Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): Временное руководство 19 марта 2020 г

-1- Обзорная информация Целью настоящего документа является предоставле- ние временных рекомендаций по биологической без- опасности в лабораторных условиях, которые следует соблюдать при исследовании клинических образцов пациентов, подпадающих под определение случаев ин- фицирования новым патогеном, выявленным в Ухане, Китай, то есть коронавирусным заболеванием 2019 г. COVID-19. ВОЗ будет пересматривать данные рекомендации по мере необходимости. Биологическая безопасность в лабораторных условиях Необходимо обеспечить соблюдение надлежащей практики биобезопасности в медицинских лабораториях. Любой ана- лиз на выявление вируса, вызывающего заболевание COVID-19, или исследование клинических образцов паци- ента, отвечающего определению подозреваемого случая1, должны проводиться в оборудованных надлежащим обра- зом лабораториях силами персонала, обученного соответ- ствующим техническим процедурам и технике безопасно- сти. В любых обстоятельствах следует соблюдать нацио- нальные руководства по биологической безопасности в ла- бораторных условиях. Общие сведения о рекомендациях в области биологической безопасности в лабораторных усло- виях см. в третьем издании Практического руководства ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных усло- виях2, которое будет применяться до публикации четвер- того издания. Ключевые требования • Каждая лаборатория должна провести локальную (т. е. в рамках организации) оценку рисков, чтобы убе- диться в наличии компетенций, необходимых для без- опасного выполнения предполагаемых исследований, а также в наличии надлежащих мер по контролю рис- ков. • При обращении и работе с образцами (включая кровь для серологического анализа) следует соблюдать базо- вые лабораторные методы и процедуры, входящие в перечень надлежащих методов и процедур микробио- логической работы (НМПМБ). • При обращении и работе с образцами, взятыми у па- циентов с подозрением на инфицирование или под- твержденным инфицированием COVID-19 и предна- значенными для дополнительных лабораторных ис- следований (например, общего анализа крови или ана- лиза газов крови), необходимо соблюдать локальные руководства по работе с потенциально инфекцион- ными материалами. • Не связанные с размножением вируса виды диагности- ческой лабораторной работы, включая секвенирова- ние и МАНК, с клиническими образцами пациентов с подозрением на инфицирование или подтвержденным инфицированием COVID-19, должны осуществляться Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19) Временное руководство 19 марта 2020 г. Основные аспекты биологической безопасности в лабо- раторных условиях в связи с COVID-19 • Все процедуры должны выполняться после оценки рисков и только персоналом с подтвержденной квалификацией при постоянном и неукоснительном соблюдении всех соот- ветствующих протоколов. • Первоначальная (перед инактивацией) обработка всех образ- цов должна проводиться в сертифицированном боксе биоло- гической безопасности (БББ) или устройстве первичной изо- ляции. • Не связанные с размножением вируса виды диагностиче- ской лабораторной работы (например, секвенирование и тесты, основанные на методе амплификации нуклеиновых кислот (МАНК)) должны проводиться на установках и с применением процедур, эквивалентных 2-му уровню био- логической безопасности (УББ-2). • Связанные с размножением вируса виды работы (напри- мер, культивирование вируса, реакции изоляции или нейтрализации) должны проводиться в изолированных лабораториях с направленным притоком воздуха (УББ-3). • Следует использовать надлежащие дезинфицирующие средства, обладающие доказанной эффективностью против оболочечных вирусов (например, гипохлорит натрия (отбе- ливатель), спирт, перекись водорода, четвертичные аммо- ниевые соединения и фенольные соединения). • Образцы от пациентов с подозрением на заболевание или подтвержденным заболеванием должны транспортиро- ваться с маркировкой UN3373 «Биологические матери- алы, категория В». Вирусные культуры или изоляты должны транспортироваться как вещества категории А с маркировкой UN2814 «Инфекционный материал, поража- ющий людей». -2- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство с использованием практик и процедур из перечня основных требованийa (см. приложение I) и надлежащих мер повышенного контроляb на ос- нове локального анализа рисков. До публикации четвертого издания Практического руководства ВОЗ по биологической безопасности в лабора- торных условиях следует применять УББ-2 в со- ответствии с третьим изданием этого руковод- ства2. • Обращение с материалами, имеющими высокую концентрацию живого вируса (например, при проведении размножения, выделения или реак- ции нейтрализации вируса), или с большими объ- емами инфекционных материалов должно осу- ществляться только силами соответствующим образом подготовленного и компетентного пер- сонала в лабораториях, где могут быть соблю- дены дополнительные основные требования и методы изолирования, например УББ-3. • Первоначальная (перед инактивацией) обработка всех образцов, включая образцы, предназначен- ные для секвенирования и МАНК, должна прово- диться в надлежащем образом функционирую- щем и сертифицированном БББ или устройстве первичной изоляции. • Необходимо применять надлежащие дезинфици- рующие средства с доказанной эффективностью против оболочечных вирусов, обеспечивая воз- действие таких средств в течение рекомендован- ного времени, в надлежащей концентрации и в пределах срока годности после приготовления рабочего раствора. • Все технические процедуры следует проводить таким образом, чтобы свести к минимуму воз- можность образования аэрозолей и брызг. • Все сотрудники лаборатории, работающие с та- кими образцами, должны применять соответству- ющие средства индивидуальной защиты (СИЗ), определенные