SAFETY M EASURES IN MICROBIOLOGY
M ESURES DE SÉCURITÉ EN MICROBIOLOGIE
Guidelines for the classification, construction and testing of biolog ical safety cabinets have been issued by the WHO Special Programme on Safety Measures in Microbiology (SMM). The guidelines were formulated at a recent meeting held at the WHO Collaborating Centre for Biosafety Research and Training, Microbiological Safety Refer ence Laboratory, Centre for Applied Microbiology and Research, Porton Down, United Kingdom.1 Participants were representatives ofseven countries having individual national standards for laboratory safety equipment. Biological safety cabinets are used whenever: 1. procedures with a high potential for creating aerosols are con ducted. These may include centrifugation, grinding, blending, vig orous shaking or mixing, sonic disruption, opening containers of infectious materials whose internal pressures may be different from the ambient, intra-nasal innoculation of animals and harvesting of infected tissues from animals or eggs; 2. high concentrations or large volumes of infectious agents are used. The need for internationally acceptable guidelines is evidenced by the increased use o f such safety cabinets and the attendant develop ment of national codes. The variation in code requirements poses problems for both the manufacturer and the user o f the cabinets. Other factors leading to the compilation of the guidelines relate to the proper selection of safety cabinets and the availability of on-site per formance testing. The guidelines were developed for three classes o f biological safety cabinets: Class I (air inflow with direct exhaust). A Class I BSC is an openfronted work chamber which is exhaust-ventilated to provide per sonnel and environmental protection only by means of an inward airflow away from the operator, the exhaust air being filtered through a High Efficiency Particulate Air (HEPA) filter before being discharged from the cabinet. A Class I cabinet is to be used with biological agents o f low and moderate risk.
Class l l (downward laminar air flow with partial air recirculation). A Class II BSC is a partially open-fronted work chamber which ‘Copies of the guidelines, m English and French, are available from the Coordinator, Safety Measures in Microbiology, Division of Communicable Diseases, WHO, 1211 Geneva 27, Switzerland.
Des directives pour la classification, la construction et le contrôle d'enceintes de sécurité biologique ont été préparées par le Programme spécial OMS de mesures de sécurité en microbiologie. Ces directives ont été formulées lors d’une récente réunion qui s’est tenue au Centre collaborateur OMS de recherche et de formation pour la sécurité biologique, Microbiological Safety Reference Laboratory, Centre for Applied Microbiology and Research, Porton Down, Royaume-Uni.1 Les participants étaient des représentants de sept pays ayant leurs propres normes nationales pour l’équipement de sécurité des labora toires. Les enceintes de sécurité biologique sont utilisées chaque fois: 1) qu’on procède à des opérations ayant des chances élevées de produire des aérosols, notamment, centrifugation, broyage, mélan ge, agitation vigoureuse, désintégration par les ultra-sons, ouverture de récipients contenant des matériels infectieux dont la pression interne peut différer de la pression ambiante, inoculation intranasale à des animaux et récolte de tissus infectés à partir d’animaux ou d’œufs; 2) qu’on utilise des concentrations ou des volumes importants d’agents infectieux. La nécessité de directives qui soient acceptables à l’échelon inter national est illustrée par l’usage croissant d’enceintes de sécurité de ce type et la multiplication des codes nationaux qu’il entraîne. La varia bilité des nonnes formulées dans les divers codes pose des problèmes tant aux fabricants qu’aux utilisateurs de ces enceintes. D’autres fac teurs qui ont conduit à l’élaboration des directives concernent le choix judicieux d’enceintes de sécunté et la possibilité de pratiquer sur place un contrôle de performance. Les directives ont été établies pour trois catégones d’enceintes de sécurité biologique: Catégorie I (entrée d ’air avec évacuation directe). Une enceinte de catégorie I est constituée par une chambre de manipulation ouverte sur le devant, munie d’un dispositif de ventilation et d’évacuation d’air, de manière à assurer la protection du personnel et de l’envi ronnement uniquement par l’entraînement interne du flux d’air loin de l’opérateur, l’air étant évacué hors de l’enceinte à travers un filtre de haute performance retenant les particules (type HEPA — «High Efficiency Particulate Air» filter). L’enceinte de catégorie I doit être utilisée pour des agents biologiques présentant un risque faible ou modéré. Catégorie II (écoulement laminaire d’air dirigé vers le bas, avec recirculation partielle de l’air). Une enceinte de catégorie II est 1Des exemplaires des directives, en anglais et en français, peuvent être obtenus auprès du Coordonnateur, Mesures de sécurité en microbiologie, Division des Maladies transmissibles, OMS, 1211 Genève 27, Suisse.
Epidemiological notes contained in this number:
Informations épidémiologiques contenues dans ce numéro.
Equine Influenza Surveillance, Expanded Programme on Im munization, Influenza Surveillance, Prevention of Blindness, Safety M easures in M icrobiology, Surveillance of Dengue Haemorrhagic Fever, Surveillance of Foodborne D iseases. L ist of Infected Areas, p. 120. ___________________
M esures de sécurité en microbiologie, prévention de la cécité, programme élargi de vaccination, surveillance de la dengue hémorragique, surveillance de la grippe, surveillance de la grippe équine, surveillance des intoxications d’origine alimen taire. Liste des zones infectées, p. 120.
Wkly Epidem Rec No 15 - 16 Apni 1982
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Relevé epidént hebd ' N° 15 - 16 avril 1982
provides protection for personnel and the surrounding environ ment by means o f a “barrier air flow” at the work opening. A quantity of the air equal to the barrier air is exhausted from the cabinet through a HEPA filter. It also provides product and/or experiment protection against contamination by means o f HEPA filtered air flowing m a downward uniform and unidirectional manner. A Class II cabinet may be used with biological agents of low and moderate risk. It should be used when product protection and cross-contamination are o f importance.
