его изготовления. ДЭТ являются средством для диагностики in vitro, предназначенным для клинического применения, в связи с чем должны проходить строгую и транспарентную процедуру нормативного контроля. На момент совершения закупки средство должно быть одобрено или разрешено регулирующим органом и/ или включено в перечень ВОЗ средств для применения в чрезвычайных ситуациях. 4. Производственные возможности и другие показатели качества. Средства АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2 в настоящее время производятся многими новыми компаниями, которые не имеют опыта успешного производства, продажи и обслуживания средств для диагностики in vitro. Специалисты по закупкам должны изучить другую продукцию компании-производителя (особенно тесты для латерального проточного иммуноанализа), осведомиться о наличии в продуктовой линейке других диагностических средств, не предназначенных для применения в чрезвычайных ситуациях, и одобрении этой продукции регулирующими органами, а также производственными возможностями и возможностями пострегистрационного надзора. Многие компании располагают достаточными мощностями для изготовления высококачественных прототипов или полноценных тестов в небольшом объеме, однако могут испытывать затруднения при необходимости нарастить объемы производства для удовлетворения спроса в глобальном масштабе. 5. Дистрибуция и техническое сопровождение. Необходимо изучить возможности поставщика в области дистрибуции и сопровождения продукта, особенно в странах с низким и средним уровнем дохода. Это особенно важно в случае тестов, для проведения которых необходимо дополнительное оборудование, например ридеры. 6. Условия транспортировки и хранения, а также срок хранения. Удобство применения АГ-ДЭТ в значительной степени определяется устойчивостью этих средств к перепадам температуры и длительностью их срока хранения. Срок хранения новой продукции должен оцениваться на основании ускоренных исследований стабильности (как правило, при повышенных температурах), а искомый срок хранения должен составлять не менее 12–18 месяцев при 30°C, а в идеальном случае при 40°C. Необходимость обеспечения холодовой цепи во время доставки и/или хранения продукта приведет к значительному удорожанию и усложнению процесса закупок и дистрибуции. 7. Требования, предъявляемые к сбору образцов. Средства АГ-ДЭТ для выявления вируса SARS-CoV-2 различаются по таким характеристикам, как тип исследуемого образца, количество этапов обработки, необходимость точного соблюдения временных параметров, необходимость применения оборудования, особенности интерпретации результатов, что определяет уровень подготовки пользователя и контроля за проведением теста. В этой связи важной характеристикой теста наряду с эффективностью является удобство его использования. 8. Комплектность тестового набора. В стандартный комплект для проведения теста не всегда входит полный набор средств, необходимых для выполнения теста и контроля качества, что также необходимо принять во внимание перед закупкой. Ряд АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2, находящихся в коммерческой продаже, требует наличия ридера. 9. Стоимость теста. Стоимость тестов будет различной в зависимости от конкретного продукта и закупаемого объема. В целом, по сравнению с ПЦР тестами, их стоимость должна быть ниже. К числу других аспектов, которые необходимо принять во внимание, относятся: стоимость транспортировки, ввозные пошлины, затраты на хранение продукта, обучение пользователей (и осуществление контроля за их работой), а также издержки, связанные с контролем качества тестов, проводимых после приобретения продукции, в целях Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -6- обеспечения качества тестирования с использованием ДЭТ. 10. Наличие, полнота и ясность инструкций по применению. Инструкции должны сопровождаться иллюстрациями, быть ясными и ориентированными на пользователя, не являющегося специалистом в области лабораторной диагностики. Вопросы практического осуществления: 1. Считается, что АГ-ДЭТ значительно более просты в применении по сравнению с МАНК, однако это не исключает строгого соблюдения рекомендованных поставщиком процедур и ознакомления с документацией, выполнения требований в отношении продолжительности процедуры или объема материала на соответствующих этапах, соблюдения условий и срока хранения, а также обслуживания оборудования и управления запасами. Все операторы, выполняющие тесты, должны быть обучены сбору образцов материала и соответствующим мерам биобезопасности, ознакомлены с характеристиками теста, особенностями интерпретации его результатов и формирования заключения, а также проинструктированы в отношении обращения с отходами. Кроме того, необходимо внедрить меры для борьбы с распространением инфекции. 2. Для выявления параметров продукта, не удовлетворяющих критериям эффективности, крайне важно проведение пострегистрационного и регулятивного надзора, что является важным требованием для производителей. Система здравоохранения должна обеспечить проведение мониторинга и оценки мероприятий в области диагностики COVID-19 и наличие четких механизмов предоставления отчетности о возникающих проблемах (18). 3. Применение систем для выявления заболевания на основе инструментальных комплексов предполагает дополнительные требования к компетенциям пользователей (использование инструментария, калибровка по мере необходимости, требования к обслуживанию, условия эксплуатации) и наличие достаточной инфраструктуры, например, надежных источников электричества. 4. Отбор проб является одним из наиболее важных факторов, определяющих эффективность АГ-ДЭТ. Необходимо тщательное соблюдение инструкций по применению теста, а персонал, выполняющий отбор проб, должен быть обучен соответствующей методике. 5. Для каждого из тестов специально разработана методика обработки материала после взятия. Необходимо строгое соблюдение инструкций; применение иных реагентов, помимо указанных, не допускается (напр., использование воды или другой жидкости вместо буфера для разведения). 6. Должно быть обеспечено соблюдение операторами требований в области биобезопасности: применение средств индивидуальной защиты, пакетов для сбора биологически опасных отходов и надлежащей вентиляции имеет крайне важное значение (19). Методы В данных временных рекомендациях описаны случаи, в которых целесообразно и не целесообразно применение ДЭТ для определения антигена вируса SARS-CoV-2 в зависимости от минимальных характеристик эффективности тестов. Минимальные требования, предъявляемые к АГ-ДЭТ, были сформулированы в рамках формальной процедуры разработки целевого профиля продукции, используемой для решения приоритетных диагностических задач по определению вируса SARS-CoV-2 (20). В их основу положены актуальные представления о динамике выделения вируса и его способности к распространению в популяции с течением времени, а также о возможных преимуществах масштабного тестирования на ранних этапах. В рецензированных статьях, а также опубликованных рукописях, размещенных в базах данных PubMed и medRxiv, авторами проведен поиск информации в отношении точности тестов, выполняемых у постели больного/ по месту оказания помощи, для быстрого определения антигенов вируса SARS-CoV-2. Найден один систематический обзор, посвященный точности диагностических тестов (21). Кроме того, в ВОЗ в конфиденциальном порядке поступили неопубликованные независимые отчеты об эффективности двух АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2. Обзор временных рекомендаций был проведен участниками Сети референс-лабораторий ВОЗ для тестирования на COVID-19, а также членами Экспертной группы по целевому профилю продукции для диагностики COVID-19 и другими внешними экспертами. Авторам известно об ограничениях имеющихся фактических сведений. К их числу относится малый размер выборки; асимметричное распределение Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -7- выборки, производимой на основании предполагаемого наличия или отсутствия инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2; а также недостаточный объем сведений о наличии симптомов инфекции или времени, прошедшем от момента дебюта симптомов, в исследованиях, посвященных валидации тестов. Кроме того, возможность обобщения рекомендаций ограничена недостаточным объемом данных, касающихся случаев бессимптомного течения заболевания, применения тестов не в соответствии с инструкцией производителя, а также сравнительных параметров различных тестов при использовании в лаборатории и у постели