по итогам тщательной оценки рис- ков. • Образцы, полученные от пациентов с подозре- нием на заболевание или подтвержденным забо- леванием, должны транспортироваться как веще- ства категории B с маркировкой UN3373 «Биоло- гические материалы». Вирусные культуры или изоляты должны транспортироваться как веще- ства категории А с маркировкой UN2814 «Ин- фекционный материал, поражающий людей»3. a Основные требования: перечень минимальных требова- ний, перечисленных в четвертом издании Руководства ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях в качестве описания сочетания мер по контролю рисков, явля- ющихся основной и неотъемлемой частью биологической безопасности в лабораторных условиях. Эти меры отражают международные стандарты и передовые практики в области биологической безопасности, необходимые для безопасной работы с биологическими веществами даже в условиях ми- нимального риска. Рекомендации по минимальным/важнейшим условиям труда, связанным с конкретными манипуляциями в лабораторных условиях Приведенные в данном разделе дополнительные рекомен- дации касаются минимальных/важнейших условий труда, связанных с конкретными манипуляциями в лабораторных условиях. 1. Оценка рисков Оценка рисков представляет собой систематический про- цесс сбора информации и оценки вероятности и послед- ствий воздействия или утечки опасных факторов на рабо- чем месте, а также определения соответствующих мер по контролю рисков для снижения уровня рисков до приемле- мого. Важно отметить, что сами по себе опасные факторы не представляют риска для людей или животных. В связи с этим также необходимо принимать во внимание виды ис- пользуемого оборудования и процедуры, которым будут подвергаться биологические вещества. Настоятельно рекомендуется начать с проведения локаль- ной оценки рисков для каждого этапа процесса, т. е. начи- ная со сбора и приема образцов и заканчивая проведением клинических исследований, исследований методом полиме- разной цепной реакции (ПЦР) и выделением вируса (только для применимых случаев). После этого для каждого этапа процесса будут рассмотрены отдельные опасности, такие как воздействие аэрозолей и попадание брызг в глаза во время обработки образцов, разлив материала, содержащего инфекционную культуру, и протечка образца (при приеме образцов), с присвоением каждой из них степени риска. Чтобы снизить уровень остаточного риска до приемлемого, для каждого выявленного риска необходимо отобрать и осуществить соответствующие меры по контролю риска, включая нижеследующие рекомендации, но не ограничива- ясь ими. В приложении II приводится схема оценки рисков, которая может использоваться в качестве примера и для упрощения процесса. 2. Типовые лабораторные процедуры, включая не связанные с размножением вируса виды диагностической работы и ПЦР-анализ Не связанная с посевом культур диагностическая лабора- торная работа и ПЦР-анализ клинических образцов от па- циентов с подозрением на инфицирование или подтвер- жденным инфицированием вирусом, вызывающим заболе- вание COVID-19, должны проводиться с использованием методов и процедур для обычных клинических и микробио- логических лабораторий, описанных в разделе «Основные требования» (см. приложение I). Тем не менее все манипу- ляции с потенциально инфекционными материалами, вклю- чая манипуляции, способные привести к образованию b Меры повышенного контроля: комплекс мер по контролю рис- ков, применение которого в лаборатории может быть необхо- димо в том случае, если результаты оценки рисков указывают, что обрабатываемые биологические вещества или проводимые с ними действия связаны со сравнительно высокими рисками, уро- вень которых невозможно считать допустимым с применением одних лишь основных требований. -3- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство брызг, капель или аэрозолей инфекционных материа- лов (например, загрузка и разгрузка герметичных про- бирок для центрифугирования, измельчение, смешива- ние, интенсивное встряхивание или перемешивание, ультразвуковая гомогенизация, вскрытие контейнеров с инфекционным материалом, внутреннее давление в которых отличается от атмосферного), должны выпол- няться в надлежащим образом функционирующих и сертифицированных БББ или устройствах первичной изоляции силами персонала с подтвержденной квали- фикацией. Примеры типовых лабораторных процедур включают в себя: • диагностические исследования сыворотки, крови (включая общий и биохимический анализ крови), взятых из респираторной системы образцов, та- ких как мазки из носоглотки и ротоглотки, мок- рота и/или эндотрахеальный аспират или жид- кость бронхоальвеолярного лаважа, стула или других образцов; • типовые исследования микотических и бактери- альных культур из образцов, взятых из дыхатель- ных путей. При обращении и работе с образцами необходимо постоянно соблюдать основные тре- бования (см. приложение I), включая НМПМБ, во всех ситуациях, включая перечисленные в подза- головках ниже, но не ограничиваясь ими. Более подробные описания и практическая демонстра- ция приемов содержатся в серии видеороликов ВОЗ, посвященных биологической безопасно- сти4. 3. Использование надлежащих дезинфицирующих средств Несмотря на то что наши знания о новом вирусе огра- ниченны, исходя из сходства генетических характери- стик вируса, вызывающего заболевание COVID-19, и вируса MERS-CoV, можно предположить, что вирус COVID-19 может быть восприимчив к дезинфицирую- щим средствам с доказанной эффективностью против оболочечных вирусов, включая гипохлорит натрия (отбеливатель) (например, в концентрации 1000 м. д. (0,1%) для общей дезинфекции поверхности и 10 000 м. д. (1%) для дезинфекции пролившейся крови), этиловый спирт концентрацией 62–71%, 0,5%-ную перекись водорода, четвертичные аммоние- вые соединения и фенольные соединения при приме- нении согласно рекомендациям производителя. Дру- гие биоцидные вещества, такие как 0,05–0,2%-ный хлорид бензалкония или 0,02%-ный диглюконат хлор- гексидина, могут быть менее эффективны. Особое внимание следует уделять не только выбору дезинфицирующего средства, но и продолжительно- сти его воздействия (например, 10 минут), разведению (т. е. концентрации действующего вещества) и сроку годности после приготовления рабочего раствора. Известно, что коронавирусы человека обычно сохра- няются на материалах небиологического происхожде- ния, таких как металл, стекло или пластик, до 9 дней5. 