Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян: Временные рекомендации 23 мая 2022 г.

Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -1- Важные моменты • Цель глобального реагирования на вспышку оспы обезьян, охватившую несколько стран, состоит в том, чтобы остановить вспышку. • Любому лицу, подпадающему под определение предполагаемого случая оспы обезьян, должно быть предложено тестирование. • Рекомендуемым типом образца для диагностического подтверждения оспы обезьян в предполагаемых случаях является материал кожного поражения, включая мазки экссудата пораженного участка, покрышки с более чем одного участка поражения или струп (корку) участка поражения. • Лабораторное подтверждение образцов от предполагаемых случаев осуществляется с помощью теста методом амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), например полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени или классической ПЦР. МАНК может быть общим для ортопоксвируса (OPXV) или специфичным для вируса оспы обезьян (MPXV, предпочтительнее). • Все манипуляции в лабораторных условиях с образцами, полученными от предполагаемых, вероятных или подтвержденных случаев оспы обезьян, должны проводиться в соответствии с риск-ориентированным подходом. • Помимо МАНК, секвенирование может быть полезным для определения клады вируса и понимания эпидемиологии. Государствам- участникам настоятельно рекомендуется вносить данные о генетических последовательностях MPXV в имеющеся и общедоступные базы данных. • В соответствии с Международными медико-санитарными правилами (ММСП) 2005 г. государствам-участникам необходимо немедленно уведомить ВОЗ о положительных результатах лабораторных исследований, включая общее лабораторное исследование на OPXV, которое ожидает подтверждения. • ВОЗ может помочь государствам-участникам получить доступ к тестированию посредством направления образцов. При необходимости государства-участники могут обратиться в соответствующее региональное бюро ВОЗ. Введение Вирус оспы обезьян monkeypoxvirus (MPXV) представляет собой двухцепочечный ДНК-вирус, член рода ортопоквсирусов (orthopoxvirus) семейства Poxviridae. Поксвирусы вызывают заболевания у людей и многих других животных; инфекция обычно приводит к образованию поражений, узелков на коже или диссеминированной сыпи. Другие виды ортопоксвирусов (OPXV), патогенные для человека, включают вирус коровьей оспы и вирус натуральной оспы (вызывающий оспу, которая была искоренена). Вирус коровьей оспы (vaccinia virus) также является OPXV, который использовался для вакцинации людей и был ключевым инструментом для ликвидации оспы, достигнутой в 1980 г. MPXV назван в связи с его первоначальным обнаружением у обезьян. MPXV в основном можно обнаружить у грызунов, однако его естественный резервуар не установлен. Есть две известные клады MPXV: одна эндемична для Западной Африки, а другая – для региона бассейна Конго. Типичная картина оспы обезьян хорошо описана и состоит из короткого лихорадочного продромального периода, за которым следует прогрессирующее развитие классической сыпи с уплотненными и пупковидными (центрально вдавленными) поражениями, начинающимися на голове или лице и прогрессирующими на конечности и туловище. Поражения прогрессируют одновременно по стадиям от макул до папул, везикул, пустул и, в конечном итоге, до корок, которые подсыхают и отпадают через две-четыре недели. Во рту часто появляются энантемы (открытые поражения кожи или язвы). Поражения также могут затрагивать глаза и/или область гениталий. Также типичным симптомом оспы обезьян являются увеличенные лимфатические узлы. Однако поражения могут быть геморрагическими или сливаться в крупные буллы. В ходе текущей вспышки в нескольких странах были выдвинуты предположения о том, что прогрессирование поражений может быть нетипичным – начиная с области гениталий. Многие люди с данным заболеванием могли быть проверены на другие инфекционные заболевания на момент обнаружения. Настоящее руководство предназначено для предоставления временных рекомендаций лабораториям и заинтересованным сторонам, участвующим в диагностике оспы обезьян. Эти рекомендации были подготовлены и рассмотрены ВОЗ в консультации с экспертами профильных лабораторий, имеющими опыт работы с MPXV и OPXV и их выявлением, а также с экспертами в разработке диагностических тестов для OPXV. Для стран, в которых действуют нормативные стандарты, применимые к клиническим лабораторным исследованиям, проводимым на образцах человека, эти нормативные стандарты должны соблюдаться надлежащим образом. ВОЗ внимательно следит за событиями, связанными с этой вспышкой, и по мере необходимости будет пересматривать и публиковать обновленные рекомендации. Если в данный документ не будут внесены изменения, его действие истечет через год (май 2023 г.). Показания для тестирования Любому лицу, подпадающему под определение предполагаемого случая оспы обезьян, должно быть предложено тестирование (1). Решение о проведении Временные рекомендации 23 мая 2022 г. Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -2- тестировании должно основываться как на клинических, так и на эпидемиологических факторах, связанных с оценкой вероятности заражения. Учитывая целый ряд состояний, вызывающих кожную сыпь, и то, что клиническая картина в этой вспышке чаще может быть нетипичной, может быть сложно дифференцировать оспу обезьян только на основании клинической картины, особенно в случаях с атипичной картиной. Поэтому важно учитывать другие потенциальные причины отдельных поражений кожи или диссеминированной сыпи. Примеры других этиологий сходных поражений кожи на разных стадиях развития включают вирус простого герпеса, вирус ветряной оспы, вирус контагиозного моллюска, энтеровирус, корь, чесотку, бледную трепонему (сифилис), бактериальные кожные инфекции, аллергию на лекарства, парапоксвирусы (вызыва ющие контагиозный пустулёзный дерматит и родственные заболевания) и мягкий шанкр (2). Сбор, отправка и хранение образцов Процедуры безопасности. Необходимо обеспечить использование надлежащих стандартных операционных процедур (СОП), а персонал лаборатории должен быть обучен правильному надеванию и снятию средств индивидуальной защиты (СИЗ), сбору, хранению, упаковке и транспортировке образцов. Все образцы, собранные для лабораторных исследований, следует рассматривать как потенциально инфекционные и обращаться с ними с осторожностью. При тестировании обычных клинических образцов от пациентов с подтвержденной или предполагаемой оспой обезьян следует принимать меры для сведения к минимуму риска лабораторной передачи на основе оценки рисков. Эти меры могут включать в себя ограничение количества персонала, вовлеченного в тестирование, сотрудниками с подтвержденными компетентциями, ношение соответствующих СИЗ, строгое соблюдение стандартных мер предосторожности и недопущение любых процедур, которые могут привести к образованию инфекционных аэрозолей. Там, где это уместно и возможно, рекомендуется рассмотреть вопрос о вакцинации персонала. К эффективным дезинфицирующим средствам относятся соединения четвертичного аммония и 0,5%-ный (или 200 частей на миллион) раствор гипохлорита натрия (свежеприготовленный). При сборе образцов и обращении с ними должно быть обеспечено строгое соблюдение рекомендаций по профилактике инфекций и инфекционному контролю (руководства по клиническому ведению и по ПИИК находятся в разработке). Виды образцов для сбора. Рекомендуемым типом образца для лабораторного подтверждения оспы обезьян является материал кожного поражения, включая мазки с поверхности пораженного участка и/или экссудата, покрышки с более чем одного участка поражения или струп (корку) участка поражения. Для сбора достаточного количества вирусного ДНК тщательно возьмите мазок с пораженного участка. Можно использовать как сухие тупферы, так и тупферы, помещенные в вирусную транспортную среду (ВТС). В одну пробирку следует собрать образцы с двух поражений одного и того же типа, желательно из разных мест на теле и отличающихся по внешнему виду. Участки поражения, струпы и везикулярную жидкость нельзя смешивать в одной и той же пробирке. При наличии ресурсов для сбора образцов можно использовать две пробирки, чтобы свести к минимуму риск неправильного сбора или наличия ингибиторов, однако тестирование следует проводить только на одном образце, а второй следует тестировать только в том случае, если первая проба дает неоднозначные результаты. В дополнение к образцу с участка кожного поражения рекомендуется сбор мазка из ротоглотки. Однако данные о точности этого типа образца для диагностики оспы обезьян ограничены, поэтому отрицательный образец мазка из ротоглотки следует интерпретировать с осторожностью. Поскольку текущая вспышка все еще находится в стадии расследования, можно рассмотреть вопрос о сборе дополнительных типов образцов для исследовательских целей, если получено разрешение