больного/ по месту оказания помощи. Тем не менее, авторы пришли к выводу, что при использовании на ранних стадиях заболевания (в первые 5–7 дней, когда вирусная нагрузка и риск распространения заболевания наиболее высоки) некоторые АГ-ДЭТ, по-видимому, удовлетворяют минимальным критериям эффективности либо обеспечивают достижение более высоких показателей. Представляется, что усилия по прерыванию цепочек передачи инфекции за счет масштабного тестирования с использованием ДЭТ для определения антигена вируса более предпочтительны по сравнению с полным отсутствием тестирования либо проведением тестов, которые, ввиду длительного времени выполнения или риска ложноотрицательных результатов у пациентов с низкой вирусной нагрузкой, не могут быть положены в основу мер инфекционного контроля. Эффективность тестов Эффективность АГ-ДЭТ определяется чувствительностью и специфичностью тестов, направленных на выявление инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, по сравнению с референсным стандартом, которым является МАНК (как правило ОТ-ПЦР-РВ). Чувствительность – это доля случаев, в которых с помощью испытуемого АГ-ДЭТ определен положительный результат, от числа случаев, в которых положительный результат определен с помощью референсного стандарта (МАНК), в процентном выражении. Специфичность – это доля случаев, в которых с помощью испытуемого АГ-ДЭТ определен отрицательный результат, от числа случаев, в которых отрицательный результат определен с помощью референсного стандарта (МАНК), в процентном выражении. Распространенность заболевания в исследуемой группе населения в значительной мере определяет прогностическую ценность положительного или отрицательного результата теста (см. приложение 1). Таким образом, клиническая значимость положительного или отрицательного результата теста будет определяться мерами, которые приняты после получения результатов теста и их интерпретации с учетом распространенности заболевания в конкретной местности. В целом, чем выше распространенность инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 в испытуемой популяции, тем выше вероятность того, что у человека с положительным результатом теста действительно имеется COVID-19. Чем ниже распространенность заболевания в определенной группе населения, тем выше вероятность того, что у пациента с отрицательным результатом теста нет заболевания, см. приложение 1. Например, если распространенность в популяции активной инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, составляет 1%, прогностическая ценность положительного результата, полученного в тесте даже с 99% специфичностью, будет неудовлетворительной, так как в половине случаев все положительные результаты будут ложноположительными. Роль ДЭТ для определения антигенов в ведении случаев заболевания и эпиднадзоре за COVID-19 Возможность применения АГ-ДЭТ может быть рассмотрена в странах или районах, в которых зарегистрирована широкая циркуляция вируса среди населения, система здравоохранения испытывает перегрузку, и тестирование с использованием МАНК во всех или любых подозрительных случаях невозможно. Как и в случае с любыми другими диагностическими тестами, особенно теми, чувствительность и/ или специфичность которых не является оптимальной, для верной интерпретации результатов ДЭТ и принятия рациональных мер необходимо располагать сведениями о распространенности заболевания (согласно референсному стандарту) по данным эпиднадзора, так как эта информация определяет прогностическую ценность положительного и отрицательного результата ДЭТ (PPV и NPV соответственно, приложение 1). На рисунке 1 представлен предлагаемый порядок применения АГ-ДЭТ для ведения случаев заболевания COVID-19 в условиях широкой циркуляции вируса среди населения. В этих условиях претестовая вероятность заболевания COVID-19 (вероятность того, что у пациента имеется COVID-19, которая определена на основании эпидемиологических и клинических факторов до получения результатов тестирования) относительно высока, а положительный результат тестирования обладает высокой прогностической ценностью. Аналогичным образом, в условиях широкой циркуляции вируса среди населения Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -8- прогностическая ценность отрицательного результата ДЭТ может быть низкой даже в случае, если имеются эпидемиологические или клинические наблюдения, позволяющие обоснованно предполагать заражение или заболевание COVID-19. Рисунок 1. Алгоритм возможного применения ДЭТ для определения антигенов (соответствующих минимальным критериям эффективности) в условиях широкой циркуляции вируса среди населения и невозможности выполнения МАНК. NPV - прогностическая ценность отрицательного результата; PPV – прогностическая ценность положительного результата Таблица 1. Случаи, в которых на основании имеющейся информации применение АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2 не рекомендуется Применять АГ-ДЭТ для определения вируса SARS-CoV-2 не следует Пояснение У лиц, не имеющих симптомов заболевания, за исключением случаев контакта с пациентом, имеющим подтвержденный диагноз заболевания Претестовая вероятность заболевания (вероятность наличия заболевания у пациента, установленная на основании эпидемиологических факторов, анамнеза контактов и клинических данных) мала. В условиях полного отсутствия случаев заболевания или при наличии единичных случаев В этих обстоятельствах не рекомендуется выполнение АГ-ДЭТ для текущего эпиднадзора или ведения случаев заболевания. Положительные результаты тестирования с высокой вероятностью могут оказаться ложноположительными. Предпочтительно выполнение молекулярного тестирования. Не реализованы необходимые меры биобезопасности и профилактики инфекций и инфекционного контроля (ПИИК) В целях обеспечения безопасности работников здравоохранения сбор материала из дыхательных путей пациентов с подозрением на COVID-19 для выполнения любых тестов требует применения операторами перчаток, халата, маски и лицевого щитка либо защитных очков (19, 22, 23). Пациенты получают одинаковое лечение независимо от результатов тестирования В случае если пациенты с положительными и отрицательными результатами тестирования получают одинаковое лечение в связи с неизвестной или низкой прогностической ценностью положительного и/ или Пациент соответствует критериям определения случая COVID-19 Кто: подготовленный оператор Где: лечебное учреждение или другое специализированное заведение Работа с материалом Образец материала из дыхательных путей взят согласно инструкциям по применению и требованиям биобезопасности Образец материала использован для постановки АГ-ДЭТ теста Интерпретация результатов после визуальной или инструментальной регистрации Ведение пациента ВИРУС SARS-CoV-2 НЕ ВЫЯВЛЕН ВИРУС SARS-CoV-2 ВЫЯВЛЕН Направить пациента с умеренными/ тяжелыми симптомами в палату для пациентов, у которых наличие заболевания маловероятно (NPVот умеренной до высокой) и обследовать всех остальных заболевших на предмет других причин заболевания Рекомендовать пациентам с наличием симптомов респираторного заболевания соблюдать меры инфекционного контроля и повторить АГ-ДЭТ тест при сохранении или усугублении симптоматики. В случае признаков пневмонии следует взять материал из нижних дыхательных путей Госпитализировать пациентов с умеренными/ тяжелыми симптомами в палату для пациентов, у которых высока вероятность наличия заболевания, и направить лиц с легким течением инфекции на индивидуальную, либо когортную изоляцию сроком 10 дней от появления симптомов плюс 3 дня после исчезновения лихорадки, либо симптомов респираторного заболевания NPV высокая NPV низкая PPV умеренная/высокая Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -9- отрицательного результата, выполнение теста нецелесообразно. В целях скрининга в аэропортах или пунктах пересечения границы Распространенность COVID-19 среди различных групп лиц, совершающих поездки, будет разной, в связи с чем не представляется возможным определить прогностическую ценность положительного или отрицательного результата. После получения положительных и отрицательных результатов тестирования будет необходимо проведение контрольного тестирования с целью повышения прогностической ценности положительных и/ или отрицательных результатов и принятия соответствующих решений. В ходе скрининга перед донацией крови Корреляция положительного результата ДЭТ с наличием виремии непостоянна. Доноры крови, не имеющие симптомов инфекции, не соответствуют определению подозрительного на заболевание случая (24). Факторы, определяющие