4. Изоляция вируса Если в стране не будут приняты иные правила, с уче- том новых данных и описанных выше эффективных профилактических мер выделение вируса из клинических образцов от пациентов с подозрением на инфицирование или подтвержденным инфицированием вирусом, вызываю- щим заболевание COVID-19, должна выполняться только в лабораториях, удовлетворяющих следующим дополнитель- ным требованиям к изоляции. • Система управляемой вентиляции обеспечивает направленный приток воздуха в лабораторные поме- щения. • Отходящий воздух из лаборатории не должен рецир- кулировать в остальных помещениях здания. Если воз- дух рекондиционируется и рециркулирует в пределах лаборатории, он должен подвергаться фильтрации с помощью фильтров типа HEPA (высокоэффективный противоаэрозольный фильтр). Отработанный воздух из лаборатории должен выходить из здания наружу с таким расчетом, чтобы он мог рассеиваться вдали от служебных и жилых зданий или отверстий для забора свежего воздуха. Перед отводом в атмосферу отходя- щий воздух должен проходить через HEPA-фильтры. • В лаборатории должна быть специальная раковина для мытья рук. • Все манипуляции с инфекционными или потенци- ально инфекционными материалами должны выпол- няться в надлежащим образом функционирующих и сертифицированных БББ. • Сотрудники лаборатории должны применять средства защиты, включая одноразовые перчатки, закрытые спереди или полностью закрытые халаты, рабочие ко- стюмы или комбинезоны с рукавами, полностью за- крывающими предплечья, шапочки, бахилы или спе- циально предназначенную обувь, а также средства за- щиты органов зрения (защитные очки или лицевые маски). По результатам оценки рисков может потребо- ваться защита органов дыхания (проверенные на плот- ность прилегания противоаэрозольные респираторы, например класса FFP2 (ЕС), класса 6 N95 с сертифика- том NIOSH (США), их аналоги либо устройства более высокого класса защиты). • Центрифугирование образцов должно производиться с использованием герметичных центрифужных рото- ров или пробирок для образцов. Загрузка и разгрузка этих роторов и стаканов должна проводиться в БББ. 5. Дополнительные риски, связанные с исследованиями изоляции вирусов Некоторые экспериментальные процедуры могут повлечь за собой дополнительные риски вирусных мутаций с воз- можным повышением патогенности и/или трансмиссивно- сти либо появление вирусов с измененными антигенными свойствами или лекарственной чувствительностью. Необ- ходимо провести отдельную оценку рисков и принять кон- кретные меры по снижению риска до начала проведения любой из перечисленных ниже процедур: • коинфицирование клеточных культур различными ко- ронавирусами или любые процедуры, которые могут привести к коинфицированию; • выращивание культуры вирусов в присутствии проти- вовирусных препаратов; • преднамеренная генетическая модификация вирусов. -4- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство 6. Работа с животными, инфицированными вирусом, вызывающим заболевание COVID-19. В соответствии с третьим изданием Практического ру- ководства ВОЗ по биологической безопасности в лабо- раторных условиях2 помещения и процедуры для ра- боты с животными должны отвечать УББ-3 в следую- щих случаях: • заражение животных для потенциального выде- ления возбудителя из образцов вируса, вызываю- щего заболевание COVID-19; • любой протокол, включающий заражение живот- ных для подтверждения и/или описания биоаген- тов, предположительно содержащих вирус COVID-19. 7. Направление образцов в лаборатории, располагающие соответствующими возможностями для изоляции Лаборатории, в которых отсутствуют возможности для выполнения вышеуказанных рекомендаций по биобез- опасности, должны рассмотреть возможность пере- дачи образцов в национальные, региональные или международные референс-лаборатории, располагаю- щие условиями для выявления COVID-19 в соответ- ствии с требованиями биобезопасности. Упаковка и транспортировка При транспортировке внутри лаборатории или между лабораториями все материалы должны быть поме- щены во вторичную тару, чтобы предотвратить повре- ждение или утечку. Примером такой транспортировки может служить перенос материалов из бокса биологи- ческой безопасности (БББ) в инкубатор и обратно. По- верхность образцов, которые выносятся из БББ, должна быть деконтаминирована. Более подробные указания содержатся в серии видеороликов ВОЗ, по- священных биологической безопасности4, в частности в материале «Надлежащие методы и процедуры мик- робиологической работы (НМПМБ), часть 7: транс- портировка». Перевозка образцов в пределах государственных гра- ниц должна осуществляться в соответствии с нацио- нальными правилами. Трансграничная перевозка об- разцов вируса, вызывающего заболевание COVID-19, должна осуществляться в соответствии с Типовыми правилами ООН, документом Международной органи- зации гражданской авиации (ИКАО) № 9284 «Техни- ческие инструкции по безопасной перевозке опасных грузов по воздуху»6 (для авиаперевозок) и любыми другими применимыми правилами в зависимости от используемого вида транспорта. Более подробная информация содержится в документе ВОЗ, Руководство ВОЗ по правилам транспортировки инфекционных материалов в 2019–2020 гг. (действует с 1 января 2019 г.)3. Краткие сведения о транспорти- ровке инфекционных веществ также можно найти в инструментарии 4 руководства ВОЗ, Борьба с эпиде- миями: основные факты о смертельных заболеваниях7. Образцы, полученные от пациентов с подозрением на заболевание или подтвержденным заболеванием, должны транспортироваться для диагностических или исследовательских целей с маркировкой UN3373 «Биологи- ческие материалы, категория В». Вирусные культуры или изоляты должны транспортироваться как вещества катего- рии А с маркировкой UN2814 «Инфекционный материал, поражающий людей»3. Все подвергаемые транспортировке образцы (категории UN3373 или UN2814) должны быть снабжены соответствующей упаковкой, маркировкой и до- кументацией, как описано в вышеупомянутых документах. Литература 1. Всемирная организация здравоохранения. Глобаль- ный эпиднадзор за случаями инфицирования людей коро- навирусным заболеванием (COVID-19) (по состоянию на 27 марта 2020 г.). 