соответствующего комитета по этике и имеется достаточный лабораторный и медицинский опыт для их безопасного сбора, обработки и хранения. Образцы могут включать мочу, семенную жидкость, ректальные и/или генитальные мазки по показаниям, основанным на клинической картине, включая расположение поражений. Кровь с ЭДТА может способствовать обнаружению MPXV, но может не содержать такой же высокий уровень вируса, как обнаруживается в образцах с участков поражений, поскольку любая виремия возникает на ранних стадиях инфекции, обычно в продромальном периоде, и до того, как кожные поражения проявятся. Взятие биопсии с участка поражения на макулярной стадии следует рассматривать только при наличии клинических показаний; данную манипуляцию должен выполнять только персонал с соответствующей подготовкой. Эти дополнительные типы образцов не предназначены для целей текущей диагностики, и их забор не следует производить вне исследовательских целей. Более подробная информация о сборе и хранении образцов содержится в приложении. Обнаружение антител в плазме или сыворотке не следует использовать как самостоятельное исследование для диагностики оспы обезьян. Однако обнаружение антител IgM у пациентов, недавно перенесших острое заболевание, или IgG в парных образцах сыворотки, взятых с промежутком не менее 21 дня с первым образцом, взятым в течение первой недели болезни, может помочь в диагностике, если протестированные образцы дают неоднозначные результаты. Упаковка и отправка клинических образцов. Образцы следует хранить в холодильнике или замораживать в течение часа после сбора и доставлять в лабораторию как можно скорее после сбора. Правильное обращение с образцами и их хранение во время транспортировки необходимы для проведения точного диагностического тестирования (см. приложение). Транспортировка образцов должна соответствовать любым применимым национальным и/или международным правилам, включая Типовые правила ООН и любые другие применимые правила в зависимости от используемого вида транспорта. При международной перевозке образцы от предполагаемых, вероятных или подтвержденных случаев MPXV, включая клинические образцы, вирусные изоляты и культуры, должны перевозиться как категория A, UN 2814 «инфекционное вещество, опасное для людей». Все транспортируемые образцы должны иметь соответствующую тройную упаковку, маркировку и документацию. Для перевозки требуется сертифицированный грузоотправитель опасных грузов. Для информации о требованиях к перевозке инфекционных материалов см. Рекомендации по правилам перевозки инфекционных материалов на 2021–2022 гг. (3). Хранение образцов. Образцы, собранные для исследования на MPXV, должны храниться в холодильнике (от 2 до 8° C) или замороженными (-20°C или ниже) в течение одного часа после сбора. Если транспортировка исследуемого образца превышает 7 дней, образцы следует хранить при температуре -20° C или ниже. Более длительное хранение образцов (> 60 дней с момента сбора) рекомендуется при температуре -70° C. Вирусная ДНК, присутствующая в материале кожных поражений, относительно стабильна при хранении в темном прохладном месте, что может быть рассмотрено при недоступности холодовой цепи (4), однако перевозка при комнатной температуре не рекомендуется до тех пор, пока исследования не подтвердят, что это не влияет на качество образца. Следует избегать повторяющихся циклов заморозки и оттаивания, поскольку они могут снизить качество образцов. Помимо конкретных материалов для сбора, указанных в приложении, другие необходимые материалы и оборудование могут включать: контейнеры для транспортировки, пакеты для сбора образцов и тройную упаковку, сумки-холодильники и хладоэлементы или сухой лед, стерильные расходные Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -3- материалы для взятия крови (например, иглы, шприцы и пробирки), этикетки и перманентные маркеры, средства индивидуальной защиты и материалы для обеззараживания поверхностей. Методы и алгоритм лабораторных исследований Тестирование на наличие MPXV должно проводиться в надлежащим образом оборудованных лабораториях персоналом, обученным соответствующим техническим процедурам и процедурам безопасности. Подтверждение инфекции MPXV основывается на тесте методом амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени или классической ПЦР для обнаружения уникальных последовательностей вирусной ДНК. ПЦР можно использовать отдельно или в сочетании с секвенированием. Несколько