эффективность теста Как указано выше, эффективность ДЭТ для выявления антигенов определяется многими факторами. Таким образом, результаты исследования, проводимого в клинических условиях, могут быть различными. Необходимо принять во внимание следующее: • Факторы, имеющие отношение к пациенту, такие как время, прошедшее от начала заболевания, состояние иммунитета, тип образца (из верхних или нижних дыхательных путей), качество образца и особенности его обработки, в том числе условия хранения и разведение вирусологической транспортной средой. • Факторы, имеющие отношение к вирусу, включая концентрацию и продолжительность выделения вирусных антигенов, а также структурные различия целевого антигена и перекрестную реактивность с другими вирусами. • Специфические белки-мишени – ряд антигенов синтезируется в более высоких концентрациях по сравнению с другими, напр., белки нуклеокaпсида по сравнению со спайк-белками. • Аспекты, связанные с дизайном или качеством продукта, в том числе: - недостаточное качество антител или малая аффинность к белку-мишени; - неудовлетворительное качество упаковки либо воздействие высокой температуры и влаги, обусловленное нарушением условий транспортировки и/ или хранения, что может привести к разрушению антител, содержащихся в тестовом средстве; - неясные или неверные инструкции, которые могут отрицательно сказаться на выполнении теста. • Неудовлетворительное качество инструктажа или недостаточная компетентность оператора теста, что может приводить к ошибкам при подготовке к тесту ДЭТ для выявления антигенов, в ходе выполнения теста или при интерпретации результата, и в конечном счете – к ошибочным выводам. Дальнейшие обновления и информация, касающаяся конкретной продукции В целях систематического накопления новых сведений и подготовки обновленной информации ВОЗ тесно сотрудничает с группами, которые проводят оценку эффективности и рабочих характеристик находящихся в коммерческой продаже средств ДЭТ для выявления антигенов вируса SARS-CoV-2. Объем накопленных в настоящее время фактических данных в отношении эффективности и практического применения тестов недостаточен и не позволяет рекомендовать для использования продукцию какого-либо конкретного производителя. Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -10- Библиография 1. Foundation for Innovative New Diagnostics. SARS- CoV-2 Diagnostic Pipeline 2020 [Имеется по адресу: https://www.finddx.org/covid-19/pipeline/. 2. U.S. Food & Drug Administration. In Vitro Diagnostics EUAs 2020 [Имеется по адресу: https://www.fda.gov/ medical-devices/coronavirus-disease-2019-covid-19- emergency-use-authorizations-medical-devices/vitro- diagnostics-euas. 3. Agency PaMD. PMDA’s Efforts to Combat COVID-19 2020 [Имеется по адресу: https://www.pmda.go.jp/ english/about-pmda/0002.html. 4. Porte L, Legarraga P, Vollrath V, Aguilera X, Munita JM, Araos R, et al. Evaluation of novel antigen-based rapid detection test for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. Int J Infect Dis. 2020:S1201- 9712(20)30405-7. 5. Diao B, Wen K, Chen J, Liu Y, Yuan Z, Han C, et al. Diagnosis of Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection by Detection of Nucleocapsid Protein. medRxiv. 2020:2020.03.07.20032524. 6. Lambert-Niclot S, Cuffel A, Le Pape S, Vauloup- Fellous C, Morand-Joubert L, Roque-Afonso AM, et al. Evaluation of a Rapid Diagnostic Assay for Detection of SARS-CoV-2 Antigen in Nasopharyngeal Swabs. J Clin Microbiol. 2020;58(8). 7. Mertens P, De Vos N, Martiny D, Jassoy C, Mirazimi A, Cuypers L, et al. Development and Potential Usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip Diagnostic Assay in a Pandemic Context. Front Med (Lausanne). 2020;7:225-. 8. Blairon L, Mokrane S, Wilmet A, Dessilly G, Kabamba-Mukadi B, Beukinga I, et al. Large-scale, molecular and serological SARS-CoV-2 screening of healthcare workers in a 4-site public hospital in Belgium after COVID-19 outbreak. J Infect. 2020:S0163- 4453(20)30514-4. 9. Mak GC, Cheng PK, Lau SS, Wong KK, Lau CS, Lam ET, et al. Evaluation of rapid antigen test for detection of SARS-CoV-2 virus. Journal of clinical virology : the official publication of the Pan American Society for Clinical Virology. 2020;129:104500-. 10. Nagura-Ikeda M, Imai K, Tabata S, Miyoshi K, Murahara N, Mizuno T, et al. Clinical evaluation of self- collected saliva by RT-qPCR, direct RT-qPCR, RT-LAMP, and a rapid antigen test to diagnose COVID-19. J Clin Microbiol. 2020:JCM.01438-20. 11. Omi K, Takeda Y, Mori M. SARS-CoV-2 qRT-PCR Ct value distribution in Japan and possible utility of rapid antigen testing kit. medRxiv. 2020:2020.06.16.20131243. 12. Scohy A, Anantharajah A, Bodéus M, Kabamba- Mukadi B, Verroken A, Rodriguez-Villalobos H. Low performance of rapid antigen detection test as frontline testing for COVID-19 diagnosis. J Clin Virol. 2020;129:104455. 13. Weitzel T, Legarraga P, Iruretagoyena M, Pizarro G, Vollrath V, Araos R, et al. Head-to-head comparison of four antigen-based rapid detection tests for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. bioRxiv. 2020:2020.05.27.119255. 14. Weiss A, Jellingsø M, Sommer MOA. Spatial and temporal dynamics of SARS-CoV-2 in COVID-19 patients: A systematic review and meta-analysis. EBioMedicine. 2020;58. 15. Arons MM, Hatfield KM, Reddy SC, Kimball A, James A, Jacobs JR, et al. Presymptomatic SARS-CoV-2 Infections and Transmission in a Skilled Nursing Facility. New England Journal of Medicine. 2020;382(22):2081-90. 16. Bullard J, Dust K, Funk D, Strong JE, Alexander D, Garnett L, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from diagnostic samples. Clinical infectious diseases : an official publication of the Infectious Diseases Society of America. 2020:ciaa638. 17. Lee S, Kim T, Lee E, Lee C, Kim H, Rhee H, et al. Clinical Course and Molecular Viral Shedding Among Asymptomatic and Symptomatic Patients With SARS-CoV- 2 Infection in a Community Treatment Center in the Republic of Korea. JAMA Internal Medicine. 2020. 18. World Health Organization. Post-market surveillance of in-vitro diagnostics. 2015. 19. Всемирная организация здравоохранения. Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с новым коронавирусом (2019-nCoV). Имеется по адресу: https://apps.who.int/iris/handle/10665/331734. 20. World health Organization. COVID-19 Target product profiles for priority diagnostics to support response to the COVID-19 pandemic v.0.1 2020 [обновленная версия от 31 июля 2020 г. Имеется по адресу: https://www.who.int/ publications/m/item/covid-19-target-product-profiles-for- priority-diagnostics-to-support-response-to-the-covid-19- pandemic-v.0.1. 21. Dinnes J, Deeks JJ, Adriano A, Berhane S, Davenport C, Dittrich S, et al. Rapid, point‐of‐care antigen and molecular‐based tests for diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. CochraneDatabaseofSystematicReviews. 2020(8). 22. Всемирная организация здравоохранения. Профилактика инфекций и инфекционный контроль при оказании медицинской помощи пациентам с предполагаемой или подтвержденной коронавирусной инфекцией (COVID-19). Имеется по адресу: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/332879/WH O-2019-nCoV-IPC-2020.4-rus.pdf). 23. Всемирная организация здравоохранения. Рациональное использование средств индивидуальной защиты при коронавирусной болезни (COVID-19) и соображения применительно к ситуации их острой нехватки. Имеется по адресу: https://apps.who.int/iris/ bitstream/handle/10665/331695/WHO-2019-nCov- IPC_PPE_use-2020.3-rus.pdf. 24. WorldHealthOrganization. WHOCOVID-19 Casedefinition 2020 [обновленная версия от 7 августа 2020 г. Имеется по адресу: https://www.who.int/ publications/i/item/WHO-2019-nCoV- Surveillance_Case_Definition-2020.1. Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2 -11- Выражение благодарности Этот документ был подготовлен при участии: Внешних специалистов: Серджио Кармона, Фонд для инновационных и новых диагностических средств, Швейцария; Арлен Чуа, организация «Врачи без границ», Швейцария; Антонино Ди Каро, Национальный институт инфекционных заболеваний имени Ладзаро Спалланцани, Италия; Салли Хойват, организация "Partners in Diagnostics", США; Эрик Карлссон, Институт Пастера в Камбодже, Камбоджа; Розанна Пилинг, Лондонская школа гигиены и тропической медицины, Великобритания; Лео Пун, Университет Гонконга , Китай, ОАР Гонконг; Шанталь Реускен, Национальный институт общественного здравоохранения и окружающей среды, Нидерланды; Билл Родригес, Дрейпер Ричардс, фонд "Kaplan Foundation", США; Джилиан Сакс, Фонд для инновационных и новых диагностических средств, Швейцария; Энн фон Готтберг, Национальный институт инфекционных заболеваний, Южная Африка. Сотрудников ВОЗ: Джейн Каннингем и Марк Перкинс (руководители), Амаль Баракат, Голубинка Бошевкса, Лиза Картер, Лора Чернышова, Раду Коджокару, Джанет Виктория Диас, Судех Эхани, Белинда Луиза Херринг, Фрэнсис Инбанатан, Александр Ягупаров, Ярослава Максимович, Марко Марклевич, Яайро Мендес-Рико, Карен Нахапетян, Дмитрий Переяслов, Анна Перрошо, Ирена Прат, Артем Скрипник, Майя Станоевич, Уте Штрёхер, Мария Ван Керхов, Карин фон Эйе. Декларация интересов Все внешние специалисты, которые внесли вклад в подготовку документа, представили декларацию интересов в связи с возможным наличием конфликта интересов. Значимого конфликта интересов выявлено не было. ВОЗ продолжает внимательно следить за ситуацией на предмет любых изменений, которые могут повлиять на эти временные рекомендации. В случае изменения каких-либо факторов ВОЗ выпустит дополнительную обновленную информацию. В противном случае срок действия этих временных рекомендаций истекает через 2 года после даты публикации. © Всемирная организация здравоохранения 2020. Некоторые права защищены. Данная работа распространяется на условиях лицензии CC BY-NC-SA 3.0 IGO. WHO reference number: WHO/2019-nCoV/Antigen_Detection/2020.1 Роль иммунохимических экспресс-тестов для определения антигенов в диагностике инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2: временные рекомендации -12- Приложение 1 Приложение: прогностическая ценность положительного результата (PPV), прогностическая ценность отрицательного результата (NPV), количество тестов с истинно положительным результатом (TP), количество тестов с ложноположительным результатом (FP), количество тестов с истинно отрицательным результатом (TN), количество тестов с ложноотрицательным результатом (FN) в популяции, насчитывающей 10 000 человек, с распространенностью COVID-19 на уровне 5, 10, 20 и 30%, вычисленные на основании рекомендованных критериев эффективности: чувствительность 70, 80% и 90%, специфичность 98% и 100%. Примеры исследуемой группы населения, в которой распространяется инфекция Распространенность (%) Чувствительность Специфичность NPV PPV TP FP TN FN Количество лиц, имеющих заболевание Количество тестов с положительным результатом Всего Любой человек из общей популяции, имеющий симптомы инфекции; индексный пациент 5 70 98 98 60 350 238 9263 150 500 588 10000 70 100 98 88 350 48 9453 150 500 398 10000 80 98 99 63 400 238 9263 100 500 638 10000 80 100 99 89 400 48 9453 100 500 448 10000 90 98 99 65 450 238 9263 50 500 688 10000 90 100 99 90 450 48 9453 50 500 498 10000 Массовое распространение: пациенты с симптомами заболевания, поступающие в лечебные учреждения, контактные лица индексного пациента; учреждения и закрытые коллективы, в которых зарегистрированы подтвержденные случаи вспышек инфекции 10 70 98 97 76 700 225 8775 300 1000 925 10000 70 100 97 94 700 45 8955 300 1000 745 10000 80 98 98 78 800 225 8775 200 1000 1025 10000 80 100 98 95 800 45 8955 200 1000 845 10000 90 98 99 80 900 225 8775 100 1000 1125 10000 90 100 99 95 900 45 8955 100 1000 945 10000 Пациенты с симптомами заболевания, поступающие в специализированный центр; работники здравоохранения, имеющие симптомы заболевания или выявленные по результатам скрининга; лица, находящиеся в домах-интернатах 20 70 98 93 88 1400 200 7800 600 2000 1600 10000 70 100 93 97 1400 40 7960 600 2000 1440 10000 80 98 95 89 1600 200 7800 400 2000 1800 10000 80 100 95 98 1600 40 7960 400 2000 1640 10000 90 98 98 90 1800 200 7800 200 2000 2000 10000 90 100 98 98 1800 40 7960 200 2000 1840 10000 Работники здравоохранения/ сотрудники служб клининга; лица, проживающие в домах-интернатах 30 70 98 88 92 2100 175 6825 900 3000 2275 10000 70 100 89 98 2100 35 6965 900 3000 2135 10000 80 98 92 93 2400 175 6825 600 3000 2575 10000 80 100 92 99 2400 35 6965 600 3000 2435 10000 90 98 96 94 2700 175 6825 300 3000 2875 10000 90 100 96 99 2700 35 6965 300 3000 2735 10000

-1- - ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد ة السريعة باستخدام المقايسات المناعي 2-سارس إرشادات مبدئية 0202أيلول/سبتمبر 11 ة معلومات أساسي ، تستخدم المختبرات اختبارات تضخيم 91-كوفيدمنذ بداية جائحة التنسخ العكسي لتفاعل )، مثل مقايساتsTAANالحمض النووي ( )، للكشف RCP-TRr( البوليمراز المتسلسل في الوقت الحقيقي ، وهو الفيروس المسبَّب للمرض. 2-سارس-عن فيروس كورونا لاختبارات وفي العديد من البلدان، كان الوصول إلى هذا الشكل من ا أمرًا يطرح تحديات. والبحث جاٍر على قدم وساق لتطوير اختبارات تشخيصية موثوق بها ولكنها أقل تكلفة وأسرع للكشف عن . ويتم 2 -سارس-المستضدات المحددة للعدوى بفيروس كورونا تصميم اختبارات تشخيصية للكشف عن المستضدات بغية الكشف الناتجة بفعل تكرار 2-سارس-ناالمباشر عن بروتينات فيروس كورو الفيروس في إفرازات الجهاز التنفسي، وقد تم تطويرها سواء كفحوص مختبرية أو للاستخدام القريب من المرضى، أو ما يسمى الاختبارات التشخيصية السريعة. ويتسم مشهد التطور التشخيصي بالحيوية، سريعة حيث تقوم قرابة مائة شركة بتطوير أو تصنيع اختبارات ). 1( 2-سارس-للكشف عن مستضدات فيروس كورونا وتقدم هذه الوثيقة نصائح بشأن الدور المحتمل لـلاختبارات ) في TDR-gAالتشخيصية السريعة لكشف المستضدات ( والحاجة إلى اختيار الاختبارات بعناية. وتأتي 91-تشخيص كوفيد عة لكشف المعلومات المتعلقة بالاختبارات التشخيصية السري المستضدات في هذه الوثيقة استكماًلا للإرشادات التي تم تضمينها نصائح منظمة الصحة العالمية بشأن في الموجز العلمي المعنون " في نقاط 91-استخدام اختبار تشخيصي مناعي لمرض كوفيد بانتظام . وسيجري 0202نيسان/أبريل 8"، المنشور في الرعاية تحديث الإرشادات المتعلقة باستخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات كلما توفرت َبي ِّنات جديدة. وتستخدم معظم الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف مستضدات بواسطة شكل مبسط أسلوبًا للكشف المناعي الشطيري 91-كوفيد الجانبي ُيستخَدم عادًة لاختبارات فيروس العوز نسيابلاختبارات الا المناعي البشري والملاريا والأنفلونزا. وتتكون الاختبارات التشخيصية مستضدات عادًة من ُعَليبة بلاستيكية مع آبار السريعة لكشف ال للعينات والدوارئ، وشريط مِّسَندة من النتروسيلولوز، مع خط اختبار الأجسام -للأجسام المضادة المرتبطة محدد لمجمعات المستضدات المضادة المستهدفة المتقارنة، وخط تحكم للأجسام المضادة وفي حالة الاختبارات المرتبطة محدد للأجسام المضادة المتقارنة. ، تكون المادة 2-سارس-التشخيصية السريعة لفيروس كورونا المستهدفة بالتحليل غالبًا هي بروتين الُقفيصة المنو اة للفيروس، ويفضَّ ل بسبب وفرته النسبية. وعادًة ما تتوف ر جميع المواد المطلوبة عة اللوازم لإجراء الاختبار، بما في ذلك مواد جمع العينات، في مجمو التجارية، باستثناء جهاز للتوقيت. وبعد جمع عينة الجهاز التنفسي ووضعها على شريط الاختبار، يتم دقيقة 03دقائق إلى 01قراءة النتائج من قبل المَشغ ِّل في غضون مع أو بدون مساعدة من جهاز للقراءة. ومن شأن استخدام جهاز ر، مع الحد من التباين في للقراءة أن يوحد تفسير نتائج الاختبا تفسير المقايسات من قَِّبل مختلف المشغ ِّ لين، ولكنه يتطلب معدات إضافية. وتتطلب معظم الاختبارات المصن عة حالًيا عي نات من المسحات الأنفية أو البلعومية الأنفية، ولكن الشركات تجري دراسات مثل أنظمة جمع لتقييم أداء اختباراتها باستخدام أنواع عينات بديلة ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -2- اللعاب والسوائل الفموية والعينات، حتى يمكن توسيع خيارات الاستخدام وتسهيل إجراء اختبارات آمنة وفعالة. وعلى وجه العموم، فإن سهولة استخدام وسرعة زمن تجهيز الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات تتيح إمكانية توسيع نطاق إتاحة ل التأخير في التشخيص من خلال التحول إلى الاختبارات وتقلي الاختبارات اللامركزية للمرضى الذين يعانون من أعراض مبكرة. ويقابل بساطة تشغيل الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات انخفاض في الحساسية مقارنة باختبار تضخيم الحمض التشخيصية النووي. ولم يخضع سوى عدد قليل جدًا من الاختبارات لمراجعة 2-سارس-السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونا تنظيمية صارمة. ولم تحصل سوى أربعة اختبارات على إذن من إدارة الأغذية والعقاقير )AUE(الاستخدام في حالات الطوارئ ، ووافقت الوكالة اليابانية للأجهزة )ADF( في الولايات المتحدة اختبارين آخرين. وقدمت ثلاث شركات الصيدلانية والطبية على فقط وثائق باتجاه قائمة منظمة الصحة العالمية للأدوات (الطبية) ). 