2. Практическое руководство по биологической без- опасности в лабораторных условиях, третье издание. Же- нева: Всемирная организация здравоохранения; 2004 (https://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/WHO_ CDS_CSR_LYO_2004_11w.pdf, по состоянию на 27 марта 2020 г.). 3. Guidance on regulations for the transport of infectious substances 2019–2020. Geneva: World Health Organization; 2019 (WHO/WHE/CPI/2019.20; https://www.who.int/ihr/publi- cations/WHO-WHE-CPI-2019.20/en/, по состоянию на 27 марта 2020 г.). 4. World Health Organization. Strengthening health security by implementing the International Health Regulations (2005). Biosafety video series (https://www.who.int/ihr/publications/biosafety-video-series/en/, по состоянию на 27 марта 2020 г.). 5. Kampf G, Todt D, Pfaender S, Steinmann E. Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and its inactivation with biocidal agents. J Hosp Infect. 2020;Feb 6. Pii:s0195- 6701(20)30046-3. doi:10.1016/j.jhin.2020.01.022 [электрон- ная публикация до публикации в печатном издании]. 6. International Civil Aviation Organization (ICAO). Safety. Technical instructions for the safe transport of danger- ous goods by air (Doc 9284) (https://www.icao.int/safety/Dan- gerousGoods/Pages/technical-instructions.aspx, по состоянию на 27 марта 2020 г.). 7. Managing epidemics: key facts about deadly diseases. Geneva: World Health Organization; 2018 (https://apps.who.int/iris/handle/10665/272442, по состоянию на 27 марта 2020 г.). 8. How to handrub? With alcohol-based formulation. How to handwash? With soap and water. Geneva: World Health Or- ganization; 2006 (https://www.who.int/gpsc/tools/GPSC- HandRub-Wash.pdf, по состоянию на 27 марта 2020 г.). Выражение признательности В составлении текущей версии настоящего руководства принимали участие: Stuart Blacksell, Оксфордское отделе- ние Университета Махидол по научным исследованиям в области тропической медицины (Таиланд); Kathrin Summermatter, кафедра инфекционных болезней Бернского университета (Швейцария); Kazunobu Kojima, Rica Zinsky, Zsofia Igloi, Программа ВОЗ по чрезвычайным ситуациям в области здравоохранения. ВОЗ продолжает внимательно следить за ситуацией в ожи- -5- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство дании любых изменений, которые могут потребовать пересмотра содержания настоящего временного руко- водства. В случае изменения каких-либо факторов ВОЗ выпустит очередное обновление документа. В противном случае срок действия настоящего времен- ного руководства составляет два года с даты публика- ции. -6- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство Приложение I. Основные требования 1. Надлежащие методы и процедуры микробиоло- гической работы (НМПМБ). Оптимальная практика • В лаборатории запрещено хранение пищи, напитков и личных вещей, таких как верхняя одежда и сумки. В лаборатории не разрешается принимать пищу и пить, курить, а также применять косметические средства. • В лаборатории не следует брать в рот никакие пред- меты – ручки, карандаши, жевательную резинку и т. д. – вне зависимости от использования перчаток. • Следует тщательно мыть руки (8), желательно теп- лой проточной водой и мылом, после работы с лю- быми биологическими материалами, включая живот- ных; перед выходом из лаборатории, а также в любой момент, если известно о контаминации рук или она предполагается. • Недопустимо размещать открытое пламя или источ- ники тепла рядом с легковоспламеняющимися матери- алами или оставлять их без присмотра. • Перед входом в лабораторию все порезы и повре- ждения кожи должны быть закрыты повязками или пластырями. • Перед входом в лабораторию необходимо убе- диться в наличии достаточного количества соответ- ствующего выполняемым работам лабораторного обо- рудования и расходных материалов, включая реа- генты, СИЗ и дезинфицирующие средства. • Запасы должны храниться надлежащим и безопас- ным образом (то есть в соответствии с инструкциями по хранению) для снижения вероятности несчастных случаев и инцидентов, таких как разливы жидкостей, опрокидывание или падения персонала лаборатории. • Все биологические вещества, химические и радио- активные материалы должны быть маркированы надлежащим образом. • Бумажные документы, особенно те, которые может понадобиться вынести из лаборатории, необходимо за- щищать от контаминации с помощью барьеров (напри- мер, пластмассовых экранов). • Все работы должны выполняться тщательно, свое- временно и без спешки. Следует избегать работы в со- стоянии усталости. • На рабочем месте следует поддерживать чистоту и порядок, не допуская скопления мусора и материалов, не требуемых для выполнения работы. • Запрещается работать в наушниках, так как они от- влекают персонал и могут помешать услышать сиг- налы оборудования или сигнализацию объекта. • Необходимо надлежащим образом закрыть или снять все украшения, которые могут порвать материал перчаток, легко контаминируются или могут стать предметами, переносящими инфекцию. Если сотруд- ник постоянно