VERSION 1 – DATE EFFECTIVE : 01/01/2016 PROCÉDURES GÉNÉRALES DE SÉCURITÉ DANS LE LABORATOIRE DE DIAGNOSTIC MICROSCOPIQUE DU PALUDISME DIAGNOSTIC MICROSCOPIQUE DU PALUDISME MODES OPÉRATOIRES NORMALISÉS – DMP-MON-11 1. OBJECTIF ET CHAMP D’ACTION Fournir une description détaillée des procédures élémentaires de sécurité au laboratoire à respecter lors du prélèvement et de la manipulation d’échantillons de sang, de la préparation d’étalements de sang et de la coloration pour l’examen microscopique du paludisme. Cette procédure ne peut être modifiée qu’avec l’approbation du coordonnateur national pour l’assurance de la qualité du diagnostic microscopique du paludisme. Toutes les procédures exposées ici sont obligatoires pour tous les techniciens de la microscopie travaillant dans les laboratoires nationaux de référence, dans les laboratoires des hôpitaux ou dans les laboratoires médicaux de base au sein des établissements sanitaires où sont effectués des examens microscopiques pour le diagnostic du paludisme. 2. HISTORIQUE Le personnel de laboratoire effectuant des travaux de microbiologie s’expose à des dangers lorsqu’il manipule des tissus et des échantillons de fluides humains. Les liquides biologiques humains, en particulier les échantillons de sang, sont des sources potentielles de maladies transmissibles comme l’infection à VIH-1 et -2, l’hépatite B et C et des virus de fièvres hémorragiques (par exemple Ebola) en cas de contact direct avec des lésions cutanées ou des muqueuses. L’infection peut s’acquérir par un contact direct avec le sang et d’autres liquides biologiques, après une inoculation accidentelle par des blessures sur la peau, causées par des objets tranchants contaminés, ou au contact d’un équipement ou d’autres objets inanimés contaminés. Tous les membres du personnel de laboratoire et sur le terrain devraient partir du principe que tous les échantillons humains sont potentiellement infectieux et observer les précautions universelles pour éviter de s’exposer à des infections transmises par le sang. Le superviseur du laboratoire a la responsabilité de s’assurer qu’une formation relative aux précautions universelles a été dispensée à tout le personnel et que les instructions pertinentes sont indiquées clairement dans le laboratoire. 3. FOURNITURES, MATÉRIEL ET ÉQUIPEMENTS • Une blouse de laboratoire. • Des lunettes de protection. • De l’alcool éthylique à 70 % ou de l’isopropanol ou de l’hypochlorite de sodium à 10 %. • Du détergent. • Une solution d’hypochlorite contenant du chlore libre à 1 g/l pour usage général. • Une solution d’hypochlorite contenant du chlore libre à 5 g/l au cas où du sang se répand. • Des gants de protection en latex jetables. • Du désinfectant ou un savon liquide antibactérien. 2DMP–MON–11 : PROCÉDURES GÉNÉRALES DE SÉCURITÉ DANS LE LABORATOIRE DE DIAGNOSTIC MICROSCOPIQUE DU PALUDISME • Un collecteur d’aiguilles ou un conteneur résistant aux perforations, avec couvercle, pour les objets tranchants. • Un conteneur en plastique dur avec couvercle pour les déchets infectieux. • Un conteneur en plastique pour les déchets non infectieux. • De petites serviettes. • De l’eau. • Un autoclave (souhaitable). 4. PROCÉDURE 4.1. Laboratoire ou lieu de travail • Prévoyez une zone propre, rangée et sans poussière, avec assez d’espace pour au moins deux techniciens de laboratoire ou membres du personnel travaillant côte à côte. • Si du sang est renversé, nettoyez ou décontaminez immédiatement les surfaces de travail avec de la javel à 10 % (hypochlorite de sodium), de l’isopropanol ou de l’alcool éthylique à 70 %. Nettoyez en tous les cas quotidiennement les surfaces à la fin de la journée de travail. • Étiquetez tous les réactifs et les colorants afin qu›ils soient utilisés correctement, en indiquant le nom, la date de la préparation ou la date d›ouverture, ainsi que la date de péremption le cas échéant. • Avant de les réutiliser, lavez toutes les verreries et les autres équipements, tels que les récipients pour la coloration, avec du détergent et rincez-les à l’eau. • Gardez toutes les fournitures et le matériel dans des tiroirs ou des boîtes adaptés, clairement étiquetés sur l’extérieur et dans un endroit à l’abri de la poussière, des saletés et des insectes. • Emballez et transportez les échantillons sanguins conformément aux réglementations qui s’appliquent sur le plan national et/ou international. • Conservez les produits chimiques dangereux comme le méthanol dans une armoire fermée à clé lorsque vous ne les utilisez pas. 4.2. Protection individuelle • Tous les employés qui manipulent des