3 ،2) (LUEالمستخدمة في الطوارئ ( وقد اسُتمِّد ت البيانات المتعلقة بحساسية وخصوصية الاختبارات 2- سارس-التشخيصية السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونا ن دراسات تتفاوت من حيث التصميم والعلامات المتاحة حاليًا م التجارية قيد التقييم. وأظهرت أن الحساسية بالمقارنة مع اختبار تضخيم الحمض النووي في العينات المأخوذة من الجهاز التنفسي ة بنسبة عالية، بما باينلأنفية أو البلعومية) تبدو متالعلوي (المسحات ا يتم الإبلاغ باستمرار عن نوعية ) ولكن 4-31٪ (49-0يتراوح بين ). وعلى الرغم من أن هناك حاجة إلى مزيد من %79>( عالية الَبي ِّنات عن الأداء في الواقع الحقيقي وعن الجوانب التشغيلية، فإن الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات هي الأكثر وسية العالية احتماًلا للأداء بشكل جيد في المرضى ذوي الأحمال الفير ) مليلتر /المجينية الفيروسات نسخ 6 01> أو 52≤(قيم عتبة الدورة أيام قبل ظهور 3-1تظهر عادًة في المرحلة السابقة للأعراض ( التي - 5الأعراض) ومراحل الأعراض المبكرة للمرض (في غضون أول . ويتيح ذلك الفرصة للتشخيص )12، 51، 41أيام من المرض) ( 7 المبكر ووقف انتقال العدوى من خلال العزل المستهدف والتصنيف ). ويشار إلى 61خالطيها المقر بين (الفئوي للحالات الأكثر إعداًء وم أيام 7- 5أن المرضى الذين ُيحالون بعد ظهور الأعراض بأكثر من تقييمات جيدة التصميم والتنفيذ في مجموعات تمثيليةاستنادًا إلى 1 يكونون أكثر عرضة لانخفاض الأحمال الفيروسية، مع احتمال أعلى لظهور نتائج سلبية كاذبة باستخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات. وعلى الرغم من هذه القيود المتوقعة في الأداء فإن الاختبارات لمستضدات، إذا تم تنفيذها وتفسيرها التشخيصية السريعة لكشف ا بشكل صحيح، يمكن أن تلعب دورًا مهمًا في توجيه التدبير العلاجي للمرضى، واتخاذ القرارات المتعلقة بالصحة العمومية، وفي ترص د . وكحد أدنى، سوف يلزم أن تحدد الاختبارات التشخيصية 91-كوفيد الحالات أكبر السريعة لكشف المستضدات بشكل صحيح عدد من عالية نوعية ذات تكون وأن ) ٪08 ≥ بكثير مما قد تفو ته (حساسية ٪). واستنادًا إلى معايير الأداء هذه، تقترح هذه 001-79 ≥( جدا ً الإرشادات المبدئية عدة أدوار محتملة للاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات، وتطرح توصيات عامة بشأن اختيار الاختبارات والاعتبارات الرئيسية لتنفيذها. سريعة توصيات عامة بشأن استخدام الاختبارات التشخيصية ال 2-سارس-لكشف مستضدات فيروس كورونا يمكن استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف -1 التي تلبي متطلبات الأداء 2-سارس-مستضدات فيروس كورونا بـمقايسة مقارنة ً ٪، 79≥ ونوعية ٪08≥الدنيا المتمثلة في حساسية العدوى تشخيص أجل من النووي، الحمض تضخيم لاختبار مرجعية اختبار فيها يتوفر لا التي البيئات من مجموعة في الفيروس بهذا كان طول زمن التجهيز حائًلا دون تحقيق حيثما أو النووي، الحمض 1منفعة سريرية. ولتحسين الأداء، ينبغي أن ُيجرى الاختبار بواسطة الاختبارات ين التشخيصية السريعة لكشف المستضدات من قبِّ ََ ل مشغ ِّ لين مدرب ِّ أيام 7- 5في توافق صارم مع تعليمات الشركة المَصن ِّعة وخلال أول بعد ظهور الأعراض. تتضمن السيناريوهات المناسبة لاستخدام الاختبارات التشخيصية -2 :ما يلي 91-السريعة لكشف مستضدات كوفيد المشتبه بها في البيئات النائية 91-الاستجابة لفاشيات كوفيد "1" اختبار احوالمؤسسات والمجتمعات شبه المغلقة حيث لا يت ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -3- الحمض النووي على الفور. ويشار إلى أن النتائج الإيجابية للاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات من حالات ، ومن شأنها 91-كوفيدمشتبه فيها متعددة تشير بشدة إلى تفشي أن تتيح التنفيذ المبكر لتدابير مكافحة العدوى. وحيثما أمكن، ينبغي نقل جميع العينات التي تعطي نتائج إيجابية للاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات (أو على الأقل مجموعة فرعية) إلى مختبرات لديها قدرة على إجراء اختبارات تأكيدية. دعم استقصاءات الفاشية (مثًلا في المجموعات المغلقة أو "2" شبه المغلقة بما في ذلك المدارس ودور الرعاية والسفن السياحية والسجون وأماكن العمل والمهاجع، وما إلى ذلك). وفي فاشيات المؤكدة باختبار التضخيم النووي، يمكن استخدام 91-كوفيد ف المستضدات في فحص الاختبارات التشخيصية السريعة لكش الأفراد المعرضين للخطر وعزل الحالات الإيجابية بسرعة (وبدء جهود تتبع المخالطين الآخرين) وتحديد أولويات جمع العينات من الأفراد الذين تكون نتائج اختباراتهم التشخيصية السريعة سلبية لاختبار التضخيم النووي. بالأمراض في رصد الاتجاهات في معدلات الإصابة "3" المجتمعات المحلية، ولا سيما بين العمال الأساسيين والعاملين الصحيين أثناء الفاشيات أو في المناطق التي ينتشر فيها الانتقال المجتمعي على نطاق واسع حيث تكون القيمة التنبؤية الإيجابية والقيمة التنبؤية السلبية لنتيجة اختبار تشخيصي سريع 2كافية للتمك ن من مكافحة العدوى بفعالية. لكشف المستضدات في الحالات التي ينتشر فيها الانتقال المجتمعي على نطاق "4" واسع، يمكن استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة للكشف المبكر عن الحالات الإيجابية وعزلها في المرافق الصحية سجون ودور الرعاية وال 91-ومراكز/مواقع اختبارات كوفيد والمدارس وعلى مستوى العاملين في الخطوط الأمامية وفي مجال الرعاية الصحية، ولتتبع المخالطين. ويلاَحظ أن التدبير العلاجي الآمن للمرضى الذين تكون نتائج عيناتهم سلبية للاختبارات التشخيصية السريعة سيعتمد على أداء تلك (انظر 91-دالاختبارات وعلى الانتشار المجتمعي لكوفي أن تستبعد 91-المرفق). ولا يمكن للنتيجة السلبية للعدوى بكوفيد خطر ظهور نتائج إيجابية كاذبة في بيئات الانتشار شتد ي 2 إذا بلغ معدل %87المنخفض؛ والقيمة التنبؤية الإيجابية هي ، وبالتالي ينبغي تكرار 91-تماًما عدوى نشطة بكوفيد الاختبارات أو يفضل إجراء اختبارات تأكيدية (اختبار تضخيم )، خاصًة في المرضى 1الحمض النووي) كلما أمكن (الشكل الذين يعانون من أعراض. يمكن النظر في اختبار مخالطي الحالات عديمي الأعراض "5" حتى إذا لم يكن الاختبار التشخيصي السريع لكشف المستضدات مرخ ًصا به لهذا الاستخدام على وجه التحديد، حيث ثبت أن الحالات غير الأعراضية ذات أحمال فيروسية مشابهة لحالة، )، على الرغم من أنه في تلك ا 71للحالات الأعراضية ( لا ينبغي أن يزيل اختبار تشخيصي سريع سلبي لكشف المستضدات أحد المخالطين من متطلبات الحجر الصحي. من أجل الإدخال الأو لي لـلاختبارات التشخيصية السريعة لكشف -3 المستضدات في الاستخدام السريري، ينبغي للبلدان أن تنظر في حاليًا اختبارات تأكيدية لاختبار اختيار بعض البيئات التي تتوفر فيها تضخيم الحمض النووي بحيث يمكن لأطقم العاملين اكتساب الثقة في المقايسات، وتأكيد أداء الاختبار التشخيصي السريع المختار، واستكشاف أي مشكلات تواجه التنفيذ. وأينما سيتم استخدام اختبار المرضى الذين تضخيم الحمض النووي لإجراء اختبارات تأكيدية في تم فحصهم باستخدام اختبار تشخيصي سريع لكشف المستضدات، يتعين جمع عينات الاختبارين في نفس الوقت تقريبًا، أو على الأكثر في غضون فترة أقل من يومين. في الحالات التي تكون فيها الاختبارات التأكيدية باستخدام - 4 أي مؤشرات على اختبار تضخيم الحمض النووي غير ممكنة، فإن أن النتائج قد تكون غير صحيحة ينبغي أن تثير الشكوك حول الصلاحية. ومن الأمثلة على ذلك المرضى الذين تكون نتائج - اختباراتهم إيجابية ولكن لديهم متلازمة سريرية لا تتفق مع كوفيد ، أو المرضى الذين ثبتت إيجابية اختباراتهم وتم اكتشافهم في 91 دل انتشار منخفض (حيث تنخفض القيمة التنبؤية بيئة ذات مع للاختبار الإيجابي ويرتفع خطر ظهور نتائج إيجابية كاذبة). وقد تشمل إشارات التحذير الأخرى المرضى الذين تكون نتائج اختباراتهم سلبية ولكن لديهم متلازمة كلاسيكية، أو هم من المخالطين عن استيفاء معايير الأداء الدنيا؛ وترتفع إلى ة حالفي و % 01الانتشار %.02إذا كان معدل الانتشار %39 ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -4- ذات معدل انتشار مرتفع. وفي كثب لحالة أو يتم اختبارهم في بيئة مثل هذه الحالات، ينبغي إيلاء الاعتبار لتكرار الاختبار، خاصًة إذا كان هناك أيضًا أي التباس بشأن النتيجة المرئية (نطاقات باهتة) أو كفاية أخذ العينات. لا يوصى باستخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف -5 ئات التي يكون معدل الانتشار المتوقع المستضدات في البيئات أو الف للمرض فيها منخفضًا (مثل الفحص عند نقاط الدخول، التبرع بالدم، الجراحات الاختيارية)، خاصًة عندما لا تكون الاختبارات التأكيدية بواسطة اختبار تضخيم الحمض النووي متاحة بسهولة. ولن يكون ثر من دراسات عالية هذا الاستخدام ممكنًا حتى تتوفر بيانات أك لواحدة أو أكثر من مجموعات %99<الجودة تؤكد نوعية عالية اللوازم التجارية للاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات. الاختبارات لأغراض الشراء والتنفيذ: نتقاءا بالرغم من محدودية عدد الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف وقع المتاحة تجاريًا، من المت 2-سارس-كورونامستضدات فيروس ة الجودة والأداء إلى الأسواق قريبًا. باينأن تدخل منتجات متعددة مت وكما لوحظ في المقدمة، فإن معظم الاختبارات التشخيصية السريعة على النطاق التجاري 2-سارس-لكشف مستضدات فيروس كورونا شرات من الذهب جانبي تقليدي مع مؤ بتستخدم شكل انسيا الغرواني أو صبغة مرئية أخرى. وتستخدم أنظمة عديدة، بما في ذلك بعض الأنظمة التي تمت الموافقة عليها من قبل إدارة الأغذية والعقاقير الأمريكية في إطار الوحدة الحسابية الأوروبية، مؤشرات راءة بديلة قد تؤدي إلى تعزيز الحساسية ولكنها تتطلب جهاًزا معيًنا لق نتائج الاختبار وتفسيرها. ويرد عدد من العوامل التي يجب مراعاتها عند اختيار الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات لاستخدامها في السيناريوهات المعروضة أعلاه، في قسم التوصيات. وتشمل هذه العوامل الجوانب التالية: المستخدمة للتحقق من صحة جودة البيانات المتوفرة -1 . ينبغي النظر في مصدر البيانات (رعاية مستقلة الاختبار مقابل رعاية داخلية من قَِّبل الشركات) وكذلك تصميم الدراسة (مثل المعيار المرجعي المستخدم، ونوع العينة، والتأخر بين جمع العينات وتنفيذ الاختبار، وعدد الأيام لأشخاص موضوع الدراسة منذ ظهور الأعراض)، وعدد ا وبما أن تركيز الفيروس في المقيدين، وبيئة التسجيل. ، فإن العينات هو أكبر مؤشر ينبئ بحساسية الاختبار اختيار المرضى ومواقع الدراسة يتسم بأهمية حاسمة. وتتفوق الدراسات السريرية الاستباقية عمومًا على البيانات المأخوذة من الدراسات الاستعادية. وتتمتع دراسات ذات طابع مستقل عن رعاية الشركات بقيمة خاصة إذا كانت الدراسات جيدة الأداء. . ينبغي استعراض البيانات التي تبين فاد عنهالأداء الم -2 أداء اختبار تشخيصي سريع بعناية قبل بدء عملية الشراء. وبالنظر إلى الانخفاض النسبي في معدل انتشار حالات حتى في 2-سارس-العدوى النشطة بفيروس كورونا البيئات التي تشهد انتقاًلا