носит очки или украшения, может по- требоваться их очистка или деконтаминация. • Необходимо воздерживаться от использования мобиль- ных электронных устройств (например, мобильных телефо- нов, планшетов, ноутбуков, флеш-накопителей, карт па- мяти, фотоаппаратов и/или других портативных устройств, в том числе используемых для секвенирования ДНК/РНК) в тех случаях, когда они не требуются для выполнения лабо- раторных процедур. Мобильные электронные устройства следует хранить в местах, где они не могут легко подверг- нуться контаминации и стать средством переноса инфек- ции. Если избежать близкого контакта таких устройств с биологическими веществами невозможно, необходимо обеспечить их защиту с помощью физического барьера или деконтаминировать их перед выносом из лаборатории. Технические процедуры • Необходимо избегать вдыхания биологических веществ. При манипуляциях с образцами необходимо избегать воз- никновения брызг и аэрозолей или свести их к минимуму с помощью правильных методов лабораторной работы. • Следует избегать попадания биологических агентов в ор- ганизм, на кожу и в глаза. • При работе с образцами всегда необходимо использовать одноразовые перчатки. • Нельзя прикасаться к лицу руками в перчатках. • При выполнении процедур, связанных с возможным воз- никновением брызг, необходимо защищать рот, глаза и лицо с помощью механического барьера или иным образом. • Стеклянную посуду по возможности следует заменить на пластмассовую. • Если для работы необходимы ножницы, следует исполь- зовать инструмент с затупленными или закругленными, а не острыми кончиками. • В случае использования колющих и режущих предметов и инструментов необходимо соблюдать осторожность для предотвращения травмирования и инъекции биологических веществ. • Для безопасного обращения с ампулами следует исполь- зовать ампуловскрыватель. • Иглы не должны вновь закрываться колпачками, обре- заться и сниматься с одноразовых шприцев. • Все колющие предметы (например, иглы, иглы со шпри- цами, скальпели, осколки стекла) необходимо утилизиро- вать в твердые непрокалываемые контейнеры, снабженные герметичными крышками. • Предотвращение распространения биологических аген- тов – Отработанные образцы и культуры помещаются в водонепроницаемые контейнеры, которые следует надлежащим образом закрыть, а затем утилизировать в специальные контейнеры для отходов. – Пробирки желательно открывать с помощью там- пона или куска марли, смоченного дезинфицирующим средством. – Рабочие поверхности следует деконтаминировать с помощью соответствующего дезинфицирующего средства в конце рабочего дня и при разливе или оче- видной контаминации какого-либо материала. -7- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство – Необходимо убедиться в том, что дезинфици- рующее средство эффективно против патогена, в отношении которого оно применяется, и контак- тирует с контаминированными отходами доста- точно долго для их полного обеззараживания. 2. Компетенции и обучение персонала Общее ознакомление и повышение осведомленности Знакомство с устройством лаборатории, кодексами практики, локальными практическими руководствами, руководствами по технике безопасности, методами оценки рисков, требованиями законодательства и про- цедурами реагирования на чрезвычайные ситуации. Профессиональное обучение • Требования к обучению могут варьироваться в за- висимости от должностных функций. • Однако в целом весь персонал, задействованный в обращении с биологическими веществами, должен пройти обучение НМПМБ. • Перед допуском к самостоятельной работе необхо- димо провести и подтвердить оценку компетенций и квалификации с последующим регулярным пересмот- ром и повышением квалификации. • Необходимо регулярно обновлять и доводить до сведения соответствующего персонала актуальную информацию, например о новых процедурах. Обучение в области охраны и безопасности • Весь персонал должен знать о существующих в ла- боратории опасностях и связанных с ними рисках, а также безопасных рабочих процедурах, мерах безопас- ности, готовности к чрезвычайным ситуациям и реаги- ровании на них. 3. Проект лаборатории • Помещение должно быть просторным, с отдельной раковиной для мытья рук и соответствующим ограни- чением доступа. • На двери должна быть нанесена соответствующая маркировка, а стены, полы и мебель в лаборатории должны быть гладкими, легко моющимися, непрони- цаемыми для жидкостей и устойчивыми к действию реактивов и дезинфицирующих средств, обычно ис- пользуемых в лаборатории. • В тех помещениях лаборатории, где предусмотрена вентиляция (включая системы отопления и охлажде- ния, в частности вентиляторы или локальные сплит- системы кондиционирования воздуха, особенно уста- новленные при реконструкции), необходимо убе- диться в том, что потоки воздуха не нарушают без- опасность работы. Необходимо учитывать итоговые скорости и направления потоков воздуха, а также не допускать возникновения завихрений воздуха; то же относится и к естественной вентиляции. • Лаборатория должна располагать достаточно про- сторными и надлежащим образом оснащенными поме- щениями и оборудованием для безопасной обработки и хранения инфекционных и других опасных материа- лов, таких как химикаты и растворители. • Следует оборудовать помещения для приема пищи и напитков вне лаборатории, а также обеспечить доступ- ность зон для оказания первой помощи. • В непосредственной близости от лаборатории должны находиться соответствующие материалы и устройства для обеззараживания отходов, например дезинфицирующие средства и автоклавы. • При проектировании лаборатории следует предусмот- реть процессы утилизации отходов. Системы безопасности должны включать в себя средства реагирования на возгора- ния и аварийные ситуации в области электроснабжения, а также средства реагирования на чрезвычайные ситуа- ции/инциденты, определенные на основе оценки рисков. • Необходимо иметь надежный источник электропитания соответствующей мощности, а также дежурное освещение с указанием запасного выхода. 