исследовательских групп разработали валидированные протоколы ПЦР для обнаружения OPXV и, в частности, MPXV, некоторые из которых включают различение клад бассейна Конго и Западной Африки (5–9). Некоторые протоколы включают два этапа, в которых первая реакция ПЦР обнаруживает OPXV, но не определяет вид. Затем может следовать второй этап, основанный на ПЦР или секвенировании для специфического обнаружения MPXV. Прежде чем тест будет использоваться для тестирования клинических образцов человека в лаборатории, он должен пройти валидацию и/или верификацию в лаборатории должным образом обученным персоналом. Реагенты. Реагенты следует хранить в соответствии с рекомендациями производителя. Существует ряд наборов последовательностей праймеров и зондов для ПЦР на OPXV и, в частности, MPXV, которые были опубликованы в литературе и могут использоваться для внутрилабораторной разработки тестов в лабораториях с соответствующими возможностями (5–7). Наборы для ПЦР, выявляющие OPXV или, в частности, MPXV, находятся в стадии разработки (10,11), а коммерческие тест-системы для ПЦР или серологии в настоящее время не доступны для широкого использования. Положительный контрольный материал для ПЦР можно заказать в специализированных организациях (12). Наилучшая практика заключается в том, что положительный контроль должен быть включен при низкой (выше предела обнаружения), но легко обнаруживаемой концентрации; включение материалов контроля качества, где это возможно, может помочь в обнаружении проблем с тестированием. Контроль должен предоставлять информацию о 1) качестве образца, 2) качестве нуклеиновых кислот и 3) качестве процесса. ПЦР может быть чрезвычайно чувствительным, поэтому следует приложить усилия для снижения риска контаминации, а отрицательные контроли следует использовать при каждой постановке, чтобы убедиться, что контаминации не произошло. Контроль целостности образца (например, РНКаза Р), контроль выделения, положительный контроль и контроль ингибирования могут помочь отличить ложноотрицательный результат от истинно отрицательного. Контроли следует использовать в соответствии с лабораторными СОП. Если какой-либо из контролей не срабатывает, тестирование необходимо повторить. Утилизация отходов. Все отходы, которые могут содержать MPXV, должны быть обеззаражены перед утилизацией с использованием утвержденного метода, такого как автоклавирование или химическая дезинфекция, в соответствии с утвержденными конкретными лабораторными процедурами. Электронная микроскопия. Электронная микроскопия может быть использована для оценки образца на наличие потенциального поксвируса, но из-за наличия молекулярных тестов, а также требуемых высоких технических навыков и оборудования этот метод обычно не используется для диагностики поксвирусов. Культивирование вируса. Выделение вируса не рекомендуется в качестве рутинной диагностической процедуры и должно выполняться только в лабораториях с соответствующим опытом и мерами контроля. Поскольку эти методы не рекомендуются как часть рутинной диагностики, конкретные детали этих методологий не рассматриваются в этом документе. Интерпретация лабораторных результатов Подтверждение инфекции MPXV должно учитывать клиническую и эпидемиологическую информацию. Положительный результат на OPXV с помощью ПЦР-анализа с последующим подтверждением MPXV с помощью ПЦР и/или секвенирования или положительный результат на MPXV с помощью ПЦР- анализа в предполагаемых случаях в эндемичных и неэндемичных районах указывает на подтверждение инфекции MPXV. Хотя предпочтительным является специфическое подтверждающее тестирование на MPXV, обнаружение OPXV с помощью ПЦР-анализа считается достаточным для лабораторного подтверждения подозрительных случаев в неэндемичных странах. Государствам-участникам необходимо немедленно уведомлять ВОЗ о лабораторно подтвержденных случаях. Если клиническая картина и эпидемиологические данные указывают на инфекцию MPXV, несмотря на отрицательные результаты ПЦР, серологическое тестирование может быть полезным для дальнейшего изучения предшествующей инфекции в эпидемиологических целях. Ложноотрицательным результатам может способствовать ряд факторов, включая низкое качество образца, неправильное обращение или транспортировку и технические причины, присущие тесту, например, ошибка при выделении ДНК. В дополнение к использованию секвенирования для диагностических целей данные о генетических последовательностях (ДГП) также могут предоставить ценную информацию, помогающую понять происхождение, эпидемиологию и характеристики вируса, – например, возникают ли случаи в результате однократного или многократного заноса из других мест. На этом этапе рекомендуется секвенировать MPXV из как можно большего числа положительных образцов от разных пациентов. ВОЗ настоятельно рекомендует странам и лабораториям своевременно обмениваться данными о ДГП, включая необработанные данные, когда это возможно, через имеющиеся и доступные базы данных. ДГП могут быть сгенерированы с использованием методов Сэнгера или секвенирования нового поколения (СНП). Управление биологическими рисками Рекомендуется, чтобы все манипуляции с образцами, полученными от предполагаемых, вероятных или подтвержденных случаев оспы обезьян, проводились в лаборатории в соответствии с подходом, основанным на оценке риска. Каждая лаборатория должна проводить локальную (то есть на уровне учреждения) оценку рисков. При манипуляциях с биологическими образцами должны соблюдаться основные требования биобезопасности, аналогичные тем, которые ранее назывались уровнем биобезопасности 2 (УББ-2), и должны применяться повышенные меры контроля на основе Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -4- местной оценки риска. MPXV можно заразиться на этапе обработки образцов от контаминированного материала или неправильных процессов. Поэтому в дополнение к основным требованиям рекомендуются повышенные меры биобезопасности, в том числе следующие для целей клинических исследований без размножения вируса: • Образцы от пациентов с подозрением на инфекцию MPXV должны обрабатываться в функционирующем боксе биологической безопасности класса I или II до инактивации образцов. Для правильно инактивированных образцов бокс биологической безопасности не требуется. • Лабораторный персонал должен носить соответствующие СИЗ, особенно при работе с образцами перед инактивацией. • Если для процедуры требуется использование центрифуги, следует использовать стаканы с герметичными крышками или герметичные роторы. Следует предусмотреть дополнительные меры контроля для конкретных процедур, включая процедуры с образованием аэрозолей, в соответствии с местной оценкой риска. Дополнительную информацию об основных требованиях биобезопасности и усиленных мерах контроля см. в четвертом издании Руководства ВОЗ по биобезопасности (13). Гигиена труда Различные вакцины против натуральной оспы, содержащие вирус коровьей оспы, обеспечивают перекрестную защиту от других OPXV, включая оспу обезьян, поэтому национальные органы здравоохранения должны провести оценку риска и рассмотреть вопрос о целесообразности организации иммунизации медицинских работников, включая персонал лабораторий, и другого персонала, подверженного риску взаимодействия с людьми или образцами MPX (14). Нереплицирующаяся вакцина, состоящая из модифицированного вируса осповакцины штамма Ankara, известного как MVA-BN, была одобрена для профилактики натуральной оспы (которая была объявлена ликвидированной в 1980 г.) в 2013 г. В 2019 г. она также была одобрена для профилактики оспы обезьян двумя органами, регулирующими оборот лекарственных средств. Эту вакцину также можно рассматривать для профилактики оспы обезьян в профессиональных условиях. Для лечения натуральной оспы и оспы обезьян был одобрен один противовирусный препарат. Рекомендации по иммунизации и лечению будут предоставлены отдельно. Отчетность о случаях и результатах исследований Лаборатории должны соблюдать национальные требования к отчетности. Все результаты тестов (положительные или отрицательные) должны быть немедленно сообщены национальным органам. Напоминаем государствам-участникам ММСП об их обязательствах по обмену с ВОЗ соответствующей медико-санитарной информацией о событиях, о которых они уведомили ВОЗ, с использованием механизма принятия решений, изложенного в приложении 1 к ММСП (2005 г.) (15). Глобальная лабораторная сеть Доступ к своевременному и точному лабораторному тестированию образцов от расследуемых случаев является важной частью диагностики и эпиднадзора за данной распространяющейся инфекцией. Все страны должны иметь доступ к надежному тестированию либо на национальном уровне, либо путем направления образцов в лаборатории других стран, которые желают и могут проводить диагностику на OPXV или MPXV. ВОЗ через свои региональные бюро может помочь государствам-участникам получить доступ к тестированию