échantillons sanguins devraient être vaccinés conformément à la politique en vigueur sur le plan national (contre l’hépatite B, par exemple). • Utilisez des gants en latex jetables lorsque vous manipulez du sang humain, que cela soit en laboratoire ou sur le terrain. Portez des gants pour toutes les procédures pouvant mener à un contact accidentel direct avec du sang ou des matières infectieuses. Jetez les gants contaminés ou troués. • Portez une blouse lorsque vous travaillez dans le laboratoire et retirez-la avant de quitter le laboratoire et lorsque vous vous trouvez à l’extérieur. • Portez des lunettes de protection. • Mettez un pansement étanche sur les lésions cutanées, comme les coupures, les écorchures, les ulcères ou une dermatite, avant d’enfiler des gants. • Ne stockez pas de médicaments, de produits cosmétiques ou d’aliments dans le laboratoire ; ne portez pas de maquillage, de lentilles de contact, et ne mangez ou ne buvez pas dans les espaces de travail. • L’utilisation des téléphones mobiles ne devrait pas être autorisée dans le laboratoire. • Retirez les gants lorsque vous utilisez un ordinateur personnel ou un téléphone (fixe) dans le laboratoire. • Lavez-vous les mains soigneusement sous l’eau courante et utilisez un désinfectant pour la peau, un savon liquide antibactérien ou de l’alcool à 70 % avant et après vos activités et avant de quitter le laboratoire. • Lisez la « fiche de données de sécurité » pour chaque réactif utilisé. 3DMP–MON–11 : PROCÉDURES GÉNÉRALES DE SÉCURITÉ DANS LE LABORATOIRE DE DIAGNOSTIC MICROSCOPIQUE DU PALUDISME 4.3. Sécurité lors du prélèvement et de la manipulation de sang • N’utilisez que des lancettes jetables, ainsi que des aiguilles et des seringues hypodermiques. Ne les réutilisez jamais. • Veillez à utiliser les micropipettes correctement, c’est-à-dire à ne pas effectuer de prélèvement avec pipette par la bouche ; utilisez des dispositifs de pipetage mécaniques. • Déballez les aiguilles hypodermiques juste avant de les utiliser et manipulez-les prudemment. Après les avoir utilisées, vous ne devez pas reboucher ou couper les aiguilles, ni les retirer des seringues jetables. Jetez tout le dispositif dans un collecteur d’aiguilles adapté. • Veillez à ne pas produire de bulles et d’aérosols lorsque vous manipulez des échantillons sanguins. 4.4. Gestion des déversements et de l’exposition accidentelle à des échantillons sanguins potentiellement infectieux • Toutes les procédures de premiers secours à suivre devraient être affichées dans le laboratoire pour pouvoir s’y référer rapidement. Elles devraient fournir des instructions claires relatives à la gestion des déversements et des expositions accidentelles. • Notifiez le plus rapidement possible toutes les blessures et les accidents mentionnés ci-dessous à la personne chargée de la prévention des infections dans le laboratoire, ou à l’administrateur ou directeur en charge du laboratoire, ou encore à la personne responsable des premiers secours : · produits répandus ou accidents impliquant des échantillons potentiellement infectieux (par exemple du sang, du sérum, du plasma) ; · tout sang projeté dans les yeux ou sur des lésions cutanées, les coupures dues à du verre brisé ou les piqûres avec des aiguilles ou des seringues ; et • tout symptôme pathologique survenant après un accident. • Si du sang est répandu, il faut immédiatement l’absorber avec une serviette en papier, avant de verser avec précaution 5 g/l de solution d’hypochlorite ou de l’alcool éthylique à 70 % sur la serviette. • Si la peau est abîmée, écorchée, endommagée ou perforée par une aiguille contaminée, retirez les habits contaminés et nettoyez immédiatement et vigoureusement la zone au savon et à l’eau durant 15 minutes. • Si du sang est projeté dans les yeux, rincez immédiatement et abondamment sous l’eau pendant au moins 15 minutes. • Consultez les procédures de sécurité normalisées pour obtenir des orientations immédiates. • Consultez un médecin si nécessaire. 5. RÉFÉRENCE OMS. Manuel de sécurité biologique en laboratoire. Troisième édition. Genève, 2005. 6. HISTORIQUE DU DOCUMENT Date (mois/année) Version Commentaires Personne responsable (Nom, prénom) Janvier 2016 1 Examiné et finalisé par des experts, édité et mis en page Gonzales, Glenda Fonctionnaire technique, WPRO WHO/HTM/GMP/MM/SOP/2016.11 © Organisation mondiale de la Santé 2016. Tous droits réservés.
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Procédures générales de sécurité dans le laboratoire de diagnostic microscopique du paludisme
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