4. При проектировании необходимо учитывать чрезвычай- ные ситуации, перечисленные в локальной оценке рисков, а также принимать во внимание географические и метеоро- логические условия. Прием и хранение образцов • При поступлении образца в лабораторию он должен быть снабжен достаточной сопроводительной информа- цией, позволяющей определить, что представляет собой данный образец, когда и где он был взят или подготовлен и каким исследованиям и/или процедурам (при необходимо- сти) он должен быть подвергнут. • Следует рассмотреть возможность распаковки образцов в БББ. Персонал, который получает и распаковывает об- разцы, должен быть надлежащим образом ознакомлен со связанными с этим опасностями; он должен пройти подго- товку по необходимым мерам предосторожности в соответ- ствии с НМПМБ, как указано выше, знать особенности об- ращения с разбившимися или протекающими контейне- рами, а также уметь обращаться с разлитыми материалами и дезинфицирующими средствами для ликвидации любой контаминации. • Контейнеры для хранения образцов должны быть проч- ными, целыми и достаточного объема; герметичными при наличии правильно закрытой крышки или пробки; по воз- можности изготовленными из пластика; не загрязненными снаружи какими-либо биологическими материалами; надлежащим образом этикетированными, маркированными и зарегистрированными для облегчения идентификации; а также изготовленными из материала, отвечающего требуе- мому типу хранения. • В том случае, когда перед перемещением образцов в дру- гие помещения для дальнейших манипуляций, например ПЦР-анализа, используется стадия инактивации, ее методы должны быть надлежащим образом валидированы. 5. Деконтаминация и утилизация отходов • В целях защиты от инфекционных рисков любая поверх- ность или материал, достоверно или предположительно контаминированные биологическими веществами в ходе лабораторных работ, должны быть надлежащим образом дезинфицированы. • Перед деконтаминацией и/или утилизацией следует про- вести надлежащие процедуры для идентификации и разде- ления контаминированных материалов. -8- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство • В тех случаях, когда деконтаминация не может быть произведена в помещениях лаборатории или на месте, контаминированные отходы необходимо упаковать утвержденным способом (то есть в герметичную тару) для транспортировки на другой объект, где имеются условия для деконтаминации. 6. Средства индивидуальной защиты • Для предотвращения попадания брызг на одежду или ее загрязнения биологическими веществами в ла- бораториях следует пользоваться лабораторными ха- латами. Лабораторные халаты должны иметь длинные рукава, желательно с эластичными или пригнанными по размеру манжетами; пуговицы на манжетах должны быть застегнуты. Халаты нельзя носить с закатанными рукавами. Халаты должны быть достаточно длин- ными, чтобы закрывать колени, но не доставать до пола. При ношении в лаборатории халаты должны быть застегнуты на пуговицы. По возможности лабо- раторные халаты должны быть изготовлены из ткани, устойчивой к брызгам, и иметь покрой с запáхом, обес- печивающий сплошную защиту спереди. Лаборатор- ные халаты следует носить только в специально отве- денных для этого местах. Когда халаты не использу- ются, их следует хранить надлежащим образом; они не должны висеть поверх других лабораторных халатов либо в шкафчиках или на вешалках с личными ве- щами. • 2. При всех процедурах, которые могут сопровож- даться прямыми или случайными контактами с кро- вью, жидкостями организма и другими потенциаль- ными инфекционными материалами или зараженными животными, следует надевать специальные перчатки. Эти перчатки нельзя дезинфицировать или использо- вать повторно, так как воздействие дезинфицирующих средств и продолжительное ношение снижает проч- ность перчаток и ухудшает защиту пользователя. Пер- чатки всегда необходимо проверять перед использова- нием, чтобы убедиться в их целостности. • При необходимости защитить глаза и лицо от брызг, попадания инфицированного материала и ис- кусственного ультрафиолетового излучения следует использовать защитные очки, лицевые щитки или дру- гие защитные средства. Средства защиты органов зре- ния разрешается использовать повторно, но после каж- дого применения их следует очищать. В случае попа- дания брызг их необходимо деконтаминировать с по- мощью соответствующего дезинфицирующего сред- ства. • В лаборатории следует носить обувь такого типа, который минимизирует вероятность поскользнуться, споткнуться, получить травму от падающего предмета или подвергнуться воздействию биологических ве- ществ. • Защита органов дыхания, как правило, не входит в число основных требований. Тем не менее в данном контексте необходимо провести локальную оценку рисков для определения необходимости защиты орга- нов дыхания, особенно при проведении вне БББ про- цедур, во время которых возможно образование аэро- золей или капель (например, центрифугирование, об- работка образцов с протечками), а также брызг (напри- мер, загрузка и разгрузка герметичных центрифужных стаканов, измельчение, смешивание, интенсивное встряхивание или перемешивание, ультразвуковое дробле- ние, вскрытие контейнеров с инфекционным материалом, внутреннее давление в которых отличается от атмосфер- ного). 