посредством направления образцов. Там, где это уместно и безопасно, инактивация образцов в местной лаборатории может облегчить направление образцов и логистические вопросы. Странам рекомендуется делиться своими данными последовательностей для лучшего понимания текущей вспышки. Центры США по контролю и профилактике заболеваний (Соединенные Штаты Америки) являются Сотрудничающим центром ВОЗ по натуральной оспе и другим поксвирусным инфекциям, а Федеральное бюджетное научное учреждение «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии “Вектор”» (Российская Федерация) является Сотрудничающим центром ВОЗ по диагностике ортопоксвирусных заболеваний и репозиторием штаммов вируса натуральной оспы и ДНК. Процесс и методика Данный документ был разработан в консультации с глобальными внешними экспертами в области OPXV и других лабораторных исследований. Были также проведены консультации с сотрудниками всех подразделений ВОЗ, обладающими опытом в области лабораторной диагностики, эпидемиологии и клинического ведения. Эта версия рекомендаций включает последние сведения о вирусе и его характеристиках, а также отвечает на вопросы и рассматривает ситуации, полученные от страновых и региональных бюро ВОЗ и по другим каналам. Ограничения Настоящие рекомендации служат для предоставления временных рекомендаций по диагностике инфекции MPXV в контексте текущей вспышки в нескольких неэндемичных странах во многих регионах мира (май 2022 г.). ВОЗ будет выпускать дальнейшие обновления данных временных рекомендаций по мере необходимости. Эти рекомендации будут обновляться по мере поступления информации об эпидемиологии этой вспышки. Планы по актуализации ВОЗ работает с экспертами по всему миру и продолжает внимательно следить за ситуацией на предмет любых изменений, которые могут повлиять на данные временные рекомендации. ВОЗ выпустит дополнительное обновление. В противном случае действие этих временных рекомендаций истекает через год после даты публикации. Выражение благодарности Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -5- Внешние участники с экспертными знаниями в предметной области: Meera Chand, Daniel Bailey, Claire Gordon, Tommy Rampling и Susan Hopkins, Управление санитарно-эпидемиологической безопасности, Соединенное Королевство Великобритании и Северной Ирландии; Ринат Максютов, ГНЦ «Вектор», Российская Федерация; Andreas Nitsche, Институт им. Роберта Коха, Германия; Chantal Reusken, Национальный институт общественного здравоохранения и окружающей среды (RIVM), Нидерланды; Marion Koopmans, медицинский центр Erasmus, Нидерланды; Francesca Colavita, Anna Rosa Garbuglia, Институт Спалланцани Италия; Jacqueline Weyer, Национальный институт инфекционных заболеваний, Южная Африка. Внешний специалист: Christina Hutson, Центры США по контролю и профилактике заболеваний, Соединенные Штаты Америки. Сотрудники штаб-квартиры и региональных бюро ВОЗ: Ali Ahmed Yahaya, Amal Barakat, Lisa Carter, Sébastien Cognat, Manish Kakkar, Kazunobu Kojima, Belinda L. Herring, Rosamund Lewis, Jairo Mendez-Rico, Karen Nahapetyan, Dhamari Naidoo, Bernard Onoja, Mark D Perkins, Jilian Sacks, Satoshi Shimada, Lorenzo Subissi, Karin Von Eije, Maria Van Kerkhove и Pushpa Wijesinghe. Заявление о конфликте интересов В связи с возможным наличием конфликта интересов эксперты сети представили заявления о конфликте интересов. Заявления были рассмотрены, при этом не было выявлено никаких конфликтов в отношении поддержки этого руководящего документа. Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -6- Библиография 1. World Health Organization. Surveillance, case investigation and contact tracing for Monkeypox [онлайн-документ]. URL: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/354486/WHO-MPX-Surveillance-2022.1-eng.pdf 2. World Health Organization. Managing epidemics: Key facts aboiut major deadly diseases [онлайн-документ]. URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/272442 3. World Health Organization. WHO Guidance on regulations for the transport of infectious substances 2021-2022 [онлайн-документ]. URL: https://www.who.int/publications/i/item/9789240019720 4. McCollum AM, Damon IK. Human Monkeypox. Clinical Infectious Diseases. 2014 Jan 15;58(2):260–7. 5. Li Y, Zhao H, Wilkins K, Hughes C, Damon IK. Real-time PCR assays for the specific detection of monkeypox virus West African and Congo Basin strain DNA. Journal of Virological Methods. 2010 Oct;169(1):223–7. 