مجتمعيًا، فإن النوعية العالية %) ضرورية 99% وكشكل مثالي >79(كحد أدنى > لتجنب الكثير من النتائج الإيجابية الكاذبة. وسوف تعتمد الحساسية على حالة المرضى موضع الدراسة (درجة قضية منذ ظهور الأعراض، وما إلى المرض، الأيام المن ذلك) وكذلك جودة المنتج، ولكن ينبغي أن تصل كحد حساسية عن المفيد التقييم وينم . ٪08 ≥أدنى إلى )tC( دورة عتبة لديهم تقل الذين المرضى في الاختبار سي في الوقت العك بالانتساخ المتسلسل البوليميراز تفاعل )، 03أو 82الحقيقي عن قيمة محددة (على سبيل المثال لأنه ُيتوقع أن يكون الفيروس وفيرًا في عينات الجهاز التنفسي عندما يقع الاختبار في هذا النطاق، وأن حساسية في بعض % 09الاختبار عالية في المقابل (تتجاوز المهم ). ومن11، 4الدراسات المنشورة وغير المنشورة) ( أن نلاحظ، مع ذلك، أن قيم عتبة الدورة عند تركيز ُمدَخل معي ن من الحمض النووي الريبي المستهدف تختلف بين مقايسات تفاعل البوليميراز المتسلسل بالانتساخ العكسي في الوقت الحقيقي وليست كمي ة بصورة بحتة. . ينبغي أن ُتشترى جودة التصنيع والوضع التنظيمي -3 الاختبارات من ُمَصنِّ عين يعملون في إطار نظام لإدارة )، وعلى الأقل 58431 OSIالجودة (مثل معيار أيزو موافقة تنظيمية محلية أو حق في البيع الحر يمنحه بلد ب الصنع. ويتعين أن تخضع الاختبارات التشخيصية السريعة، كما هو الحال في جميع عمليات التشخيص المختبرية المعدة للاستخدام السريري، لمراجعة تنظيمية صارمة وشفافة. ويجب أن تتوفر وقت الشراء موافقة أو ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -5- مية صارمة و/أو قائمة صادرة عن إذن من هيئة تنظي منظمة الصحة العالمية للاستخدامات في حالات الطوارئ. . تدخل على الجودة إضافيةالقدرة التصنيعية وأدلة -4 شركات جديدة كثيرة ليس لها تاريخ من النجاح فى تصنيع وبيع ودعم أجهزة التشخيص المختبري إلى سوق الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف مستضدات فيروس . وينبغي أن ينظر المشترون في 2-سارس-كورونا مجموعة المنتجات الأخرى التي تقدمها الشركة (وخاصًة الجانبي)، وما هي الموافقات التنظيمية اختبارات الانسياب التي لديها لمنتجات التشخيص في غير حالات الطوارئ، وقدرتها على التصنيع والمراقبة في مرحلة ما بعد الطرح في الأسواق. وبمقدور العديد من الشركات تصنيع نماذج أولية عالية الجودة أو اختبارات مكتملة بحجم منخفض وبة عند توسيع نطاق التصنيع لتلبية ولكنها قد تواجه صع الاحتياجات العالمية. . ينبغي إيلاء الاعتبار لقدرة الجهة التوزيع والدعم التقني -5 المور ِّدة على التوزيع ودعم المنتجات، ولا سيما في البلدان ذات الدخل المنخفض والمتوسط. وينطبق هذا بشكل مثل خاص على الاختبارات التي تتطلب معدات إضافية أجهزة القراءة. . القدرة على ظروف الشحن والتخزين والعمر الافتراضي -6 تحمل الإجهاد الحراري ووجود فترة صلاحية طويلة أمران حاسمان لسهولة استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات. ومع ظهور منتجات جديدة، يجب قرار تقدير العمر الافتراضي على أساس دراسات الاست المعجل (عادًة عند درجات حرارة أعلى)، ولكن يجب أن شهًرا على 81-21يكون العمر الافتراضي المستهدف درجة مئوية. 04درجة مئوية وبشكل مثالي 03الأقل عند ومن شأن اشتراط وجود سلسلة تبريد لأغراض الشحن و/أو التخزين أن يزيد كثيرًا من تكلفة وتعقيد عمليتي الشراء التوزيع.و . تختلف الاختبارات التشخيصية متطلبات جمع العينات -7 في 2-سارس-السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونا متطلباتها لنوع العينة، وعدد خطوات المعالجة، والحاجة إلى دقة التوقيت، والأجهزة وتفسير النتائج، مما سيؤثر على مدى التدريب والإشراف المطلوَبين. ولهذا السبب، إن تقييم سهولة الاستخدام هو أحد الاعتبارات المهمة إلى ف جانب أداء الاختبار. . لا تتضمن محتويات محتويات مجموعة لوازم الاختبار -8 مجموعة اللوازم القياسية بالضرورة كل ما يلزم لإجراء ومراقبة جودة الاختبار، ويجب التحقق من ذلك قبل الشراء. صية السريعة لكشف والعديد من الاختبارات التشخي المتاحة تجاريًا 2-سارس-مستضدات فيروس كورونا يستخدم أداة للقراءة. . تختلف تكلفة الاختبارات وفًقا للاختبار تكلفة الاختبار -9 والحجم الذي سيتم شراؤه. وبشكل عام، يجب أن تكون أقل تكلفة من اختبارات تفاعل البوليمراز التسلسلي. ويجب اليف النقل، وتعريفات الاستيراد، أيضًا النظر في تك والتخزين، وتدريب المستعملين النهائيين (والإشراف عليهم)، وأنشطة اختبار الجودة بعد الشراء اللازمة لدعم تنفيذ الاختبارات التشخيصية السريعة على نحو جيد. . ينبغي أن توافر واكتمال ووضوح تعليمات الاستخدام -01 وأن تحتوي على رسوم تكون هذه التعليمات واضحة، إيضاحية، وأن تكون سهلة الاستعمال بالنسبة لغير الأخصائيين المختبريين. الاعتبارات الخاصة بالتنفيذ: على الرغم من أن إجراء الاختبارات التشخيصية السريعة -1 لكشف المستضدات قد يكون أسهل بكثير من اختبار تضخيم الحمض النووي، فإنها تتطلب على أي حال ات باع الإجراءات التي يوصي بها الموردون بدقة مع إيلاء الاهتمام الواجب للتوثيق، وتنفيذ خطوات تعتمد على الوقت على الحجم، وظروف التخزين، والعمر أو تتوقف الافتراضي وإدارة المعدات والمخزون. ويجب أن يتلقى جميع مشغلي الاختبارات تدريبًا على جمع العينات، والسلامة البيولوجية ذات الصلة، وإجراء الاختبار وتفسير النتائج والإبلاغ عنها، وكذلك في مجال إدارة النفايات. ير لمراقبة الجودة. كما يلزم اتخاذ تداب تعد المراقبة بعد الطرح في الأسواق، مقترنًة بإشراف -2 تنظيمي، أمرًا بالغ الأهمية لاكتشاف العيوب في أداء المنتج، وهي مطلب مهم بالنسبة للشركة المصن عة. وينبغي أن يكفل النظام الصحي وجود رصد وتقييم لأنشطة ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -6- واضحة وآليات 91-الاختبارات التشخيصية لكوفيد ). 81للإبلاغ عن المشاكل ( يستلزم استخدام نظم الكشف بالأجهزة متطلبات تدريب -3 إضافية (استخدام الأجهزة، والمعايرة حسب الاقتضاء، ومتطلبات الخدمة، وظروف التشغيل) وبنية تحتية كافية، مثل مصدر موثوق للكهرباء. ؤثر جمع العينات هو واحد من العوامل الأكثر أهمية التي ت -4 على أداء الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات. وينبغي اتباع التعليمات المتعلقة بالاستخدام بعناية، كما يتعين تدريب أي ِّ من القائمين بجمع العينات على المنهجية. كلٌّ من هذه الاختبارات له أسلوب محدد لمعالجة العينة -5 قة، وعدم استخدام بعد جمعها. ويجب اتباع التعليمات بد أي كواشف بديلة (مثل الماء أو سائل آخر بدًلا من دارئة التخفيف/المزج). ومن -يجب وضع متطلبات للسلامة البيولوجية للمشغ لين -6 الضروري توفير معدات للحماية الشخصية وحقيبة ). 91للنفايات التي تشكل مخاطر بيولوجية وتهوية جيدة ( المت بعة الأساليب تحدد وثيقة الإرشادات المبدئية هذه سيناريوهات حالات الاستخدام وعدم الاستخدام المحتملة فيما يخص الاختبارات التشخيصية استنادًا إلى 2-سارس-السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونا حد أدنى لمعايير الأداء. وقد تم تحديد الحد الأدنى من متطلبات بالاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات الأداء الخاصة من خلال عملية رسمية لوضع موجز لتوصيف المنتجات المستهدفة ) من أجل عمليات التشخيص ذات الأولوية لفيروس sPPT( ). وقد تمت الاستنارة في ذلك بفهم متطور 02( 2-سارس-كورونا لفوائد المتوقعة للديناميات الزمنية لذرف وإمكانية انتقال الفيروس وا من الاختبارات السابقة والموسعة. وجرى البحث في قواعد بيانات عن التقارير الُمَحكَّمة والمنشورة على vixRdemو deMbuP السواء، وتقارير قبل الطبع عن دقة الاختبارات السريعة لكشف في نقاط الرعاية/بالقرب من 2-سارس-مستضدات فيروس كورونا د استعراض منهجي واحد لدقة الاختبارات المريض. وتم تحدي ). وبالإضافة إلى ذلك، جرى إطلاع منظمة 12التشخيصية ( الصحة العالمية بشكل سري على تقارير مستقلة غير منشورة عن أداء اثنين من الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف مستضدات . وتم استعراض الإرشادات المبدئية من 2-سارس-فيروس كورونا قَِّبل أعضاء شبكة المختبرات المرجعية التابعة لمنظمة الصحة ، وأعضاء فريق المنظمة المعني 91-العالمية بشأن كوفيد باستعراض موجز توصيف المنتجات المستهدفة لعمليات التشخيص، فضًلا عن خبراء خارجيين آخرين. ونحن على َبي ِّنة من أوجه القصور في الأدلة المتاحة. ويشمل ذلك صغر أحجام العينات، وعدم تماثل أخذ العينات على أساس الوجود ، ونقص 2-سارس-أو الغياب المتوقع للعدوى بفيروس كورونا التفاصيل في الدراسات الهادفة إلى التحقق من صحة الاختبارات المتعلقة بحالة الأعراض أو الوقت المنقضي بدءًا من ظهور ص البيانات المستمدة من الأعراض. وبالإضافة إلى ذلك، فإن نق الحالات العديمة الأعراض، واستخدام اختبارات خارج تعليمات المص ن ِّعين لاستعمال الاختبارات وإجرائها في المختبرات مقابل سياقات نقاط الرعاية/يالقرب من المريض، يحد من قابلية التوصيات للتعميم. ومع ذلك، فقد تم الخلوص إلى أن بعض الاختبارات تشخيصية السريعة لكشف المستضدات من المرجح أن تفي على ال الأقل بالحد الأدنى من متطلبات الأداء في المرحلة المبكرة من المرض بل وقد تتجاوزها (في غضون الأيام الخمسة إلى السبعة الأولى، عندما تكون الأحمال الفيروسية ومخاطر انتقال العدوى على لاختبارات لإتاحة القدرة على وقف الانتقال أُشد ِّ ها). وُيعتَبر توسيع ا من خلال استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة للمستضدات أكثر فائدًة من عدم الاختبار، أو إجراء اختبارات لا يمكن الاستنارة بها في تدابير مكافحة العدوى بسبب طول زمن التجهيز بصورة لمرضى ذوي الأحمال بالغة أو خطر ظهور نتائج سلبية كاذبة في ا الفيروسية المنخفضة. أداء الاختبارات يحدَّ د أداء الاختبار التشخيصي السريع للمستضدات بدلالة حساسية 2- سارس-ونوعية اختبار الكشف عن العدوى بفيروس كورونا مقارنًة بالمعيار المرجعي، أي اختبار تضخيم الحمض النووي باستخدام إنزيم النسخ العكسي (عمومًا تفاعل البوليميراز التسلسلي في الوقت الحقيقي). هي النسبة المئوية للحالات التي تثبت إيجابيتها وفق الحساسية معيار مرجعي لاختبار تضخيم الحمض النووي والتي ُتكَتَشف ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -7- باعتبارها إيجابية بالاختبار التشخيصي السريع قيد التقييم لكشف المستضدات. هي النسبة المئوية للحالات التي تثبت سلبيتها وفق معيار النوعية مرجعي لاختبار تضخيم الحمض النووي والتي ُتكَتَشف باعتبارها سلبية بالاختبار التشخيصي السريع قيد التقييم لكشف المستضدات. ويؤثر معدل انتشار المرض في المجتمع قيد الاختبار تأثيرًا قويًا ). 