7. Лабораторное оборудование • Безопасное использование лабораторного оборудования в совокупности с соблюдением НМПМБ помогает миними- зировать вероятность инфицирования персонала при обра- щении с биологическими агентами или при манипуляциях с ними. 8. Для того, чтобы оборудование могло эффективно сни- жать уровень рисков, руководство лаборатории должно обеспечить достаточное пространство для его использова- ния. На цели эксплуатации и обслуживания оборудования должен быть выделен соответствующий бюджет; он также должен охватывать оборудование, предусмотренное техни- ческими характеристиками объекта, к которому должны прилагаться спецификации с указанием средств обеспече- ния безопасности. Весь персонал, работающий на каком- либо оборудовании или обслуживающий его, должен пройти надлежащее обучение и продемонстрировать свою квалификацию. План реагирования на чрезвычайные ситуации / инци- денты • Даже при выполнении работ с низким уровнем риска и соблюдении всех основных требований к биобезопасности могут иметь место различные инциденты. Для снижения ве- роятности инфицирования биологическим агентом или его утечки либо смягчения последствий таких происшествий следует разработать план реагирования на чрезвычайные ситуации, предусматривающий конкретные стандартные операционные процедуры (СОП), которым необходимо следовать при чрезвычайных ситуациях, вероятных с уче- том выполняемых работ и местных условий. Персонал дол- жен быть обучен этим процедурам и должен периодически проходить переподготовку для подтверждения квалифика- ции. • В помещениях должны иметься легко доступные для персонала аптечки первой медицинской помощи с меди- цинскими принадлежностями, включая флаконы с соста- вами для промывания глаз и бинты. Аптечки следует регу- лярно проверять на предмет достаточного количества меди- цинских принадлежностей и соблюдения сроков их годно- сти. • Обо всех инцидентах необходимо своевременно сооб- щать соответствующим сотрудникам. В применимых слу- чаях необходимо вести письменный учет несчастных слу- чаев и инцидентов в соответствии с национальными прави- лами. По факту каждого происшествия необходимо свое- временно составить отчет и провести расследование, на ос- нове которого следует обновить лабораторные процедуры и планы реагирования на чрезвычайные ситуации. • Наборы для ликвидации последствий разлития различ- ных веществ, включая дезинфицирующие средства, должны быть легко доступны для персонала. В зависимости от площади, местоположения, концентрации и/или объема разлитого материала могут потребоваться различные про- токолы. В лаборатории должны быть разработаны письмен- ные процедуры очистки и деконтаминации разлитий; пер- сонал должен соблюдать их после соответствующего обу- чения. -9- Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях в связи с коронавирусным заболеванием (COVID-19): временное руководство 9. Гигиена труда • Организация-работодатель в лице директора лабо- ратории должна нести ответственность за обеспечение надлежащей проверки и составление отчетности о со- стоянии здоровья персонала лаборатории. • Сотрудников лаборатории могут подвергать меди- цинским осмотрам или требовать предоставить сведе- ния о своем здоровье, чтобы убедиться в том, что ра- бота в лаборатории безопасна для их здоровья. -10- Приложение II. Схема оценки рисков Несмотря на то что в данной схеме для оценки рисков применяется качественный подход, в рамках которого в матрице рисков учитываются параметры вероятности и степени опасности, важно отметить, что для оценки рисков также могут быть исполь- зованы количественные (например, от простых схем подсчета баллов до сложных математических моделей) и гибридные (полуколичественные) методы. Лаборатории должны использовать тот метод оценки рисков, который наиболее полно отвечает их особым потребностям, не исключая возможности разработки индивидуальных подходов к оценке, методов подсчета и определений параметров. Данная схема была разработана в основном для оценки рисков биобезопасности, однако при необходимости и возможности она также может использоваться для общей оценки рисков безопасности лабораторной работы, особенно в тех случаях, когда риски биобезопасности и общие риски безопасности связаны между собой – например, при сборе и транспортировке образ- цов. Название учреждения/объекта Название лаборатории Директор/руководитель лаборатории Названия проектов / соответствующие стандартные операционные процедуры (СОП) Дата ШАГ 1. Сбор информации (идентификация источников опасности) Указания: кратко опишите характер деятельности лаборатории и дайте общее описание проводимых в лаборатории ра- бот, входящих в сферу охвата данной оценки рисков. Опишите используемые в лаборатории биологические агенты и другие возможные источники опасности (например, передача инфекции, инфекционная доза, лечебно-профилактические мероприятия, патоген- ность) Опишите осуществляемые лабораторные процедуры (например, культивирование, центрифугирование, ра- бота с колющими и режущими предметами и инстру- ментами, утилизация отходов, периодичность выпол- нения данной лабораторной деятельности) При использовании данной схемы заполните все разделы, следуя указаниям на сером фоне. Указания и маркиро- ванные списки на сером фоне можно скопировать в текстовые поля под указаниями и использовать как подсказки для сбора и записи необходимой информации об объекте. После этого текст на сером фоне можно стереть, а остав- шиеся поля использовать как черновик отчета об оценке рисков. Этот черновик должен быть тщательно проверен, при необходимости отредактирован и заверен членами группы по оценке рисков. -11- Опишите типы используемого оборудования (сред- ства индивидуальной защиты (СИЗ), центрифуги, ав- токлавы, боксы биологической безопасности (БББ)) Опишите вид и состояние объекта, на котором прово- дятся работы. Опишите соответствующие человеческие факторы (например, квалификация, профессиональная подго- товка, опыт сотрудников и их отношение к работе) Опишите любые другие факторы (например, юридиче- ские, культурные, социально-экономические), кото- рые могут повлиять на работу лаборатории ШАГ 2. Оценка рисков Указания: опишите возможные способы инфицирования и/или утечки. В каких потенциальных ситуациях может произойти инфицирование или утечка? Какова вероятность