Class III (glove box). A Class III BSC is a totally enclosed and gas-tight structure. Work procedures in the cabinet are carried out through replacable arm length gloved sleeves. The cabinet is sup plied with air through a HEPA filter which is exhausted through two HEPA filters mounted in series. The cabinet is operated at negative pressure and provides total protection for personnel, products and environment A Class III BSC is suitable for use with all categories o f biological agents and is always used with those of high risk to personnel and the environment The use o f inflammable gas and liquids should be avoided because o f the risk o f explosion.
The guidelines for each class o f cabinet include information on the dimensions, construction material, viewing windows, gaskets and sealants, filters, noise and vibration, lighting, electrical components, instrumentation, cabinet testing and air velocity. They also provide a list o f performance tests for each class o f cabinet with acceptable parameters delineated. A schedule of when the tests are to be per formed is also provided. These include testing during development and manufacture, on installation in the laboratory, annual safety checks, possible relocation o f the cabinet and routine maintenance and/or modification. The selection of a safety cabinet is most im portant A Class I cabinet is satisfactory for most laboratories working with low to moderate risk biological agents and where worker protection is the prime purpose for cabinet use. The Class II cabinet will provide the same worker protection b u t as previously described, has the added feature of pro viding optimum protection to the experiment and the elimination of cross-contamination within the unit. It is stressed, however, that Class II cabinets should not be used in laboratories which do not have the services of qualified technicians with proper equipment for installa tion and routine performance testing. Biological safety cabinets are not a substitute for proper sound microbiological practice in the laboratory. Good laboratory techni ques and practice make the greatest contribution to laboratory safety and, conversely, poor technique and practice compromise the best of laboratory facilities and equipment, so the teaching and integration of biosafety practice into all laboratory programmes and procedures is of the utmost importance.
constituée par une chambre de manipulation partiellement ouverte sur le devant, assurant la protection du personnel et de l’environ nement au moyen d’un «flux d’air faisant barrière» au niveau de l’ouverture pour le travail Une quantité d’air égale à celle qui constitue la barrière est évacuée hors de l’enceinte à travers un filtre HEPA. Ce système assure aussi la protection des produits et/ou de l’expérience contre la contamination, à l’aide d'un flux d’air filtré à travers le système HEPA et dirigé de manière uniforme et unidi rectionnelle vers le bas. L’enceinte de sécurité de catégorie II peut être employée pour des agents biologiques présentant des nsques faibles ou modérés. Elle doit être utilisée lorsqu’il est important de protéger les produits et d’éviter une contamination croisée. Catégorie III (boîte à gants). Une enceinte de sécurité biologique de catégorie III est une structure totalement close et étanche aux gaz. Les manipulations à l’inténeur de l’enceinte se font par l'intermé diaire de manchons ayant la longueur du bras, terminés par un gant et qui sont remplaçables. L’enceinte est alimentée en air à travers un filtre de type HEPA et l’air évacué traverse deux filtres HEPA montés en séné. L’enceinte fonctionne en dépression et offre une protection totale pour le personnel, les produits et l’environnement. L’enceinte de catégorie III convient pour la manipulation de tous les types d’agents biologiques et elle doit toujours être utilisée pour ceux qui font courir un risque élevé au personnel et à l’environne ment. L’emploi de gaz et de liquides inflammables est à éviter en raison du risque d’explosion. Les directives pour chaque catégorie d’enceintes comprennent des renseignements sur les dimensions, les matériaux de construction, les fenêtres d’observation, lesjoints et les mastics, les filtres, le bruit et les vibrations, l’éclairage, les composâmes électriques, les instruments, les contrôles de l’enceinte et la vitesse d’écoulement de l’air. Elles fournissent également une liste des épreuves à appliquer pour chaque catégorie d’enceintes et délimitent les paramètres acceptables. Un plan indique également quand les épreuves doivent être pratiquées. Ce sera, notamment, au cours de la mise au point et de la fabrication, lors de l’installation dans le laboratoire, lors des vérifications de sécurité annuelles, du déplacement éventuel de l’enceinte et de l’en tretien courant et/ou d’une modification. Le choix d’une enceinte de sécurité est extrêmement important Une enceinte de catégorie I est satisfaisante pour la plupart des labo ratoires qui travaillent sur des agents biologiques présentant un risque faible à modéré et dans le cas où la protection de l’opérateur est le but principal de l’utilisation de l'enceinte. L’enceinte de catégorie II pro curera la même protection à l’opérateur, mais, ainsi que cela a été indiqué ci-dessus, assurera en outre une protection optimale de l’ex périence et l’élimination d’une contamination croisée à l'intérieur de l’encemte. Toutefois, il faut souligner que les enceintes de la catégorie II ne doivent pas être utilisées dans des laboratoires ne disposant pas des services de techniciens qualifiés et du matériel approprié pour l’installation et les contrôles courants. Au laboratoire, les enceintes de sécurité biologique ne remplacent pas des pratiques microbiologiques correctes et éprouvées. De bonnes techniques et pratiques de laboratoire jouent le rôle principal dans la sécurité et, inversement, de mauvaises techniques et pratiques com promettent l’utilité des meilleurs installations et matériels de labora toire; c’est pourquoi l’enseignement et l’intégration de la pratique de la sécurité biologique dans tous les programmes et méthodes de labo ratoire revêtent une importance capitale.