1 المرفق نتيجة إيجابية أو سلبية (انظرعلى القيمة التنبؤية ل وبالتالي، فإن القيمة السريرية لنتيجة اختبار إيجابية أو سلبية ستعتمد على ماهية الإجراء المتخذ على أساس نتيجة الاختبار عند تفسيرها في سياق الانتشار المحلي. - وبشكل عام، كلما ارتفع معدل انتشار العدوى بفيروس كورونا في المجموعة موضع الاختبار، كلما كان من الأرجح أن 2-سارس . 91-يكون الشخص الذي ثبتت إيجابية اختباراته مصابًا بكوفيد وكلما انخفض معدل انتشار المرض في المجتمع، كلما كان من الأرجح ألا يكون المريض الذي ثبتت سلبية اختباراته مصابًا عندما يكون معدل بالمرض، انظر المرفق. وعلى سبيل المثال، في المجتمع 2-سارس-انتشار العدوى النشطة بفيروس كورونا ستكون له قيمة %99، فإنه حتى اختبار محدد النوعية بنسبة %1 تنبؤية موجبة ضعيفة، لأن نصف جميع النتائج الإيجابية ستكون إيجابية كاذبة. أدوار الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات في 91-بير العلاجي للحالات وترصد كوفيدالتد يمكن النظر في استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات في البلدان أو المناطق التي تشهد انتقاًلا مجتمعيًا واسع الانتشار، حيث قد يكون النظام الصحي مثقًلا بأعباء مفرطة، وحيث قد يتعذر اختبار جميع أو أي ٍ من الحالات المشتبه فيها باختبار لنووي. وكما هو الحال في جميع الاختبارات تضخيم الحمض ا التشخيصية، وخاصًة تلك التي تكون حساسيتها و/أو نوعيتها دون المستوى الأمثل، من أجل تفسير نتائج الاختبار التشخيصي السريع يجب تقدير معدل انتشار المرض بشكل صحيح والعمل بناًء عليها، ، لأن هذا يحدد القيم رصد(وفقًا للمعيار المرجعي) استنادًا إلى الت التنبؤية الموجبة والسالبة (على التوالي) للاختبارات التشخيصية العملية المقترحة 1). وتظهر في الشكل 1 السريعة (المرفق لاستخدام اختبار تشخيصي سريع لكشف المستضدات في التدبير عند وجود انتقال مجتمعي واسع 91-العلاجي لحالات كوفيد وفي مثل هذا السياق، فإن احتمال الإصابة بمرض الانتشار. قبل 91-قبل الاختبار (احتمال إصابة المريض بـكوفيد 91-كوفيد معرفة نتائجه، استناًدا إلى العوامل الوبائية والسريرية) يكون مرتفعًا نسبًيا، ونتائج الاختبار الإيجابية ذات قيمة تنبؤية عالية. وبالمثل، عي، قد تكون القيمة التنبؤية لسلبية نتيجة في بيئة انتقال مجتم الاختبارات التشخيصية السريعة منخفضة، حتى عندما تكون هناك أو 91-مؤشرات وبائية أو سريرية قوية على التعرض لمرض كوفيد الإصابة به. ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -8- مخطط انسيابي يوضح الاستخدام المحتمل لـلاختبارات التشخيصية السريعة القائمة على المستضدات (التي تفي بالحد الأدنى -1الشكل ضخيم النووي.لمعايير الأداء) في بيئات الانتقال المجتمعي الواسع الانتشار وفي حالة عدم توفر القدرة على إجراء اختبار الت قيمة تنبؤية موجبة – VPPقيمة تنبؤية سالبة؛ -VPN ، استنادًا 2-سارس-الحالات التي لا ينبغي فيها استخدام الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونا -1الجدول إلى المعلومات المتاحة حاليا ً التشخيصية السريعة لكشف لا ت ستخَدم الاختبارات :2-سارس-مستضدات فيروس كورونا التفسير في الأفراد الذين لا يعانون من أعراض ما لم يكن الشخص مخالطًا لحالة مؤكدة ، في اتالاختبار إجراء ، قبل تللاختبار (الاحتمالا ةالسابق تالاحتمالاانخفاض الوبائيات، مخالطة الحالة، من أن يكون المريض مصابًا بالمرض على أساس النتائج السريرية). 2- سارس-الاختبارات السريعة لكشف مستضدات فيروس كورونالا ُينَصح ب متفرقة مجرد حالات حالات صفرية أو حيثما توجد للحالات في هذا السياق. ومن لأغراض الترصد الروتيني أو التدبير العلاجي إجراء فض لي المرجح أن تكون النتائج الإيجابية للاختبار إيجابية زائفة. و جزيئية. اختبارات تدابير مناسبة للسلامة البيولوجية ي حالة عدم وجودف )CPIوللوقاية من العدوى ومكافحتها ( من أجل حماية العاملين الصحيين، يتطلب جمع عينات من الجهاز التنفسي أن يرتدي 91-لأي اختبار من المرضى الذين ُيشتَبه في إصابتهم بكوفيد ، 22 ،91رات واقية (المشغ لون قفازات أو رداًء أو كمامة أو واقًيا للوجه أو نظا ). 32 2-سارس-تم كشف فيروس كورونا 2-سارس-لم يتم كشف فيروس كورونا قيمة تنبؤية سالبة منخفضة ة موجبة معتدلة/مرتفعةقيمة تنبؤي ة سالبة مرتفعةقيمة تنبؤي بل مدر ن: مشغ م موقع معين آخر: مرفق صحي أو أين ناتإدارة العي التدبير العلاجي للمرضى جهاز بواسطةيتم تفسير النتائج يدويا أو الجهاز التنفسي وفقا للتعليمات الخاصة بالاستخدام ومتطلبات السلامة من نة يتم جمع عي البيولوجية مرضى مستوفون لتعريف منظمة الصحة العالمية 91-كوفيدلحالة نةاختبار تشخيصي سريع يتم تنفيذه باستخدام عي إدخال المرضى الذين يعانون من أعراض حادة معتدلة إلى جناح للحالات الخفيفة لمدة ترابيالاحتمالات المرتفعة، والعزل المنزلي أو الأ ى أو م الح خالية منأيام 3أيام بعد ظهور الأعراض بالإضافة إلى 01 ةتنفسي العراض الأ إحالة المريض الذي يعاني من أعراض معتدلة/شديدة إلى جناح ة سالبة متوسطة إلى مرتفعة) الاحتمالات المنخفضة (قيمة تنبؤي الأخرى ي ةب المرضسباالأوالتعامل مع جميع الحالات لكشف لمرضى الذين يعانون من أعراض تنفسية بتطبيق لصح إسداء الن ممارسات مكافحة العدوى والنظر في تكرار الاختبار التشخيصي . هارالأعراض أو تطو اراستمر حالالسريع لكشف المستضدات، شواهدالجهاز التنفسي السفلي إذا كانت المن استهداف عينة ة متسقة مع التهاب رئويالسريري ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -9- التدبير العلاجي للمريض بناًء على عدم حدوث تغيير في نتيجة الاختبار إذا كان سيتم التعامل مع المرضى الذين ُيظهِّ رون نتائج إيجابية وسلبية للاختبار أو بنفس الطريقة بسبب قيمة تنبؤية موجبة و/أو قيمة تنبؤية سالبة غير معروفة منخفضة، إذن فلا فائدة من الاختبارات. الفحص عند نقاط الدخول بالمطارات أو على لأغراض الحدود إلى حد كبير بين المسافرين، وبالتالي لا يمكن 91-سيتباين معدل انتشار كوفيد تحديد قيمة تنبؤية موجبة وقيمة تنبؤية سالبة لنتائج الاختبار. وسوف تتطلب القيمة التنبؤية ت إجراء اختبارات تأكيدية لزيادة الاختبارات الإيجابية والسلبية الموجبة والقيمة التنبؤية السالبة لاتخاذ القرارات. لن يرتبط ظهور نتيجة إيجابية لاختبار تشخيصي سريع بالضرورة بوجود الفحص قبل التبرع بالدم عمليات في فيروسات بالدم. ولا يفي المتبرعون بالدم عديمو الأعراض بتعريف الحالة المشتبه ). 42فيها ( العوامل المؤثرة على أداء الاختبار العوامل على أداء كما ُذكَِّر أعلاه، قد يؤثر العديد من الاختبارات التشخيصية السريعة لكشف المستضدات. وبالتالي، قد تكون النتائج في البيئات السريرية متباينة. :وينبغي أن يؤخذ في الاعتبار ما يلي العوامل الخاصة بالمريض مثل الوقت المنقضي منذ بداية • العلوي المرض ونوع عينة حالة المناعة (الجهاز التنفسي أو السفلي)، الجودة والتجهيز، بما في ذلك ظروف التخزين والتخفيف في ُمستنَبت النقل الفيروسي العوامل الفيروسية بما في ذلك تركيز ومدة الذرف • الفيروسي والاختلافات الهيكلية للمستضدات الفيروسية المستهدفة، التفاعلية المتصالبة مع فيروسات أخرى حدد، حيث يتم إنتاج بعض المستضدات هدف البروتين الم • بتركيزات أعلى من غيرها، على سبيل المثال ُقَفيصة ُمَنو اة مقابل بروتينات حسكية :قضايا تتعلق بتصميم أو جودة المنَتج بما في ذلك • عدم كفاية كمية أو ُألفة الأجسام المضادة - للمستضد أو المستضدات المستهدفة تعرض للحرارة والرطوبة سوء التعبئة والتغليف وال - ، بما يمكن ء النقل و/أو التخزين غير السليمأثنا أن يؤدي إلى تحلل الأجسام المضادة في الاختبار عدم وضوح أو عدم صحة التعليمات بما يمكن - أن يؤثر على أداء الاختبار عدم كفاية تدريب أو كفاءة مشغ ِّ ل الاختبار، مما قد يؤدي • ر التشخيصي السريع لكشف إلى خطأ في إعداد الاختبا المستضدات أو أداء الاختبار أو تفسير النتيجة، مع استنتاجات خاطئة. التحديثات المستقبلية والتوصيات المحددة بشأن المنتجات تعمل منظمة الصحة العالمية عن كثب مع الأفرقة المعنية بتقييم ) ذات الطابع التجاري 2-سارس-أداء مستضدات فيروس كورونا وخصائصها التشغيلية، وذلك لتجميع الَبي نات بشكل منهجي عند َبي ِّنات قدر كاٍف من الوجد حاليًا يظهورها وتنسيق التحديثات. ولا التشغيلي للتوصية بمنتجات تجارية محددة. الأداء والاستخدام بشأن دضتسملا فشكانوروك سوريفب ىودعلا صيخشت يف تا-سراس - 2 يعانملا تاسياقملا مادختسابلا ة يئدبم تاداشرإ :ةعيرسة -10- عجارملا 1- Foundation for Innovative New Diagnostics. SARS- CoV-2 Diagnostic Pipeline 2020 [Available from: https://www.finddx.org/covid-19/pipeline/. 2- U.S. Food & Drug Administration. In Vitro Diagnostics EUAs 2020 [Available from: https://www.fda.gov/medical-devices/coronavirus- disease-2019-covid-19-emergency-use-authorizations- medical-devices/vitro-diagnostics-euas. 3- Agency PaMD. PMDA’s Efforts to Combat COVID-19 2020 [Available from: https://www.pmda.go.jp/english/about- pmda/0002.html. 4- Porte L, Legarraga P, Vollrath V, Aguilera X, Munita JM, Araos R, et al. Evaluation of novel antigen-based rapid detection test for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. Int J Infect Dis. 2020:S1201- 9712(20)30405-7. 5- Diao B, Wen K, Chen J, Liu Y, Yuan Z, Han C, et al. Diagnosis of Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection by Detection of Nucleocapsid Protein. medRxiv. 2020:2020.03.07.20032524. 6- Lambert-Niclot S, Cuffel A, Le Pape S, Vauloup- Fellous C, Morand-Joubert L, Roque-Afonso AM, et al. Evaluation of a Rapid Diagnostic Assay for Detection of SARS-CoV-2 Antigen in Nasopharyngeal Swabs. J Clin Microbiol. 2020;58(8). 7- Mertens P, De Vos N, Martiny D, Jassoy C, Mirazimi A, Cuypers L, et al. Development and Potential Usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip Diagnostic Assay in a Pandemic Context. Front Med (Lausanne). 