6. Schroeder K, Nitsche A. Multicolour, multiplex real-time PCR assay for the detection of human-pathogenic poxviruses. Molecular and Cellular Probes. 2010 Apr;24(2):110–3. 7. Maksyutov RA, Gavrilova EV, Shchelkunov SN. Species-specific differentiation of variola, monkeypox, and varicella-zoster viruses by multiplex real-time PCR assay. Journal of Virological Methods. 2016 Oct;236:215–20. 8. Ropp SL, Jin Q, Knight JC, Massung RF, Esposito JJ. PCR strategy for identification and differentiation of small pox and other orthopoxviruses. J Clin Microbiol. 1995 Aug;33(8):2069–76. 9. Espy MJ, Cockerill III FR, Meyer RF, Bowen MD, Poland GA, Hadfield TL, et al. Detection of smallpox virus DNA by LightCycler PCR. J Clin Microbiol. 2002 Jun;40(6):1985–8. 10. Li D, Wilkins K, McCollum AM, Osadebe L, Kabamba J, Nguete B, et al. Evaluation of the GeneXpert for Human Monkeypox Diagnosis. Am J Trop Med Hyg. 2017 Feb 8;96(2):405–10. 11. Townsend MB, MacNeil A, Reynolds MG, Hughes CM, Olson VA, Damon IK, et al. Evaluation of the Tetracore Orthopox BioThreat® antigen detection assay using laboratory grown orthopoxviruses and rash illness clinical specimens. Journal of Virological Methods. 2013 Jan;187(1):37–42. 12. European Virus Archive. Monkeypox virus [онлайн-документ]. URL: https://www.european-virus-archive.com/search/node/monkeypox 13. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual, 4th edition [онлайн-документ]. 2020. URL: https://www.who.int/publications/i/item/9789240011311 14. World Health Organization. Meeting of the Strategic Advisory Group of Experts on immunization, November 2013 — conclusions and recommendations = Réunion du Groupe stratégique consultatif d’experts sur la vaccination, novembre 2013 — conclusions et recommandations [онлайн-документ]. URL: https://apps.who.int/iris/handle/10665/242164 15. Всемирная организация здравоохранения. Международные медико-санитарные правила (2005 г.). Третье издание [онлайн-документ]. URL: https://www.who.int/ru/publications/i/item/9789241580496 Лабораторное тестирование на вирус оспы обезьян. Временные рекомендации -7- Приложение. Сбор и хранение образцов Тип образца Материалы, необходимые для сбора Температура хранения Цель сбора Материал кожных поражений, в том числе: − Мазки экссудата пораженного участка − Покрышки пораженного участка − Струпы (корка) участка поражения Тупфер из дакрона или полиэстера с точкой разлома и вирусологической транспортной средой или сухой тупфер Хранить в холодильнике (2-8° C) или заморозить (-20° C или ниже) в течение 1 часа после сбора; -20° C или ниже после 7 дней Рекомендуется для диагностики Мазок из ротоглотки Тупфер из дакрона или полиэстера с точкой разлома и вирусологической транспортной средой или сухой тупфер См. выше Рекомендуется для диагностики, если это возможно, в дополнение к материалу кожного поражения Ректальные и/или генитальные мазки Тупфер из дакрона или полиэстера с точкой разлома и вирусологической транспортной средой или сухой тупфер См. выше Возможно использование в исследовательских целях (в соответствии с этическими принципами) Моча Стерильная пробирка См. выше Возможно использование в исследовательских целях (в соответствии с этическими принципами) Семенная жидкость Стерильная пробирка Комнатная температура в течение <1 часа (затем -20° C или ниже) Возможно использование в исследовательских целях (в соответствии с этическими принципами) Цельная кровь Стерильная пробирка с ЭДТА См. выше Возможно использование в исследовательских целях (в соответствии с этическими принципами) Сыворотка крови Пробирки для отделения сыворотки Хранить в холодильнике (2-8° C) или заморозить (-20° C или ниже) в течение 1 часа после сбора; -20° C или ниже после 7 дней Возможно для проведения серологического исследования для помощи в диагностике или в исследовательских целях (в соответствии с этическими нормами) Плазма крови Пробирка с ЭДТА См. выше Возможно для проведения серологического исследования для помощи в диагностике или в исследовательских целях (в соответствии с этическими нормами) Originally issued in English by the World Health Organization HQ in Geneva, under the title Laboratory testing for the monkeypox virus: interim guidance, 23 May 2022 in 2022. © Всемирная организация здравоохранения, 2022 г. Некоторые права защищены. Данная работа распространяется на условиях лицензии CC BY-NC-SA 3.0 IGO. Идентификационный номер ВОЗ: WHO/MPX/Laboratory/2022.1