инфицирования/утечки? □ Низкая вероятность: возможность наступления события в ближайшем будущем невелика □ Средняя вероятность: возможность события в ближайшем будущем □ Высокая вероятность: возможность события в ближайшем будущем весьма велика □ Какова степень последствий инфицирования/утечки (незначительная, умеренная, тяжелая)? -12- Указания: оцените степень риска и определите приоритетные меры по контролю риска. Обведите изначальные (обыч- ные) риски лабораторной деятельности, присутствовавшие до введения дополнительных мер по контролю рисков. Примечание: • при назначении приоритетов может потребоваться учет других факторов, например срочности, экономической це- лесообразности / устойчивости мер по контролю рисков, сроков доставки и установки, а также доступности обуче- ния; • для оценки риска в целом следует принимать во внимание значимость рисков для различных видов лабораторной деятельности/процедур отдельно или в совокупности в зависимости от особенностей лаборатории. Вероятность инфицирования/утечки Низкая вероятность Средняя вероятность Высокая вероятность Последствия инфицирования/утечки Тяжелые Средняя Высокая Очень высокая Умеренные Низкая Средняя Высокая Незначительные Очень низкая Низкая Средняя Лабораторная деятельность/процедура Степень начального риска (очень низкая, низкая, средняя, высокая, очень высокая) Превышает ли степень начального риска порог допустимости? (да/нет) Приоритетность (высокая/средняя/ низкая) Выберите общую степень начального риска. ☐ Очень низкая ☐ Низкая ☐ Средняя ☐ Высокая ☐ Очень Следует ли продолжать работу без дополнитель- ных мер по контролю рисков? ☐Да ☐Нет ШАГ 3. Разработка стратегии контроля рисков Указания: перечислите требования, предусмотренные международными и национальными нормами, законами, руковод- ствами, стратегиями и программами в области биобезопасности и биозащиты. -13- Опишите меры, предусмотренные национальными законами или нормами (при наличии). Опишите меры, рекомендованные руководствами, стратегиями и программами (при наличии). Указания: опишите имеющиеся ресурсы для контроля рисков и оцените их применимость, доступность и устойчивость в местных условиях, включая управленческую поддержку. Достаточно ли ресурсов для внедрения и поддержки мер по контролю потенциальных рисков? Какие существующие факторы могут сократить или ограничить какие-либо меры по контролю рисков? Возможно ли продолжение работы без какой-либо из мер по контролю за рисками? ШАГ 4. Выбор и реализация мер по контролю рисков Указания: опишите необходимое время и место применения мер по контролю рисков, степень остаточного (итогового) риска после применения этих мер по контролю рисков, а также оцените доступность, эффективность и возможность дли- тельного применения мер по контролю рисков. Лабораторная деятельность/ процедура Выбранная мера (меры) по контролю рисков Степень остаточного риска (очень низкая, низкая, средняя, высокая, очень высокая) Превышает ли степень остаточного риска порог допустимости? (да/нет) Являются ли меры по контролю рисков доступными, эффективными и допускают ли они длительное применение? (да/нет) Указания: оцените степень остаточного риска, сохраняющегося после применения выбранных мер по контролю рисков; определите, превышает ли теперь эта степень риска порог допустимости и следует ли продолжать работу. Вероятность инфицирования/утечки Низкая вероятность Средняя вероятность Высокая вероятность -14- Последствия инфицирования/ утечки Тяжелые Средняя Высокая Очень высокая Умеренные Низкая Средняя Высокая Незначительные Очень низкая Низкая Средняя Общая степень остаточного риска: ☐ Очень низкая ☐ Низкая ☐ Средняя ☐ Высокая ☐ Очень высокая Если степень остаточного риска по-прежнему превышает порог допустимости, необходимо осуществить дальнейшие дей- ствия, например принять дополнительные меры по контролю рисков на основе оценки начальных рисков, проведенной на ШАГЕ 2, изменить объем или вид работ таким образом, чтобы степень риска снизилась до порога допустимости при су- ществующих мерах по контролю рисков, либо назначить другую лабораторию, в которой применяются соответствующие стратегии контроля рисков и которая может выполнить работу в соответствии с планом. Следует ли продолжать работу после применения выбранных мер по контролю рисков? ☐Да ☐Нет Утверждено (ФИО и должность) Утверждено (подпись) Дата Указания: опишите, каким образом проводится информирование персонала о рисках и стратегиях их снижения. Приведите механизм коммуникации внутри лаборатории. Опишите процессы и сроки, позволяющие организовать обеспечение всех выявленных мер по контролю рисков, проведение соответствующих СОП и обучение персонала до начала лабораторных работ. Информирование об опасных факторах, рисках и мерах по контролю рисков Обеспечение (и бюджетирование) мер по контролю рисков Процедуры эксплуатации и обслуживания Обучение персонала ШАГ 5. Проверка рисков и мер по их контролю -15- Указания: организуйте цикл периодического пересмотра, позволяющий выявить: изменения, касающиеся видов лабора- торной деятельности и биологических агентов, персонала, оборудования или объектов; изменения в знаниях о биологиче- ских агентах или процессах; опыт, накопленный в ходе аудита/инспектирования, рассмотрения предложений сотрудников, реагирования на происшествия и/или опасные ситуации. Периодичность проверки Лицо, проводящее проверку Описание обновлений/изменений Персонал/процедуры для внедрения изменений Проверено (ФИО и должность) Проверено (подпись) Дата © Всемирная организация здравоохранения, 2020. Некоторые права защищены. Данная работа распростра- няется на условиях лицензии CC BY-NC-SA 3.0 IGO. Originally issued in English by the World Health Organization HQ in Geneva, under the title Laboratory biosafety guidance related to coronavirus disease ( COVID-19) : interim guidance, 19 March 2020. Doc #: WHO/WPE/GIH/2020.2