2020;7:225-. 8- Blairon L, Mokrane S, Wilmet A, Dessilly G, Kabamba-Mukadi B, Beukinga I, et al. Large-scale, molecular and serological SARS-CoV-2 screening of healthcare workers in a 4-site public hospital in Belgium after COVID-19 outbreak. J Infect. 2020:S0163-4453(20)30514-4. 9- Mak GC, Cheng PK, Lau SS, Wong KK, Lau CS, Lam ET, et al. Evaluation of rapid antigen test for detection of SARS-CoV-2 virus. Journal of clinical virology : the official publication of the Pan American Society for Clinical Virology. 2020;129:104500-. 10- Nagura-Ikeda M, Imai K, Tabata S, Miyoshi K, Murahara N, Mizuno T, et al. Clinical evaluation of self-collected saliva by RT-qPCR, direct RT-qPCR, RT-LAMP, and a rapid antigen test to diagnose COVID-19. J Clin Microbiol. 2020:JCM.01438-20. 11- Omi K, Takeda Y, Mori M. SARS-CoV-2 qRT-PCR Ct value distribution in Japan and possible utility of rapid antigen testing kit. medRxiv. 2020:2020.06.16.20131243. 12- Scohy A, Anantharajah A, Bodéus M, Kabamba- Mukadi B, Verroken A, Rodriguez-Villalobos H. Low performance of rapid antigen detection test as frontline testing for COVID-19 diagnosis. J Clin Virol. 2020;129:104455. 13- Weitzel T, Legarraga P, Iruretagoyena M, Pizarro G, Vollrath V, Araos R, et al. Head-to-head comparison of four antigen-based rapid detection tests for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory samples. bioRxiv. 2020:2020.05.27.119255. 14- Weiss A, Jellingsø M, Sommer MOA. Spatial and temporal dynamics of SARS-CoV-2 in COVID-19 patients: A systematic review and meta-analysis. EBioMedicine. 2020;58. 15- Arons MM, Hatfield KM, Reddy SC, Kimball A, James A, Jacobs JR, et al. Presymptomatic SARS-CoV-2 Infections and Transmission in a Skilled Nursing Facility. New England Journal of Medicine. 2020;382(22):2081-90. 16- Bullard J, Dust K, Funk D, Strong JE, Alexander D, Garnett L, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from diagnostic samples. Clinical infectious diseases : an official publication of the Infectious Diseases Society of America. 2020:ciaa638. 17- Lee S, Kim T, Lee E, Lee C, Kim H, Rhee H, et al. Clinical Course and Molecular Viral Shedding Among Asymptomatic and Symptomatic Patients With SARS- CoV-2 Infection in a Community Treatment Center in the Republic of Korea. JAMA Internal Medicine. 2020. 18- ةبقارم .ةيملاعلا ةحصلا ةمظنمصيخشتلا لئاسو يف لاربتخم دعب حرطاه ا يف .)ةيزيلكنلإاب( قاوسلأ2015 19- علا ةحصلا ةمظنما ةيجولويبلا ةملاسلل تاداشرإ .ةيمل ديفوك( انوروك سوريف ضرم نأشب ةيربتخملا-19 ) 2020 ] يف ثيدحتلا مت13 ويام/رايأ2020[ . حاتم ىلع : https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/332076 ara.pdf-2020.3-GIH-WPE-/WHO 20- .ةيملاعلا ةحصلا ةمظنمفيصوت ةفدهتسملا تاجتنملا ديفوكل-19 لااحلا صيخشت ضارغلأ ةيولولأا تاذ ت ًامعد ةباجتسلالديفوك ةحئاجل-19 )ةيزيلكنلإاب(v.0.1 2020 ] يف ثيدحتلا مت31 هيلوي/زومت2020[ . :نم حاتم https://www.who.int/ar/emergencies/diseases/novelcoro guidance-2019/technical-navirus 21- Dinnes J, Deeks JJ, Adriano A, Berhane S, Davenport C, Dittrich S, et al. Rapid, point‐of‐care antigen and molecular‐based tests for diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. Cochrane Database of Systematic Reviews. 2020(8). https://www.who.int/publications/i/item/laboratory- biosafety-guidance-related-to-coronavirus-disease- 2019-(covid-19). 22- ةيملاعلا ةحصلا ةمظنم . ءانثأ اهتحفاكمو ىودعلا نم ةياقولا سوريف ىودعب ةباصلإا يف هابتشلاا دنع ةيحصلا ةياعرلا دجتسملا انوروك ] يف ثيدحتلا مت 19 سرام/راذآ 2020[ . حاتم ىلع : https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/330674 /9789240001077-ara.pdf ةسريعة: إرشادات مبدئي ة الباستخدام المقايسات المناعي 2 - سارس-ات في تشخيص العدوى بفيروس كوروناكشف المستضد -11- الحماية الاستخدام الرشيد لمعداتمنظمة الصحة العالمية. -32 تم ]) 91-رونا (كوفيدالشخصية في مكافحة مرض فيروس كو : على متاح . [0202 نيسان/أبريل 4التحديث في 596133/56601/eldnah/maertstib/siri/tni.ohw.sppa//:sptth OHW/-9102-voCn-esu_EPP_CPI-3.0202-fdp.ara - منظمة الصحة العالمية. تعريف المنظمة لحالات كوفيد -42 آب/أغسطس 7تم التحديث في ] 0202(بالإنكليزية) 91 : على متاح . [0202 levon/sesaesid/seicnegreme/ra/tni.ohw.www//:sptth- surivanoroc-lacinhcet/9102-ecnadiug شكر وتقدير أعضاء المؤسسات التالية المذكورة أُعِّ دَّت هذه الوثيقة بالتشاور مع :أسماؤهم المؤسسات الخارجية: سيرجيو كارمونا، مؤسسة وسائل التشخيص الجديدة المبتكرة، سويسرا؛ أرلين شوا، منظمة أطباء بلا حدود، سويسرا؛ أنطونينو دي كارو، المعهد الوطني للأمراض المعدية، ركاء في التشخيص، لازارو سبالنزاني، إيطاليا؛ سالي هوجفات، ش الولايات المتحدة الأمريكية؛ إريك كارلسون، معهد باستور دو كامبودج، كمبوديا؛ روزانا بيلينغ، كلية لندن للصحة والطب الاستوائي، المملكة المتحدة؛ ليو بون، جامعة هونغ كونغ، الصين، منطقة هونغ كونغ الإدارية الخاصة؛ شانتال روسكين، المعهد حة العامة والبيئة، هولندا؛ بيل رودريغيز، درابر الوطني للص ريتشاردز، مؤسسة كابلان، الولايات المتحدة الأمريكية؛ جيليان ساكس، مؤسسة وسائل التشخيص الجديدة المبتكرة، سويسرا؛ آن فون غوتبرغ، المعهد الوطني للأمراض السارية، جنوب أفريقيا ) ، sdaeLك بيركنز (منظمة الصحة العالمية: جين كننغهام ومار أمل بركات، غولوبينكا بوشيفكسيا، ليزا كارتر، لورا تشيرنيشوفا، رادو كوجوكارو، جانيت فيكتوريا دياز، سوده إحساني، بليندا لويز هيرينغ، فرانسيس إنباناثان، ألكسندر جاغوباروف، إياروسلافا ريكو، كارين -ماكسيموفيتش، ماركو ماركلويتز، خايرو مينديز اهابتيان، ديمتري بيرياسلوف، آن بيروشو، إيرينا برات، أرتيم ن سكريبنيك، ماجا ستانوييفيتش، أوتي ستروهر، ماريا فان كيرخوف، كارين فون أيجي. بيان المصالح ُجمَِّعت بيانات المصالح من جميع المساهمين الخارجيين، وُقيِّ مت لكشف أي تضارب في المصالح. ولم ُيعَلن عن أي تضارب ذي شأن في المصالح. ن أن تؤثر على هذه الإرشادات المبدئية. وإذا طرأ تغيير على أي ٍ تواصل منظمة الصحة العالمية رصد الوضع عن كثب لمتابعة أي تغيرات يمك من العوامل ذات الصلة، فسوف تصدر المنظمة تحديثًا إضافيًا. وبخلاف ذلك، تبقى وثيقة الإرشادات المبدئي ة هذه صالحة لمد ة عامين من تاريخ إصدارها. YB CC-CN-OGI 0.3 ASترخيص ال محفوظة. هذا المصنف متاح بمقتضىبعض الحقوق . 0202منظمة الصحة العالمية © 1.0202/noitceteD_negitnA/VoCn-9102/OHW :rebmun ecnerefer OHW باستخدام المقايسات المناعية السريعة: إرشادات مبدئية 2 - سارس-كشف المستضدات في تشخيص العدوى بفيروس كورونا -21- 1 المرفق ) في مجموعة قوامها NF) والسالبة الكاذبة (NT)، والسالبة الحقيقية (PF)، والموجبة الكاذبة (PT) وعدد الاختبارات الموجبة الحقيقية (VPN) والقيمة التنبؤية السالبة ( VPPالتنبؤية الموجبة (المرفق : القيمة ٪. 001٪ و 89٪ ونوعية 09٪، 08، 07معايير الأداء الموصى بها: حساسية بنسبة ويستند إلى %03، 02، 01، 5بــنسبة انتشار 91-حيث يقدَّر معدل انتشار كوفيد 00001 معد ل الانتشار لتحديد معدل مستهدفة ال مجموعات ال أمثلة الانتشار )%( قيمة ال النوعية الحساسية تنبؤية ال سالبة ال قيمة ال تنبؤية ال موجبة ال موجبة حقيقية موجبة كاذبة سالبة حقيقية سالبة كاذبة عدد المصابين بالمرض عدد الاختبارات الموجبة المجموع مرجعية الحالة ل ا أعراض؛ مخالطوذات مجموعة عامة 5 00001 885 005 051 3629 832 053 06 89 89 07 00001 893 005 051 3549 84 053 88 89 001 07 00001 836 005 001 3629 832 004 36 99 89 08 00001 844 005 001 3549 84 004 98 99 001 08 00001 886 005 05 3629 832 054 56 99 89 09 00001 894 005 05 3549 84 054 09 99 001 09 ى مرافق توجهون إلالذين ي عراضالأذوو مرضى الانتقال مجتمعي: مجتمعات المؤسسات و المرجعية؛ ال تلحالا ا الرعاية الصحية؛ مخالطو تأكدت إصابتها بفاشيات التي مغلقة ال 01 00001 529 0001 003 5778 522 007 67 79 89 07 00001 547 0001 003 5598 54 007 49 79 001 07 00001 5201 0001 002 5778 522 008 87 89 89 08 00001 548 0001 002 5598 54 008 59 89 001 08 00001 5211 0001 001 5778 522 009 08 99 89 09 00001 549 0001 001 5598 54 009 59 99 001 09 باستخدام المقايسات المناعية السريعة: إرشادات مبدئية 2 - سارس-كشف المستضدات في تشخيص العدوى بفيروس كورونا -31- معد ل الانتشار لتحديد معدل مستهدفة ال مجموعات ال أمثلة الانتشار )%( قيمة ال النوعية الحساسية تنبؤية ال سالبة ال قيمة ال تنبؤية ال موجبة ال موجبة حقيقية موجبة كاذبة سالبة حقيقية سالبة كاذبة عدد المصابين بالمرض عدد الاختبارات الموجبة المجموع ذات المجموعات لإحالة؛ ا كز افي مر عراضالأذات المجموعات أو فحص العاملين في مجال الرعاية الصحية؛ دور الرعاية عراضالأ 02 00001 0061 0002 006 0087 002 0041 88 39 89 07 00001 0441 0002 006 0697 04 0041 79 39 001 07 00001 0081 0002 004 0087 002 0061 98 59 89 08 00001 0461 0002 004 0697 04 0061 89 59 001 08 00001 0002 0002 002 0087 002 0081 09 89 89 09 00001 0481 0002 002 0697 04 0081 89 89 001 09 ؛ عراضالأذوو نظافة ال عاملون في مجال الرعاية الصحية/عمال ال مقيمون في دور الرعاية ال 03 00001 5722 0003 009 5286 571 0012 29 88 89 07 00001 5312 0003 009 5696 53 0012 89 98 001 07 00001 5752 0003 006 5286 571 0042 39 29 89 08 00001 5342 0003 006 5696 53 0042 99 29 001 08 00001 5782 0003 003 5286 571 0072 49 69 89 09 00001 5372 0003 003 5696 53 0072 99 69 001 09